通過(guò)卵巢遞送CRISPR-Cas9核糖核蛋白的Nasonia vitripennis的種系誘變
CRISPR/Cas9基因編輯是研究新興模式生物遺傳學(xué)的強(qiáng)大技術(shù),如寶石黃蜂 納索尼亞維特里彭尼斯.然而,目前涉及胚胎顯微注射CRISPR試劑的方法具有挑戰(zhàn)性。將Cas9核糖核蛋白遞送到雌性卵巢是一種替代方案,僅在少數(shù)昆蟲(chóng)(如蚊子和粉虱)中進(jìn)行了探索。在這里,我們開(kāi)發(fā)了一種通過(guò)在成人中注射Cas9核糖核蛋白來(lái)進(jìn)行種系基因編輯的簡(jiǎn)單方案 維特里彭尼斯豬籠草 使用ReMOT對(duì)照(受體介導(dǎo)的貨物卵巢轉(zhuǎn)導(dǎo))或BAPC(支鏈兩親肽膠囊)作為卵巢遞送方法的女性。我們證明了通過(guò)P2C肽和BAPC將EGFP和Cas9等蛋白質(zhì)貨物有效地遞送到發(fā)育中的卵母細(xì)胞中。此外,體細(xì)胞和種系基因編輯已被證明。這種方法將極大地促進(jìn)CRISPR應(yīng)用的基因操作在這個(gè)和其他正在崛起的模式生物中。
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