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免疫印跡(western blot)技術(shù)服務(wù)

來(lái)源:上海西唐生物科技有限公司   2012年02月03日 16:22  

 

免疫印跡(western blot)技術(shù)服務(wù)
◇樣本制備
1. 懸浮細(xì)胞:取大約 1×107個(gè)細(xì)胞,低速離心收集,棄去培養(yǎng)液,加入1ml PBS懸浮細(xì)胞,轉(zhuǎn)入小離心管中,低速離心沉淀細(xì)胞,棄去PBS,放入-70冰箱保存。
2. 貼壁細(xì)胞:取大約1×107個(gè)貼壁細(xì)胞,胰酶消化后加入PBS懸浮細(xì)胞,轉(zhuǎn)入小離心管中,低速離心沉淀細(xì)胞,棄去PBS,放入-70冰箱保存。
3. 組織:采集新鮮組織(注意:生物體死亡后10分鐘內(nèi)取材料并保存好),組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈,切為小塊,放入-70冰箱中保存。
樣本量:組織樣本,質(zhì)量大于100mg;細(xì)胞樣本,細(xì)胞數(shù)大于1×106
◇蛋白質(zhì)抽提:
實(shí)驗(yàn)對(duì)象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑(或核蛋白抽提試劑),勻漿后抽提總蛋白(或核蛋白)。實(shí)驗(yàn)對(duì)象為細(xì)胞樣品(細(xì)胞培養(yǎng)),每份樣品取1×1061×107細(xì)胞,PBS清洗細(xì)胞,去PBS0.1ml~1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑(或核蛋白抽提試劑)抽提總蛋白(或核蛋白)。標(biāo)本也可交給我們處理,組織標(biāo)本每個(gè)10元,核蛋白或膜蛋白每個(gè)30元。
◇收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn):
每張膜上做一種目的蛋白和相應(yīng)的內(nèi)參蛋白。每張膜上可以做8個(gè)樣品。每張膜的費(fèi)用是:1000元。一抗另計(jì),抗體為進(jìn)口單克隆抗體,我公司可代購(gòu),其它試劑免費(fèi)。
◇服務(wù)時(shí)限:
收到樣本和一抗之日起15-25個(gè)工作日提交實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
實(shí)時(shí)熒光定量Real Time PCR技術(shù)服務(wù)
◇服務(wù)要求:
1. 客戶(hù)只需提供新鮮的標(biāo)本。樣本量:組織樣本,質(zhì)量≥100mg;細(xì)胞樣本,細(xì)胞數(shù)≥1×107或直接提供純化好的DNA(大于5ug/樣品)。
2. 請(qǐng)通過(guò) 提供已知的全長(zhǎng)基因序列。
3. 請(qǐng)?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料: DNA/ RNA 來(lái)源、豐度等。
◇樣本制備及注意事項(xiàng):
1. 組織培養(yǎng)細(xì)胞:沉淀細(xì)胞,用PBS 洗一次,再用少量的PBS 懸浮細(xì)胞,然后加5~10 倍體積的RNAlater 。4過(guò)夜后,-20長(zhǎng)期保存。
2. 組織:采集新鮮組織(注意:生物體死亡后1分鐘內(nèi)取材料并保存好),快速簡(jiǎn)單切碎組織樣品,任何一邊的zui大厚度不能大于0.5cm,然后將組織碎塊放入到倍體積的RNAlater 中。4過(guò)夜后,-20長(zhǎng)期保存。
RNAlater保存的樣品非常穩(wěn)定,建議4℃運(yùn)輸,也可常溫運(yùn)輸。
◇收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)
1. RNA提取+反轉(zhuǎn)錄,每個(gè)樣品80
2. PCR反應(yīng):每個(gè)反應(yīng)40
3. 引物合成每條100
◇服務(wù)時(shí)限
收到樣本之日起15-25個(gè)工作日提交實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
 
樣本或者指標(biāo)數(shù)多,*!westang
 65333639 55229873  

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