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ludger E-GL01說明書

來(lái)源:上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司   2021年11月23日 13:55  

ludger E-GL01說明書


β(1-2,3,4,6)-N-acetylglucosaminidase

E-GL01

N-乙酰氨基葡萄糖苷酶從復(fù)雜的碳水化合物和糖蛋白上切割所有非還原性末端 β-連接的 N-乙酰氨基葡萄糖殘基。


試劑盒包括酶加反應(yīng)緩沖液。
足以進(jìn)行多達(dá) 60 次反應(yīng)。


產(chǎn)品規(guī)格:

N-乙酰氨基葡萄糖苷酶從復(fù)雜的碳水化合物和糖蛋白上切割所有非還原性末端 β-連接的 N-乙酰氨基葡萄糖殘基。

GlcNAc 在雙、三和四觸角寡糖上的不同連接的切割率很大程度上取決于相鄰殘基的空間位阻。與 β(1-3) 連接的甘露糖連接的 β(1-2)GlcNAc 殘基以最高的速率被切割,而與 β(1-6) 連接的甘露糖連接的 β(1-2) GlcNAc 殘基在所有三種寡糖的低比率。β(1-6) GlcNAc 殘基,當(dāng)存在時(shí),以第二高的速率去除,而 β(1-4) GlcNAc,第三。在三天線結(jié)構(gòu)上,該殘留物以第二高的速率被去除。與 β 連接的甘露糖相連的一分為二的 β(1-4) GlcNAc 嚴(yán)重阻礙了其他 GlcNAc 殘基的裂解——裂解需要高濃度的酶和較長(zhǎng)的孵育時(shí)間。

來(lái)源:重組從肺炎鏈球菌大腸桿菌。

歐共體: 3.2.1.52

別名: β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶、N-乙?;?β-d-氨基葡萄糖苷、N-乙酰氨基葡萄糖苷水解酶、氨基葡萄糖苷酶、氨基己糖苷酶

內(nèi)容物:
Ludger beta-(1-2,3,4,6)-n-乙酰氨基葡萄糖苷酶 - 試劑盒內(nèi)容 
N-乙酰氨基葡萄糖苷酶,溶于 20 mM Tris-HCl、25 mM NaCl,pH 7.5 
5x 反應(yīng)緩沖液 250 mM 磷酸鈉,pH 5.0

比活度: >80 U/mg
活度: >50 U/mL

分子量: ~140,000 道爾頓

pH范圍: 5-7,最佳5.0

建議用法:
1. 在試管中加入最多 100 µg 的糖蛋白或 1 nmole 的寡糖。
2. 用去離子水將最終體積調(diào)整為 14 µL。
3. 加入 4 µL 5x 反應(yīng)緩沖液(pH 5.0)。
4. 加入 2 µL N-乙酰氨基葡萄糖苷酶。
5. 在 37°C 下孵育 3 小時(shí)。

注意:如果存在平分 GlcNAc 或 β(1-2)GlcNAc- α (1-6)Man,則將孵育國(guó)家時(shí)間增加到 18 小時(shí)。

特異性:切割所有非還原性末端 β-連接的 N-乙酰氨基葡糖。將 GlcNAc 一分為二會(huì)減慢反應(yīng)速度。

比活性測(cè)定:定義為在 37°C、pH 5.0 條件下,從對(duì)硝基苯基-β-DN-乙酰氨基葡糖胺在 1 分鐘內(nèi)產(chǎn)生 1 µmole對(duì)硝基苯酚 ( p NP)所需的酶量

儲(chǔ)存:將酶儲(chǔ)存在 4°C。

純度:每批N-乙酰氨基葡萄糖苷酶的污染蛋白酶測(cè)試如下;10 µg 變性 BSA 與 2 µL 酶一起孵育 24 小時(shí)。處理過的 BSA 的 SDS-PAGE 分析顯示沒有降解的跡象。

生產(chǎn)宿主菌株已經(jīng)過廣泛測(cè)試,不產(chǎn)生任何可檢測(cè)的糖苷酶。

穩(wěn)定性:如果儲(chǔ)存得當(dāng),至少可以穩(wěn)定 12 個(gè)月。暴露于環(huán)境溫度數(shù)天不會(huì)減少活動(dòng)。


配套產(chǎn)品:

過程控制-查看我們的 N-聚糖命名表

  • CN-NGA2-20U

  • NGA2 聚糖 (A2, G0),未標(biāo)記

  • 駕駛室-NGA2-01

  • NGA2 聚糖(A2,G0),2-AB 標(biāo)記

  • CPROC-NGA2-01

  • NGA2聚糖(A2,G0),普魯卡因酰胺標(biāo)記

聚糖清理 - 在外切糖苷酶處理后從聚糖混合物中去除酶

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  • LudgerTag 2-AA 聚糖標(biāo)記試劑盒,甲基吡啶硼完(24 個(gè)樣品)

  • LT-PERMET-96

  • LudgerTag 全甲基化試劑盒(96 個(gè)樣品)

  • LT-PERMET-VP96

  • LudgerTag 全甲基化試劑盒,不含碘甲完(96 個(gè)樣品)

 

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