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紫外可見分光光度法檢測維生素B2
閱讀：2783 發(fā)布時間：2016-6-12
紫外可見分光光度法測定維生素B2的方法步驟：
1、 待測液的配置：取待測片劑2片，精密稱定、研細(xì)，精密稱取適量（約相當(dāng)于維生素B210 mg），置于1000 mL容量瓶中，加冰醋酸5mL與水100mL，置水浴（100 ℃）加熱1小時，時時搖振，使維生素B2溶解，加水稀釋，冷卻后加氫氧化鈉液（1 mol/L）30 mL。用水稀釋至刻度，搖勻，過濾；棄去初濾液，取續(xù)濾液作為待測液。
2、 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置：準(zhǔn)確稱取75mg核黃素（維生素B2），置于1000 mL容量瓶中，加少量水使維生素B2溶解，zui后加水定容至刻度得到維生素B2標(biāo)準(zhǔn)試劑（0.075 mg/mL）。
3、 用移液管分別吸取2mL、4mL、5mL、6mL、8mL維生素B2標(biāo)準(zhǔn)試劑（0.075 mg/mL） 于5個25 mL容量瓶中，加水定容至刻度，搖勻。用紫外分光光度計分別測量5個容量瓶中的VB2稀釋液，得到5個吸收度數(shù)值A444nm。
4、以VB2稀釋液濃度為橫坐標(biāo)，A444nm數(shù)值為縱坐標(biāo)，建立VB2濃度與吸收度的標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后在444nm波長處測出待測液的吸收度數(shù)值，在標(biāo)準(zhǔn)曲線上找到相應(yīng)的濃度數(shù)值即可。