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上新 | 蛋白酶K滅活太麻煩?熱敏版55℃ 10分鐘搞定!

2025-5-28  閱讀(154)

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在分子生物學(xué)研究領(lǐng)域,蛋白酶K憑借的蛋白降解性能,始終是核酸提取與樣本裂解等核心實驗步驟的關(guān)鍵工具。其通過高效裂解細胞并降解蛋白質(zhì),為核酸的快速釋放與純化奠定基礎(chǔ)。然而,傳統(tǒng)蛋白酶K在實際應(yīng)用中暴露出顯著的技術(shù)瓶頸:滅活過程復(fù)雜且風險高。無論是采用苯酚/氯仿抽提的多步驟純化流程,還是高溫處理引發(fā)的樣本降解風險,都可能導(dǎo)致實驗周期延長、結(jié)果重現(xiàn)性降低,進而影響后續(xù)數(shù)據(jù)分析的準確性與可靠性。





為突破這一技術(shù)壁壘,翌圣生物成功研發(fā)并推出熱敏蛋白酶K(Thermolabile Proteinase K,Cat#14809)產(chǎn)品,該產(chǎn)品只需在55℃條件下加熱10分鐘即可實現(xiàn)滅活,無需額外的核酸純化步驟,有效避免了酶殘留對下游實驗的干擾。例如:Thermolabile Proteinase K應(yīng)用于直擴PCR、DNA&RNA建庫等實驗中,可省略多次純化流程,有效降低核酸損耗,提升樣本利用率;應(yīng)用于甲基化DNA分析過程中,通過精準控制酶解條件,避免因過度消化導(dǎo)致的甲基化位點破壞,確保實驗結(jié)果的準確性與可靠性。

產(chǎn)品簡介

Thermolabile Proteinase K

Thermolabile Proteinase K(TLPK)是通過基因工程技術(shù)改造獲得的重組絲氨酸蛋白酶,保持了與野生型版本相似的活性和特異性,具備廣泛的切割活性,能夠高效水解多種類型的肽鍵。在理化性質(zhì)方面,TLPK展現(xiàn)出良好的緩沖液兼容性,可在多種緩沖體系中保持活性。其最適反應(yīng)條件為pH 7.0-9.5、溫度20-40℃,在此區(qū)間內(nèi)能夠發(fā)揮最佳效能。該酶具備優(yōu)異的熱敏感性,只需在55℃條件下溫育10分鐘即可全熱失活。

表1. 普通款和熱敏款蛋白酶K特點比較

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在此,我們向您推介翌圣生物全新研發(fā)的來源于畢赤酵母表達系統(tǒng)的Thermolabile Proteinase K(Cat#14809),該產(chǎn)品消化能力強、熱敏性好、純度高、殘留低。數(shù)據(jù)展示如下:


消化能力強、熱敏感

分別使用翌圣及進口品牌Supplier A的TLPK處理限制性內(nèi)切酶PvuII后,使用處理后的PvuII對λDNA進行處理,結(jié)果顯示翌圣TLPK可有效抑制PvuII活性,且55℃條件下溫育10分鐘可使TLPK全熱失活,對后續(xù)反應(yīng)體系中的添加的蛋白無影響。

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圖1.消化能力與熱敏感性能驗證


無核酸外切酶、切口酶、RNase殘留

將0.12 U TLPK分別與核酸底物孵育,并通過瓊脂糖凝膠電泳分析譜帶變化。實驗結(jié)果表明,翌圣的3個批次TLPK均未檢測到核酸外切酶、切口酶或RNase殘留,為實驗結(jié)果的準確性和可靠性提供了有力保障。

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圖2.核酸外切酶、切口酶、RNase殘留結(jié)果驗證


為滿足多樣化實驗需求,翌圣生物精心推出蛋白酶K系列產(chǎn)品,涵蓋普通型與熱敏型兩大品類。普通型蛋白酶K適用于常規(guī)蛋白降解場景,而熱敏型產(chǎn)品則憑借快速熱滅活特性,為下游分子生物學(xué)實驗提供高效解決方案,為科研工作者提供精準適配的實驗工具選擇。


產(chǎn)品名稱

產(chǎn)品編號

規(guī)格

產(chǎn)品特點

Proteinase K蛋白酶K

10401ES

100mg/1g/5 g/100g

粉末狀,可以根據(jù)實驗要求,配制成目標濃度

Proteinase K Solution蛋白酶K溶液(20 mg/mL)

10412ES

1 mL/10 mL/25 mL/500 mL

液體,免配制,使用起來更方便

Proteinase K Solution蛋白酶K溶液(低殘留)

10410ES

1 mL/5 mL/100 mL/1000 mL

極低的背景菌殘留,更適合病原微生物核酸提取

Thermolabile Proteinase K

14809ES

30 U/120 U

熱敏款,適用于反應(yīng)后需在溫和條件下去除蛋白酶K活性的場景或熱敏感樣本的處理



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