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總黃酮含量測試試劑盒分光光度計法使用說明

時間:2020/5/19閱讀:630
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總黃酮含量測試試劑盒(C002-96T 分光光度計法)

 

一.測定原理

黃酮中處于相鄰位的羰基、羥基可以共同絡合金屬而顯色。在中性或弱堿性及亞硝酸鈉存在條件下,黃酮類化合物與鋁鹽生成螯和物,加入堿溶液后顯紅橙色,在510nm處有大吸收峰。蘆丁是*的黃酮類化合物,常被用作標準品。

二.試劑組成

試劑一:無色液體50mL ×1瓶

試劑二:無色液體50mL ×1瓶

試劑三:顯色液200mL ×1瓶

試劑四:1.0mg/mL蘆丁標準溶液5mL×1瓶

三.儲存條件及有效期

試劑一、試劑二4℃保存,試劑三-20℃保存,可保存3個月。

四.試劑的配制

試劑四應用液

取2mL試劑四,加入18mL雙蒸水,稀釋至20mL,得到100μg/mL的蘆丁標準液,分別采用移液管移取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL試劑四于空試管中,加入4.0,3.0,2.0,1.0,0mL雙蒸水,得到20,40,60,80,100 μg/mL蘆丁標準液。

五.操作步驟

 

標準管1

測定管

空白管2

試劑一應用液(mL)

0.5

0.5

0.5

樣品溶液(mL)

 

2

2

試劑四應用液(mL)

2

 

 

 

充分混勻,室溫靜置6min。

試劑二(mL)

0.5

0.5

 

雙蒸水(mL)

 

 

1

 

充分混勻,室溫靜置6min。

試劑三(mL)3

2

2

2

 

 充分混勻,室溫靜置15min,以試劑空白調(diào)零,分光光度計510nm處測吸光值。

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