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上海語純生物科技有限公司
初級會(huì)員·1年CC96120Rosetta-gami 2 (DE3)pLacl 感受態(tài)
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- CC96120 產(chǎn)品型號
- 語純生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù)：35更新時(shí)間：2025-04-23 12:33:44
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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CC96120 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥 |
產(chǎn)品貨號：CC96120
產(chǎn)品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul
本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療。
產(chǎn)品介紹
Rosetta-gami 2 (DE3)pLacl 感受態(tài)
產(chǎn)品簡介
Rosetta-gami 2 系列菌株是集合了 Rosetta 2 系列菌株和 Origami 2 系列菌株的優(yōu)點(diǎn)；Rosetta-gami 2
(DE3)系列菌株是來源于 Origami 2 系列菌株，在其染色體上帶有溶源性的 λDE3，可表達(dá) T7 RNA
聚合酶。由于該菌株不含卡納抗性，適用于 pET 系列載體及其他 T7 啟動(dòng)子系列載體。該菌株攜帶
有 trxB 和 gor 基因突變，從而提高了含二硫鍵正確折疊蛋白的表達(dá)效率；同時(shí)帶有的 pLacIRARE2
質(zhì)粒（攜帶氯霉素抗性），除了能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的 AUA, AGG, AGA, CUA,
CCC, 和 GGA 六個(gè)稀有密碼子的 tRNA 外，還提供了第七個(gè)稀有密碼子 CGG 的 tRNA，因而能夠增
強(qiáng)真核細(xì)胞蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)水平。此外，LacI 蛋白也可以抑制 T7lac 啟動(dòng)子在無誘導(dǎo)劑時(shí)
的本底表達(dá)。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測，Rosetta-gami 2 (DE3) pLacI 感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 107
cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
Rosetta-gami 2 (DE3) pLacI
化學(xué)感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL (DE3) F′[lac+ lacIq pro] gor522::Tn10
trxB pLacIRARE2 (CamR, StrR, TetR)
存儲(chǔ)條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除 pLacIRARE2 外，無外源質(zhì)粒 DNA 殘留；
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動(dòng)，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預(yù)熱），后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min；
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項(xiàng)
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用；
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10；
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保高轉(zhuǎn)化效率，整個(gè)操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
Rosetta-gami 2 (DE3)pLacl 感受態(tài)
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