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上海徠同生物科技有限公司

流式細(xì)胞增殖-實(shí)驗(yàn)原理介紹

時(shí)間:2022-8-18閱讀:132
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技術(shù)原理

EdU(5-ethynyl-2' -deoxyuridine),中文名為5-乙炔基-2' -脫氧尿苷,是一種新型胸苷(胸腺嘧啶脫氧核苷,thymidine)類似物,EdU可以在DNA合成過程中替代胸苷摻入到新合成的DNA中。另一方面,EdU上的乙炔基能與熒光標(biāo)記的小分子疊氮化物探針(如Azide Alexa Fluor 488、Azide Alexa Fluor 555、Azide Alexa Fluor 594、Azide Alexa Fluor 647等)通過一價(jià)銅離子的催化發(fā)生共價(jià)反應(yīng),形成穩(wěn)定的三唑環(huán),該反應(yīng)非常迅速,被稱作點(diǎn)擊反應(yīng)(Click reaction),通過點(diǎn)擊反應(yīng),新合成的DNA會(huì)被相應(yīng)的熒光探針?biāo)鶚?biāo)記,從而可以使用適當(dāng)?shù)臒晒鈾z測設(shè)備檢測到增殖的細(xì)胞。

實(shí)驗(yàn)方法

Step1:細(xì)胞培養(yǎng)

Step2:轉(zhuǎn)染或藥物處理

Step3:加EDU試劑

Step4:細(xì)胞收集

Step5:上機(jī)檢測

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