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ozbiosciences TEE技術(shù)概述

來(lái)源:上海牧榮生物科技有限公司   2024年01月08日 14:18  

陽(yáng)離子脂質(zhì)(lipoplexes)和聚合物(polyplexes)是常用的非病毒基因遞送系統(tǒng)。 Tee 技術(shù)(觸發(fā)內(nèi)體逃逸)結(jié)合并利用了兩個(gè)實(shí)體的特性,以實(shí)現(xiàn)極其有效的核酸遞送到細(xì)胞中。事實(shí)上,新一代脂多胺含有親脂部分(例如脂質(zhì))和帶電多胺部分(例如陽(yáng)離子聚合物)。這些部分協(xié)同作用,確保緊密的核酸壓縮和保護(hù)以及內(nèi)體膜非常有效的去穩(wěn)定,從而允許在胞質(zhì)溶膠中釋放大量核酸并攝取DNA核。特別關(guān)注可生物降解實(shí)體的合成。這樣,轉(zhuǎn)染試劑不會(huì)干擾細(xì)胞機(jī)制,每次實(shí)驗(yàn)都能保持高細(xì)胞活力,并避免任何潛在的副作用。

應(yīng)用

轉(zhuǎn)染效率與高轉(zhuǎn)基因表達(dá)水平或高基因沉默以及最小化細(xì)胞毒性相結(jié)合取決于多個(gè)關(guān)鍵參數(shù)。這些因素包括細(xì)胞類型、質(zhì)粒 DNA 特征(大小、啟動(dòng)子、報(bào)告基因)和純度、siRNA 序列和純度、細(xì)胞培養(yǎng)條件(含或不含血清的培養(yǎng)基、細(xì)胞數(shù)量、無(wú)污染……)、核酸和試劑的量、轉(zhuǎn)基因測(cè)定僅舉幾例。因此,需要根據(jù)待遞送的核酸(DNA、siRNA、mRNA、ODN、shRNA 等)和所使用的細(xì)胞類型專門設(shè)計(jì)轉(zhuǎn)染試劑,以達(dá)到最佳效率。


脂轉(zhuǎn)染法特別適用于永生化細(xì)胞。

Tee 技術(shù)的主要優(yōu)勢(shì)是:

  • 納米顆粒中 DNA 的壓縮被細(xì)胞有效內(nèi)化

  • 保護(hù)核酸免遭核酸酶降解

  • 高效的膜去穩(wěn)定和 DNA 遞送

  • 即使核酸含量低也能高效

  • 生物降解性


如何使用脂轉(zhuǎn)染試劑?


該協(xié)議是一個(gè)非常簡(jiǎn)單的過(guò)程:

1. 準(zhǔn)備 DNA 和試劑溶液。

2. 將它們混合在一起并孵育 20 分鐘。

3. 添加到您的單元格中。




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