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上海語純生物科技有限公司
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產品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10 ×100ul/100×100ul |
|---|---|---|---|
| 貨號 | CC96178 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè),制藥/生物制藥 |
產品貨號：CC96178
產品規(guī)格：10 ×100ul/100×100ul
本產品僅供科學研究或進一步生產使用，不可用于臨床診斷或治療。
產品介紹
Origami（DE3）感受態(tài)
產品簡介
Origami 系列菌株是大腸桿菌 K12 的衍生菌，在 trxB 和 gor 基因上同時含有突變，這使得該菌株能
夠更加高效地在胞內生成二硫鍵，有助于表達含二硫鍵的活性蛋白。該菌株含有 λDE3 序列，由
lacUV5 啟動子驅動 T7 RNA 聚合酶的表達。Origami 系列菌株的感受態(tài)細胞具有卡那霉素和四環(huán)素
抗性，能夠用于氨芐抗性質粒的蛋白表達，尤其是和 pET32a 載體能夠一起搭配使用。pET32a 載體
含有 thioredoxin (TRX)融合標簽，能夠高效提升胞質內蛋白二硫鍵的形成。Origami 感受態(tài)細胞經
特殊工藝制作，經 pUC18 質粒檢測，其轉化效率>108 cfu/μg DNA。
產品組成
組分
Origami (DE3)
感受態(tài)細胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型：Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsLF [lac+ lacIq pro]
λ(DE3) gor522::Tn10 gorB (KanR, TetR)
存儲條件
-80 ℃保存；請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質量控制
無外源質粒 DNA 殘留；
化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細胞從-80 ℃中取出，置于冰水浴中融化；
2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育 30 min；
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中，不要晃動，熱激 90s 后，立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min；
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基（室溫或 37 ℃預熱），然后置于 37 ℃搖床復壯 45 min；
5. 取不同體積的轉化產物，用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上，于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細胞冰水浴中解凍后應立即使用；
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態(tài)細胞體積的 1/10；
3. 加入待轉化 DNA 后，不要用移液器吹吸感受態(tài)細胞，僅用手指輕彈即可；
4. 為確保高轉化效率，整個操作過程中除熱激外均要保持低溫，并且要盡量輕柔。
Origami（DE3）感受態(tài)
