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CELL-WISE 293 培養(yǎng)基(貨號(hào):CW001)
產(chǎn)品特點(diǎn)
應(yīng)用場(chǎng)景:專為 HEK293 細(xì)胞(如 293-F、293-T、Expi-293F 等)的高密度懸浮培養(yǎng)及瞬時(shí)轉(zhuǎn)染設(shè)計(jì)。
成分特性:
無(wú)蛋白、無(wú)動(dòng)物源、化學(xué)成分wan全限定,排除血清批次差異及外源污染風(fēng)險(xiǎn),保障實(shí)驗(yàn)穩(wěn)定性與可重復(fù)性。
即用型配方,無(wú)需額外添加成分,開箱即可使用,簡(jiǎn)化操作流程。
參數(shù)規(guī)格
項(xiàng)目 | 指標(biāo) |
外觀 | 澄清透明紅色液體 |
滲透壓 | 275±15 mOSM |
pH 值 | 6.9-7.4 |
無(wú)菌檢測(cè) | 無(wú)菌 |
內(nèi)毒素 | <5 EU/mL |
儲(chǔ)存條件 | 2-8℃,避光保存 |
有效期 | 12 個(gè)月 |
產(chǎn)品用途
僅限科學(xué)研究使用,不可用于人類或動(dòng)物的診斷、治療及臨床應(yīng)用。
使用方法:細(xì)胞馴化指南
1. 直接馴化(推薦大多數(shù)場(chǎng)景)
培養(yǎng)于其他培養(yǎng)基中的細(xì)胞,可直接通過(guò)常規(guī)傳代稀釋更換為 Balance CD 293 培養(yǎng)基,無(wú)需逐步過(guò)渡。
2. 漸進(jìn)式馴化(適用于特殊需求或敏感細(xì)胞)
注意事項(xiàng):選擇低代次、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行馴化。
步驟①:
在原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細(xì)胞,連續(xù)傳代 2-3 次至生長(zhǎng)穩(wěn)定。
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá) 2×10? cells/mL 時(shí)傳代,初始接種密度為 0.5-0.6×10? cells/mL,使用 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance CD 293 培養(yǎng)基 混合體系。
步驟②:
培養(yǎng)條件:37℃,5% CO?,恒溫?fù)u床轉(zhuǎn)速 110-175 rpm。
步驟③:
培養(yǎng) 3-4 天后,若細(xì)胞密度達(dá) 3×10? cells/mL 且活率 > 90%,傳代時(shí)調(diào)整混合比例為 50% 原培養(yǎng)基 + 50% Balance CD 293 培養(yǎng)基,接種密度維持 0.5×10? cells/mL。
若細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢:可離心保留 20% 條件培養(yǎng)基,加入 80% 新配的 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance CD 293 培養(yǎng)基 繼續(xù)培養(yǎng)。
步驟④:
重復(fù)步驟③,逐步提高 Balance CD 293 培養(yǎng)基比例(如 25:75→10:90),直至wan全使用 100% Balance CD 293 培養(yǎng)基。
步驟⑤:
wan全適應(yīng)后,細(xì)胞在 100% 培養(yǎng)基中傳代 3-4 天可達(dá) 2-3×10? cells/mL,活率 > 90%。后續(xù)傳代起始密度可降至 0.3×10? cells/mL,建議傳代 2-3 次后進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
特別提示:馴化初期(前 3 代)細(xì)胞狀態(tài)可能波動(dòng),通常從第 4 代開始顯著改善。
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