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biosearchtech RP8092H說明書

來源:上海起發(fā)實驗試劑有限公司   2022年10月31日 16:37  

RNA 5' Polyphosphatase

產(chǎn)品概述

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去磷酸化三磷酸化和二磷酸化的RNA分子,同時避免5'封端和單磷酸化的RNA。

產(chǎn)品特點

去磷酸化 5'-三磷酸化 RNA,例如原代 RNA 轉(zhuǎn)錄本,但不能去磷酸化 5'-帽的 mRNA

特異性:從 5'-三磷酸化 RNA 中去除γ和β磷酸鹽,從二磷酸化 RNA 中去除β磷酸鹽,但不會去磷酸化單磷酸化或 5'-封端的 RNA

熱滅活:在65°C下加熱20分鐘以殺死酶活性

靈活:適用于各種應(yīng)用,例如使用 T4 RNA 連接酶進行 5'-RNA 連接標(biāo)記、分析 RNA 的 5'-末端結(jié)構(gòu)以及制備底物 RNA 以便隨后使用終止子 5'-磷酸依賴性核酸外切酶降解

產(chǎn)品信息

RNA 5' 多磷酸酶* 是一種鎂2+-由震中科學(xué)家發(fā)現(xiàn)和表征的獨立磷酸水解酶。該酶依次去除 5'-三磷酸化 RNA 中的γ和β磷酸鹽(例如初級 RNA 轉(zhuǎn)錄本):

5' pppN—OH 3' 至 ;5' pN—OH 3' + 2 P我

具有5'-二磷酸化末端的RNA也通過RNA 5'多磷酸酶:5'ppN—OH 3'轉(zhuǎn)化為5'-單磷酸化RNA;

5' pN—OH 3' + P我

RNA 多磷酸酶對 5' 帽(例如 5' m 的 RNA 沒有活性7GpppN—OH 3'),或5'-單磷酸化末端(5' pN—OH 3')。然而,NTP和dNTPs都是酶的底物,產(chǎn)生相應(yīng)的NMP和dNMPs+無機磷酸鹽:(d)NTP至;(四)NMP + 2P我

應(yīng)用

將 5'-三磷酸化 RNA 轉(zhuǎn)化為 5'-單磷酸化 RNA,用于使用 T4 RNA 連接酶的 5'-RNA 連接標(biāo)記方法。

RNA的5'端結(jié)構(gòu)分析。

使用震中終止子™ 5'-磷酸依賴性核酸外切酶制備底物RNA分子以進行后續(xù)降解。

*涵蓋已頒發(fā)和/或正在申請的專li。

產(chǎn)品規(guī)格及用途

單位定義:在標(biāo)準測定條件下,一個單位的RNA 5'多磷酸酶在37°C下1小時內(nèi)從ATP釋放1nmol的無機磷酸鹽。

儲存緩沖液:50% 甘油,含有 0.05 M Tris-HCl (pH 7.5)、0.1 mM EDTA、1 mM DTT、0.1 M NaCl 和 0.1% Triton X-100。®

10X 反應(yīng)緩沖液:0.5 M HEPES-KOH (PH 7.5)、1 M 氯化鈉、10 mM EDTA、1% β-巰基乙醇和 0.1% Triton X-100。®

滅活/抑制劑:RNA 5' 多磷酸酶被 100 mM 無機磷酸鹽抑制 ~50% (P我),使用ATP作為底物。

質(zhì)量管理:RNA 5' 多磷酸酶不含可檢測的 DNA 外切酶和核酸內(nèi)切酶以及 RNase 活性。

產(chǎn)品詳情

名稱     RNA 5' Polyphosphatase

編號     RP8092H

品牌     biosearchtech


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