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免疫印跡(western blot)技術(shù)服務

來源:上海西唐生物科技有限公司   2012年02月03日 16:22  

 

免疫印跡(western blot)技術(shù)服務
◇樣本制備
1. 懸浮細胞:取大約 1×107個細胞,低速離心收集,棄去培養(yǎng)液,加入1ml PBS懸浮細胞,轉(zhuǎn)入小離心管中,低速離心沉淀細胞,棄去PBS,放入-70冰箱保存。
2. 貼壁細胞:取大約1×107個貼壁細胞,胰酶消化后加入PBS懸浮細胞,轉(zhuǎn)入小離心管中,低速離心沉淀細胞,棄去PBS,放入-70冰箱保存。
3. 組織:采集新鮮組織(注意:生物體死亡后10分鐘內(nèi)取材料并保存好),組織塊以PBS或生理鹽水清洗干凈,切為小塊,放入-70冰箱中保存。
樣本量:組織樣本,質(zhì)量大于100mg;細胞樣本,細胞數(shù)大于1×106;
◇蛋白質(zhì)抽提:
實驗對象為組織樣品,取適量(250~500mg)新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品,加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑(或核蛋白抽提試劑),勻漿后抽提總蛋白(或核蛋白)。實驗對象為細胞樣品(細胞培養(yǎng)),每份樣品取1×1061×107細胞,PBS清洗細胞,去PBS0.1ml~1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑(或核蛋白抽提試劑)抽提總蛋白(或核蛋白)。標本也可交給我們處理,組織標本每個10元,核蛋白或膜蛋白每個30元。
◇收費標準:
每張膜上做一種目的蛋白和相應的內(nèi)參蛋白。每張膜上可以做8個樣品。每張膜的費用是:1000元。一抗另計,抗體為進口單克隆抗體,我公司可代購,其它試劑免費。
◇服務時限:
收到樣本和一抗之日起15-25個工作日提交實驗結(jié)果。
實時熒光定量Real Time PCR技術(shù)服務
◇服務要求:
1. 客戶只需提供新鮮的標本。樣本量:組織樣本,質(zhì)量≥100mg;細胞樣本,細胞數(shù)≥1×107。或直接提供純化好的DNA(大于5ug/樣品)。
2. 請通過 提供已知的全長基因序列。
3. 請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料: DNA/ RNA 來源、豐度等。
◇樣本制備及注意事項:
1. 組織培養(yǎng)細胞:沉淀細胞,用PBS 洗一次,再用少量的PBS 懸浮細胞,然后加5~10 倍體積的RNAlater 4過夜后,-20長期保存。
2. 組織:采集新鮮組織(注意:生物體死亡后1分鐘內(nèi)取材料并保存好),快速簡單切碎組織樣品,任何一邊的zui大厚度不能大于0.5cm,然后將組織碎塊放入到倍體積的RNAlater 中。4過夜后,-20長期保存。
RNAlater保存的樣品非常穩(wěn)定,建議4℃運輸,也可常溫運輸。
◇收費標準
1. RNA提取+反轉(zhuǎn)錄,每個樣品80
2. PCR反應:每個反應40
3. 引物合成每條100
◇服務時限
收到樣本之日起15-25個工作日提交實驗結(jié)果。
 
樣本或者指標數(shù)多,*!westang
 65333639 55229873  

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