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CELL-WISE 293 培養(yǎng)基(貨號(hào):CW001)產(chǎn)品特性
產(chǎn)品特性
應(yīng)用場(chǎng)景:專為HEK293 細(xì)胞(如 293-F、293-T、Expi-293F 等)的高密度懸浮培養(yǎng)及瞬時(shí)轉(zhuǎn)染開(kāi)發(fā),支持細(xì)胞規(guī)?;瘮U(kuò)增與高效外源基因表達(dá)。
成分優(yōu)勢(shì):
無(wú)蛋白、無(wú)動(dòng)物源成分、化學(xué)成分wan全限定,排除血清 / 動(dòng)物源組分帶來(lái)的批次差異、病毒污染風(fēng)險(xiǎn),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性與可重復(fù)性。
即用型配方,無(wú)需額外添加血清、生長(zhǎng)因子等成分,開(kāi)瓶后可直接用于細(xì)胞培養(yǎng),簡(jiǎn)化操作流程。
技術(shù)參數(shù)
檢測(cè)項(xiàng)目 | 指標(biāo)要求 |
外觀 | 澄清透明紅色液體 |
滲透壓 | 275±15 mOSM |
pH 值 | 6.9~7.4 |
無(wú)菌性 | 經(jīng)培養(yǎng)法檢測(cè)無(wú)微生物生長(zhǎng) |
內(nèi)毒素水平 | <5 EU/mL |
儲(chǔ)存條件 | 2~8℃避光保存 |
有效期 | 12 個(gè)月(未開(kāi)封) |
適用范圍
僅供科研用途(如細(xì)胞生物學(xué)研究、重組蛋白生產(chǎn)、病毒載體制備等),嚴(yán)禁用于人類或動(dòng)物的診斷、治療或臨床應(yīng)用。
細(xì)胞馴化操作指南
一、直接馴化(常規(guī)場(chǎng)景推薦)
對(duì)于多數(shù)已適應(yīng)無(wú)血清懸浮培養(yǎng)體系的 HEK293 細(xì)胞株,可直接通過(guò)常規(guī)傳代稀釋切換至 Balance CD 293 培養(yǎng)基,無(wú)需逐步過(guò)渡。
二、漸進(jìn)式馴化(敏感細(xì)胞或特殊需求場(chǎng)景)
前提條件:選擇 ** 低代次(≤P10)、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期(活率 > 95%)** 的細(xì)胞進(jìn)行馴化。
操作步驟:
基礎(chǔ)適應(yīng)階段
在原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細(xì)胞,連續(xù)傳代2~3 次至細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)穩(wěn)定。
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá) 2×10? cells/mL 時(shí),以 0.5~0.6×10? cells/mL 的密度傳代,使用 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance CD 293 培養(yǎng)基 的混合體系。
培養(yǎng)條件
環(huán)境參數(shù):37℃,5% CO?,恒溫?fù)u床轉(zhuǎn)速 110~175 rpm(根據(jù)培養(yǎng)體積調(diào)整)。
比例調(diào)整階段
培養(yǎng) 3~4 天后,若細(xì)胞密度達(dá) 3×10? cells/mL 且活率 > 90%,傳代時(shí)將混合比例調(diào)整為 50% 原培養(yǎng)基 + 50% Balance CD 293 培養(yǎng)基,接種密度維持 0.5×10? cells/mL。
若細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢:可離心收集細(xì)胞(保留 20% 上清條件培養(yǎng)基),加入 80% 新配的 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance CD 293 培養(yǎng)基 繼續(xù)培養(yǎng)。
wan全切換階段
重復(fù)上述步驟,逐步提高 Balance CD 293 培養(yǎng)基比例(如 25:75→10:90),直至wan全使用 100% 目標(biāo)培養(yǎng)基。
適應(yīng)驗(yàn)證
細(xì)胞在 100% Balance CD 293 培養(yǎng)基中傳代3~4 次后,若密度可達(dá) 2~3×10? cells/mL 且活率 > 90%,即完成馴化。
后續(xù)傳代起始密度可降至 0.3×10? cells/mL,建議再傳代2~3 次后進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
馴化初期(前 3 代)可能出現(xiàn)細(xì)胞密度增長(zhǎng)緩慢、活率波動(dòng)等現(xiàn)象,通常從第 4 代開(kāi)始恢復(fù)穩(wěn)定。
馴化過(guò)程中需定期監(jiān)測(cè)細(xì)胞形態(tài)、密度及活率,避免污染或代謝物積累影響細(xì)胞狀態(tài)。
如需進(jìn)一步補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)或操作細(xì)節(jié),請(qǐng)?zhí)峁┚唧w需求。
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