試驗原理:將菌懸液直接滴于待檢織物上,覆蓋培養(yǎng)基,使細菌充分在織物上暴露,以顯示其抑菌作用,依據(jù)抑菌率判斷是否具有抗菌能力。本試驗多用于非溶出性與低溶出性抗菌產(chǎn)品鑒定。菌落形成單位的計數(shù)應(yīng)使用體式鏡完成,肉眼計數(shù)誤差是很大的。
試驗材料與菌株:無菌平皿、吸管(1O ml、1 ml)、三角燒瓶、試管、振蕩器、接種針(環(huán))、體式鏡等;培養(yǎng)基:營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基、半固體營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(含最終濃度1/10萬的TTC)、半固體沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基、磷酸鹽緩沖液(PBS 0.03 mol/L,pH 7.2—7.4);試驗菌株:金黃色葡萄球菌(ATCC6538)、大腸桿菌(8099)、白色念珠菌(ATCC 1o231)、紅毛癬菌(88o4)、肺炎克雷伯氏菌(AATCC 10031),以上菌株可依試驗要求有所增減。
操作步驟:待檢樣品剪成2.5 cm x 2.5 cm的樣片,逐片放于無菌平皿內(nèi),均勻滴加0.1 ml菌懸液(10s—lO6 cfu/m1),重復6塊,置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)干燥3O一60 min。將染菌樣片平貼于營養(yǎng)瓊脂平板表面(霉菌試驗染菌樣片平貼于沙堡弱瓊脂培養(yǎng)基表面)。用半固體營養(yǎng)瓊脂均勻覆蓋染菌樣片表面(霉菌試驗選用半固體沙堡弱瓊脂),厚度適中。37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)18—24 h(霉菌28±2~C,5—7 d),觀察結(jié)果。試驗同時,對試驗菌懸液做活菌計數(shù),以觀察對照樣片是否影響對受試菌的培養(yǎng)計數(shù)。試驗中應(yīng)設(shè)未抗菌處理空白布樣及標準本白布樣對照。重復上述試驗操作并計數(shù)試驗結(jié)果。
結(jié)果與報告:用低倍鏡或放大鏡計數(shù)每塊樣上的菌落數(shù)(也可用肉眼計數(shù)),計算6塊相同布樣上的菌落數(shù)平均值報告之。報告內(nèi)容:所用方法,簡單的說明材料來源,所用菌種,樣片處理等,抗菌性能以抑菌率表示。
未做抗菌處理對照布樣上菌落數(shù)與標準本白布樣對照上的菌落數(shù)對照,以判斷未做抗菌處理對照布樣是否存在抗菌性能(即織物在進行染整等過程是否有抑菌作用的染料殘存,如有可增加洗滌次數(shù),以便去除)。
標準洗滌:參照GB8629—1988執(zhí)行,4A、4B或10A即模擬手洗,任選其一,可不加熱,但試驗操作必須一致。洗衣粉需選用非離子洗滌劑,濃度0.2% ,浴比1:30。
注意事項:樣片染菌勿溢出(在織物周圍培養(yǎng)基上有較多的菌落形成的試驗操作是不成功的);半固體營養(yǎng)瓊脂覆蓋時的溫度45—50℃,不可過熱。
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