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總黃酮含量測(cè)試試劑盒分光光度計(jì)法使用說(shuō)明

時(shí)間:2020/5/19閱讀:626
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總黃酮含量測(cè)試試劑盒(C002-96T 分光光度計(jì)法)

 

一.測(cè)定原理

黃酮中處于相鄰位的羰基、羥基可以共同絡(luò)合金屬而顯色。在中性或弱堿性及亞硝酸鈉存在條件下,黃酮類(lèi)化合物與鋁鹽生成螯和物,加入堿溶液后顯紅橙色,在510nm處有大吸收峰。蘆丁是*的黃酮類(lèi)化合物,常被用作標(biāo)準(zhǔn)品。

二.試劑組成

試劑一:無(wú)色液體50mL ×1瓶

試劑二:無(wú)色液體50mL ×1瓶

試劑三:顯色液200mL ×1瓶

試劑四:1.0mg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液5mL×1瓶

三.儲(chǔ)存條件及有效期

試劑一、試劑二4℃保存,試劑三-20℃保存,可保存3個(gè)月。

四.試劑的配制

試劑四應(yīng)用液

取2mL試劑四,加入18mL雙蒸水,稀釋至20mL,得到100μg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液,分別采用移液管移取1.0,2.0,3.0,4.0,5.0mL試劑四于空試管中,加入4.0,3.0,2.0,1.0,0mL雙蒸水,得到20,40,60,80,100 μg/mL蘆丁標(biāo)準(zhǔn)液。

五.操作步驟

 

標(biāo)準(zhǔn)管1

測(cè)定管

空白管2

試劑一應(yīng)用液(mL)

0.5

0.5

0.5

樣品溶液(mL)

 

2

2

試劑四應(yīng)用液(mL)

2

 

 

 

充分混勻,室溫靜置6min。

試劑二(mL)

0.5

0.5

 

雙蒸水(mL)

 

 

1

 

充分混勻,室溫靜置6min。

試劑三(mL)3

2

2

2

 

 充分混勻,室溫靜置15min,以試劑空白調(diào)零,分光光度計(jì)510nm處測(cè)吸光值。

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