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上海徠同生物科技有限公司

CELL-WISE 293 培養(yǎng)基(貨號(hào):CW001)產(chǎn)品特性

時(shí)間:2025-7-8閱讀:22
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CELL-WISE 293 培養(yǎng)基(貨號(hào):CW001)產(chǎn)品特性

 

產(chǎn)品特性

  • 應(yīng)用場(chǎng)景:專為HEK293 細(xì)胞(如 293-F293-T、Expi-293F 等)的高密度懸浮培養(yǎng)及瞬時(shí)轉(zhuǎn)染開(kāi)發(fā),支持細(xì)胞規(guī)?;瘮U(kuò)增與高效外源基因表達(dá)。

  • 成分優(yōu)勢(shì)

    • 無(wú)蛋白、無(wú)動(dòng)物源成分、化學(xué)成分wan全限定,排除血清 / 動(dòng)物源組分帶來(lái)的批次差異、病毒污染風(fēng)險(xiǎn),確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性與可重復(fù)性。

    • 即用型配方,無(wú)需額外添加血清、生長(zhǎng)因子等成分,開(kāi)瓶后可直接用于細(xì)胞培養(yǎng),簡(jiǎn)化操作流程。

技術(shù)參數(shù)

檢測(cè)項(xiàng)目

指標(biāo)要求

外觀

澄清透明紅色液體

滲透壓

275±15 mOSM

pH

6.9~7.4

無(wú)菌性

經(jīng)培養(yǎng)法檢測(cè)無(wú)微生物生長(zhǎng)

內(nèi)毒素水平

<5 EU/mL

儲(chǔ)存條件

2~8℃避光保存

有效期

12 個(gè)月(未開(kāi)封)

適用范圍

僅供科研用途(如細(xì)胞生物學(xué)研究、重組蛋白生產(chǎn)、病毒載體制備等),嚴(yán)禁用于人類或動(dòng)物的診斷、治療或臨床應(yīng)用。

細(xì)胞馴化操作指南

一、直接馴化(常規(guī)場(chǎng)景推薦)

對(duì)于多數(shù)已適應(yīng)無(wú)血清懸浮培養(yǎng)體系的 HEK293 細(xì)胞株,可直接通過(guò)常規(guī)傳代稀釋切換至 Balance CD 293 培養(yǎng)基,無(wú)需逐步過(guò)渡。

二、漸進(jìn)式馴化(敏感細(xì)胞或特殊需求場(chǎng)景)

前提條件:選擇 ** 低代次(≤P10)、處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期(活率 > 95%** 的細(xì)胞進(jìn)行馴化。

 

操作步驟



  1. 基礎(chǔ)適應(yīng)階段

    • 在原培養(yǎng)基中復(fù)蘇細(xì)胞,連續(xù)傳代2~3 至細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)穩(wěn)定。

    • 當(dāng)細(xì)胞密度達(dá) 2×10? cells/mL 時(shí),以 0.5~0.6×10? cells/mL 的密度傳代,使用 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance       CD 293 培養(yǎng)基 的混合體系。

  2. 培養(yǎng)條件

    • 環(huán)境參數(shù):37℃,5% CO?,恒溫?fù)u床轉(zhuǎn)速 110~175 rpm(根據(jù)培養(yǎng)體積調(diào)整)。

  3. 比例調(diào)整階段

    • 培養(yǎng) 3~4 天后,若細(xì)胞密度達(dá) 3×10? cells/mL 且活率 > 90%,傳代時(shí)將混合比例調(diào)整為 50% 原培養(yǎng)基 + 50% Balance       CD 293 培養(yǎng)基,接種密度維持 0.5×10? cells/mL。

    • 若細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢:可離心收集細(xì)胞(保留 20% 上清條件培養(yǎng)基),加入 80% 新配的 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance       CD 293 培養(yǎng)基 繼續(xù)培養(yǎng)。

  4. wan全切換階段

    • 重復(fù)上述步驟,逐步提高 Balance CD 293 培養(yǎng)基比例(如 25:75→10:90),直至wan全使用 100% 目標(biāo)培養(yǎng)基。

  5. 適應(yīng)驗(yàn)證

    • 細(xì)胞在 100% Balance CD 293 培養(yǎng)基中傳代3~4 次后,若密度可達(dá) 2~3×10? cells/mL 且活率 > 90%,即完成馴化。

    • 后續(xù)傳代起始密度可降至 0.3×10? cells/mL,建議再傳代2~3 后進(jìn)行轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)。

 

注意事項(xiàng)



  • 馴化初期(前 3 代)可能出現(xiàn)細(xì)胞密度增長(zhǎng)緩慢、活率波動(dòng)等現(xiàn)象,通常從 4 代開(kāi)始恢復(fù)穩(wěn)定

  • 馴化過(guò)程中需定期監(jiān)測(cè)細(xì)胞形態(tài)、密度及活率,避免污染或代謝物積累影響細(xì)胞狀態(tài)。

 

如需進(jìn)一步補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)或操作細(xì)節(jié),請(qǐng)?zhí)峁┚唧w需求。

 


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