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3-甲基組氨酸(3-MH)是一種翻譯后修飾的氨基酸,在人類尿液中排泄。尿中3-甲基組氨酸濃度可作為肌肉損傷患者骨骼肌蛋白質(zhì)分解的可靠指標(biāo)。尿中3-甲基組氨酸濃度也因食用大豆制品和肉類(尤其是雞肉)而升高。
3-甲基組氨酸(3-MH)ELISA試劑盒是一種用于體外定量測(cè)量血清、血漿和其他生物液體中3-甲基組氨酸(3-MH)濃度的ELISA試劑盒。我們一起來看看 艾美捷丨Abbexa的 3-甲基組氨酸(3-MH)ELISA試劑盒 ~
3-甲基組氨酸(3-MH)ELISA試劑盒的穩(wěn)定性:
由活性損失率決定。在適當(dāng)?shù)膬?chǔ)存條件下,在有效期內(nèi)損失率小于5%。為盡量減少性能波動(dòng),應(yīng)嚴(yán)格控制操作程序和實(shí)驗(yàn)室條件。并建議整個(gè)分析過程由同一用戶執(zhí)行。
3-甲基組氨酸(3-MH)ELISA試劑盒需要的準(zhǔn)備材料:
37°C培養(yǎng)箱
多通道和單通道移液管和無菌移液管尖丨端
噴射瓶或自動(dòng)微孔板清洗機(jī)
1.5毫升試管
蒸餾水
吸水濾紙
100毫升和1升刻度鋼瓶
微孔板閱讀器(波長(zhǎng):450 nm)
酶聯(lián)免疫吸附搖瓶
3-甲基組氨酸(3-MH)ELISA試劑盒樣本收集/制備:
1.血清:應(yīng)將樣本收集到血清分離管中。在4°C或室溫下使試管在垂直位置不受干擾過夜,使血清凝固達(dá)60分鐘。以約1000×g離心20分鐘。立即或等份分析血清,并在-20°C或-80°C下儲(chǔ)存。
2.血漿:使用肝素或EDTA作為抗凝劑收集血漿。在收集30分鐘內(nèi),以1000×g離心15分鐘。立即測(cè)定或等份測(cè)定并儲(chǔ)存在-20°C或-80°C下。避免溶血和高膽固醇樣品。
3.組織勻漿:組織勻漿的制備取決于組織類型——這只是一個(gè)例子。用冰冷的PBS沖洗組織,去除多余的血液。均化前稱重。精細(xì)切碎組織,用組織勻漿器在PBS冰上勻漿,并用超聲波處理細(xì)胞懸浮液。以5000×g離心勻漿5分鐘,收集上清液。立即測(cè)定或等份測(cè)定,并儲(chǔ)存在-20°C下。
試劑準(zhǔn)備:
1) 標(biāo)準(zhǔn)品:用推薦體積的標(biāo)準(zhǔn)稀釋液緩沖液配制標(biāo)準(zhǔn)品,制成標(biāo)準(zhǔn)溶液。然后使用標(biāo)準(zhǔn)稀釋液緩沖液對(duì)標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行連續(xù)稀釋,如方案中所述。
2) 洗滌緩沖液:按照方案中的說明,用蒸餾水稀釋濃縮洗滌緩沖液。
3) 檢測(cè)試劑制備:計(jì)算所需工作液的總體積。分別用稀釋劑A和稀釋劑B以1:100稀釋檢測(cè)試劑A和檢測(cè)試劑B。
化驗(yàn)程序:
1) 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)、測(cè)試樣品和控制井。
2) 將50µl稀釋標(biāo)準(zhǔn)溶液等分到標(biāo)準(zhǔn)孔中。
3) 將50µl標(biāo)準(zhǔn)稀釋液緩沖液等分放入對(duì)照(零)孔中。
4) 將50µl稀釋樣品等分到樣品孔中。
5) 立即向每個(gè)孔中等分50µl檢測(cè)試劑A。在37℃下培養(yǎng)45分鐘。
6) 洗3次。
7) 向每個(gè)孔中等分100µl檢測(cè)試劑B。在37℃下培養(yǎng)30分鐘。
8) 洗5次。
9) 將90µl TMB基質(zhì)等分到每個(gè)孔中。在37℃下培養(yǎng)10-20分鐘。
10) 等分50µl停止溶液。
11) 在450牛米處測(cè)量外徑。
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