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毛細(xì)管電泳的分類及特點介紹

來源:上海研生實業(yè)有限公司   2011年09月07日 10:49  

毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis,CE)又稱毛細(xì)管電泳(high performance capillary electrophoresis,HPCE),是一類以毛細(xì)管為分離通道、以高壓直流電場為驅(qū)動力的新型液相分離技術(shù)。毛細(xì)管電泳實際上包含電泳、色譜及其交叉內(nèi)容,它使分析化學(xué)得以從微升水平進(jìn)入納升水平,并使單細(xì)胞分析,乃至單分子分析成為可能。長期困擾我們的生物大分子如蛋白質(zhì)的分離分析也因此有了新的轉(zhuǎn)機。

毛細(xì)管電泳根據(jù)分離模式不同可以歸結(jié)出多種不同類型的毛細(xì)管電泳,毛細(xì)管電泳的多種分離模式,給樣品分離提供了不同的選擇機會,這對復(fù)雜樣品的分離分析是非常重要的。


類型 縮寫 說明
1 單根毛細(xì)管 毛細(xì)管區(qū)帶電泳 CZE 毛細(xì)管和電極槽灌有相同的緩沖液

毛細(xì)管等速電泳 CITP 使用兩種不同的CZE 緩沖液

毛細(xì)管等電聚焦 CIEF 管內(nèi)裝pH 梯度介質(zhì),相當(dāng)于pH 梯度CZE

膠束電動毛細(xì)管色譜 MECC 在CZE 緩沖液中加入一種或多種膠束

微乳液毛細(xì)管電動色譜 MEEKC 在CZE 緩沖液加入水包油乳液高分子離子交換

毛細(xì)管電動色譜 PICEC 在CZE 緩沖液中加入可微觀分相的高分子離子

開管毛細(xì)管電色譜 OTCEC 使用固定相涂層毛細(xì)管,分正、反相于離子交換

親和毛細(xì)管電泳 ACE 在CZE 緩沖液或管內(nèi)加入親和作用試劑

非膠毛細(xì)管電泳 NGCE 在CZE 緩沖液中加入高分子構(gòu)成篩分網(wǎng)絡(luò)


 

2 單根填充管 毛細(xì)管凝膠電泳 CGE 管內(nèi)填充凝膠介質(zhì),用CZE 緩沖液

聚丙烯酰胺   毛細(xì)管凝膠電泳 PA-   CGE 管內(nèi)填充聚丙烯酰胺凝膠

瓊脂糖毛細(xì)管凝膠電泳 Agar-   CGE 管內(nèi)填充瓊脂糖凝膠

填充毛細(xì)管電色譜 PCCEC 毛細(xì)管內(nèi)填充色譜填料,   分正、反相于離子交換等


 

3 陣列毛細(xì)管電泳 CAE 利用一根以上的毛細(xì)管進(jìn)行CE 操作


 

4 芯片式毛細(xì)管電泳 CCE 利用刻制在載玻片上的毛細(xì)通道進(jìn)行電泳


 

5 聯(lián)用 毛細(xì)管電泳/質(zhì)譜 CE/MS 常用電噴霧接口,需揮發(fā)性緩沖液

毛細(xì)管電泳/核磁共振 CE/NMR 需采用停頓式掃描樣品峰的測定方法

毛細(xì)管電泳/激光誘導(dǎo)熒光 CE/LIF 具單細(xì)胞、單分子分析潛力


 

毛細(xì)管電泳通常使用內(nèi)徑為25-100 μm 的彈性(聚酰亞胺)涂層熔融石英管。標(biāo)準(zhǔn)毛細(xì)管的外徑為375 μm,有些管的外徑為160 μm。毛細(xì)管的特點是:容積?。ㄒ桓?00 cm×75 μm 管子的容積僅4.4 μL);側(cè)面/截面積比大,因而散熱快、可承受高電場(100-1000 V/cm);可使用自由溶液、凝膠等為支持介質(zhì);在溶液介質(zhì)下能產(chǎn)生平面形狀的電滲流。有以下特點:

(1) 塔板數(shù)目在105-106 片/m 間,當(dāng)采用CGE 時 ,塔板數(shù)目可達(dá)107 片/m 以上;

(2) 快速 一般在十幾分鐘內(nèi)完成分離;

(3) 微量 進(jìn)樣所需的樣品體積為nL 級;

(4) 多模式 可根據(jù)需要選用不同的分離模式且僅需一臺儀器;

(5) 經(jīng)濟 實驗消耗不過幾毫升緩沖溶液,維持費用很低;

(6) 自動 CE 是目前自動化程度較高的分離方法。

 

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