手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)手機(jī)版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號(hào)：chem17
掃碼關(guān)注視頻號(hào)
免疫細(xì)胞化學(xué)是一個(gè)漫長的多步驟過程，需要考慮許多不同的因素。在某些時(shí)候，不可避免地會(huì)出現(xiàn)問題或不是最佳狀態(tài)。以下匯總了一些可能導(dǎo)致免疫細(xì)胞化學(xué)不起作用的最常見陷阱。
| 問題 | 潛在原因 | 建議的解決方案 |
| 染色弱或缺失 | 細(xì)胞已從蓋玻片上脫落 | - 洗滌時(shí)更加輕柔或減少洗滌次數(shù) |
| 細(xì)胞通透性較差 | - 嘗試增加 Triton X-100 的濃度 | |
| 細(xì)胞干涸 | - 確保在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中細(xì)胞始終被過量的液體覆蓋 | |
| 細(xì)胞過度固定 | - 減少細(xì)胞與固定劑一起孵育的時(shí)間 | |
| 一抗太少 | - 增加一抗?jié)舛?/span> | |
| 光照 | - 確保應(yīng)用二抗后樣品永遠(yuǎn)不會(huì)暴露在光線下 | |
| 二抗錯(cuò)誤 | - 確保二抗對(duì)一抗的培養(yǎng)物種具有特異性 | |
靶細(xì)胞中不存在蛋白質(zhì) | - 檢查文獻(xiàn)以了解細(xì)胞群中是否預(yù)期存在蛋白質(zhì) | |
| 表位因固定而被遮蓋 | - 嘗試不同的固定劑 | |
| 曝光時(shí)間太短 | - 增加成像時(shí)的曝光時(shí)間和/或增益 | |
| 高背景 | 非特異性結(jié)合 | 嘗試在沒有一抗的情況下測試二抗，以確保二抗不會(huì)與細(xì)胞內(nèi)的靶標(biāo)結(jié)合 |
| 阻擋不良 | - 嘗試更換封閉液 | |
| 抗體濃度過高 | - 嘗試降低一抗?jié)舛?/span> | |
| 反應(yīng)性醛基 | - 考慮在 PBS 孵育步驟中引入 1% NaBH4 | |
| 光譜重疊 | - 確保二抗的吸收/發(fā)射光譜不重疊 | |
| 洗滌不足 | - 增加二次孵育后的洗滌步驟 | |
| 非特異性染色 | 抗體與其他蛋白質(zhì)中存在的表位結(jié)合 | - 嘗試不同的抗體，看看染色模式是否相關(guān)。 |
| 抗體濃度過高 | - 嘗試降低一抗和二抗?jié)舛?/span> | |
| 與內(nèi)源性 IgG 的反應(yīng)性 | - 嘗試使用在細(xì)胞來源以外的物種中產(chǎn)生的抗體（尤其是在原代細(xì)胞培養(yǎng)物中） |
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé)，不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí)，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心