轉(zhuǎn)染J774.1(小鼠單核巨噬細(xì)胞)結(jié)果

siRNA轉(zhuǎn)染步驟：

1、合成siRNA時(shí)請(qǐng)帶熒光，若siRNA不帶熒光、請(qǐng)使用熒光對(duì)照，方便查看轉(zhuǎn)染效率

2、siRNA濃度：20uM/L

3、siRNA和轉(zhuǎn)染試劑復(fù)合物制備：siRNA  8ul和轉(zhuǎn)染試劑8ul，吹打混勻室溫靜置15分鐘，無(wú)需另外加入任何試劑稀釋

4、細(xì)胞轉(zhuǎn)染前狀態(tài)：拍明場(chǎng)細(xì)胞照片留存

5、貼壁細(xì)胞鋪板：6孔板*培養(yǎng)基2ml、培養(yǎng)基中不加雙抗，細(xì)胞密度：60%左右（不同細(xì)胞，按48小時(shí)生長(zhǎng)到90%，往前推算細(xì)胞鋪板密度）

6、轉(zhuǎn)染：將復(fù)合物加入輕搖混勻、培養(yǎng)箱培養(yǎng)

7、換液：轉(zhuǎn)染24小時(shí)后培養(yǎng)基換液

8、轉(zhuǎn)染效率：轉(zhuǎn)染48小時(shí)后拍熒光照片，查看轉(zhuǎn)染效率

9、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞狀態(tài)：拍明場(chǎng)細(xì)胞狀態(tài)照片

10、檢測(cè)：總計(jì)轉(zhuǎn)染48小時(shí)后提取RNA或蛋白檢測(cè)

上海轉(zhuǎn)染生物科技有限公司是服務(wù)于高校和科研院所生命科學(xué)研究、生物醫(yī)藥研發(fā)、生物制品生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療等領(lǐng)域高科技生物技術(shù)企業(yè)。提供的第三代高分子、細(xì)胞內(nèi)可代謝的轉(zhuǎn)染試劑，解決了難轉(zhuǎn)染細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率低、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染毒性大致細(xì)胞死亡多、需要無(wú)血清環(huán)境的這些問(wèn)題，比如：RAW264.7、THP-1、精原干細(xì)胞、IPS細(xì)胞、BMDM、MT-4人淋巴T細(xì)胞、SW480、A549、U87細(xì)胞等；提供的活體動(dòng)物可代謝體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑，可轉(zhuǎn)染長(zhǎng)片段質(zhì)粒DNA至體內(nèi)   可通過(guò)靜脈注射或體內(nèi)局部組織注射的簡(jiǎn)單方式完成轉(zhuǎn)染過(guò)程; 提供的無(wú)動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物制品生產(chǎn)公司提供無(wú)血清的細(xì)胞規(guī)模生產(chǎn)支持；

美國(guó)Zeta Life 公司與美國(guó)加利福尼亞大學(xué)舊金山校區(qū)聯(lián)合開(kāi)發(fā)用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染的第三代高分子轉(zhuǎn)染試劑，此技術(shù)成為新的蛋白功能、免疫細(xì)胞及干細(xì)胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。