玫瑰花環(huán)試驗,又稱為花結試驗。是測定淋巴細胞數(shù)量和功能的一種方法。
人類T和B淋巴細胞表面具有不同的受體。由于人類T淋巴細胞表面具有與綿羊紅細胞結合的受體,能與綿羊紅細胞非特異性結合,形成E花環(huán),因此,T細胞也成為紅細胞花瓣形成細胞。根據(jù)E—玫瑰花環(huán)形成率,可以間接判斷機體細胞免疫力。目前,已廣泛應用于臨床,作為測定人群免疫狀態(tài)的一個指標。
材料:
1.肝素(100單位/毫升)
2.0.5%兔紅細胞懸液(用Hanks液配制)
3.吸收過的胎牛血清:
取經(jīng)56℃30分鐘加熱滅活后的胎牛血清加半量壓積兔紅細胞混合后,37℃水浴20分鐘,2000轉/分離心10分鐘,取上清液即成。
4.Hanks液
5.豚鼠抗凝血
6.淋巴細胞分層液
7.滅菌注射器,針頭,試管,吸管等。
方法:
1.淋巴細胞提取
(1)取豚鼠抗凝血2毫升,加3毫升Hanks液使之稀釋。加于3毫升淋巴細胞分層液液面之上。
(2)2000轉/分離心30分鐘,吸淋巴細胞層到另一試管中加5倍體積的Hanks液洗1—2次,(1500轉/分離心10分鐘)棄上清即成。
1. 加吸收過的胎牛血清0.1毫升,0.5%兔紅細胞懸液0.2毫升,于淋巴細胞中?;旌虾?,37℃水浴5分鐘。
2. 500轉/分離心5分鐘,放4℃冰箱中2小時后,棄大部分上清。
3. 染色及觀察輕輕懸浮沉積的細胞。向懸液中滴一滴美蘭液,混合,10分鐘后取一滴放載玻片上,加蓋玻片鏡檢。高倍鏡或油鏡下計數(shù)200個淋巴細胞,凡結合3個或3個以上的兔紅細胞者為陽性,計算花環(huán)形成細胞的百分率。
相關產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,應在授權范圍內使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
- 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
- 如涉及作品內容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。