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HL-SAN 25k非特異性核酸內(nèi)切酶:耐高鹽,助力蛋白純化研究

來(lái)源:上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司   2025年01月21日 16:52  

HL-SAN 25k非特異性核酸內(nèi)切酶:耐高鹽,助力蛋白純化研究

在蛋白質(zhì)純化、病毒載體制備等生物醫(yī)藥研究生產(chǎn)過(guò)程中,核酸污染,尤其是宿主基因組DNA污染是一個(gè)非常關(guān)鍵的問(wèn)題。宿主DNA的殘留不僅會(huì)影響目標(biāo)產(chǎn)物的純化效果,還可能引發(fā)機(jī)體的免疫反應(yīng),因此受到嚴(yán)格監(jiān)管。傳統(tǒng)核酸酶在高鹽條件下活性較弱,而 HL-SAN 25k 作為一種耐高鹽的非特異性核酸內(nèi)切酶,在高鹽濃度(如 0.5 M NaCl)下表現(xiàn)出優(yōu)異的活性,能夠高效去除宿主DNA。

作為arcticzymes公司中國(guó)經(jīng)銷(xiāo)商,上海起發(fā)強(qiáng)烈推薦arcticzymes熱銷(xiāo)產(chǎn)品HL-SAN 25k非特異性核酸內(nèi)切酶。產(chǎn)品僅用于科研,不可用于臨床診斷。

HL-SAN是一種非特異性?xún)?nèi)切核酸酶,適用于高鹽濃度下的核酸去除。該酶能夠在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中去除污染的核酸,同時(shí)保護(hù)蛋白質(zhì)的完整性。它能夠以大約10:1的比例消化DNA和RNA。

酶學(xué)特性

   來(lái)源:重組表達(dá)于畢赤酵母細(xì)胞。

   酶比活:≥1.75×105 Units/mg。

   酶活定義:在37℃,25 mM Tris-HCl(pH 8.5),5mM MgCl2,500 mM NaCl的反應(yīng)體系中,1個(gè)單位的HL-SAN在30分鐘內(nèi)消化50 µg/ml的小牛胸腺DNA,可以在OD260nm處產(chǎn)生1A的吸光值變化。

   特異性:非特異性?xún)?nèi)切核酸酶,能夠?qū)捂満碗p鏈DNA及RNA消化成5-13個(gè)堿基的寡核苷酸。

最佳活性條

   溫度:7-38℃和4°C過(guò)夜,最佳溫度為30-38℃。

   鹽濃度:0-1000 mM(NaCl/KCl),最佳濃度為400-700 mM。

   pH范圍:6.8-9.5,最佳pH為8.0-8.9。

  Mg2+濃度:>1 mM,最佳濃度為5-50 mM。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)

   非特異性?xún)?nèi)切核酸酶,適用于高鹽濃度(0.5 M NaCl)下的核酸去除。

   在低溫(6℃)下仍保持20%的活性。

   寬pH范圍和溫度穩(wěn)定性。

   適用于高鹽緩沖液中的核酸去除。

應(yīng)用領(lǐng)域

   蛋白純化:高效去除與蛋白質(zhì)結(jié)合的核酸,尤其適用于DNA結(jié)合蛋白。

   病毒載體制備:如腺相關(guān)病毒(AAV)和腺病毒(AdV)。

   宏基因組測(cè)序(mNGS):去除宿主DNA,提高病原體檢測(cè)效率。

   其他應(yīng)用:降低樣品粘度,去除核酸污染。

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貨號(hào)

品名

規(guī)格

濃度

品牌

70910-202

HL-SAN 25k

25000 U

25 U/uL

arcticzymes



實(shí)驗(yàn)展示

HL-SAN 25k非特異性核酸內(nèi)切酶:耐高鹽,助力蛋白純化研究


       圖左:通過(guò)未釋裂解液和His-trap洗脫液的瓊脂糖凝膠電泳顯示,在這兩種情況下,大部分DNA仍保留在其中,添加了HL-SAN極大地減少了粗裂解液中的DNA含量

       圖右:通過(guò)qPCR檢測(cè)His-trap洗脫液中的大腸桿菌23S DNA,結(jié)果顯示添加了HL-SAN將DNA含量減少了約10,000倍。


HL-SAN 25k非特異性核酸內(nèi)切酶:耐高鹽,助力蛋白純化研究

   圖2:與未處理的樣品相比,在裂解液中添加了HL-SAN處理的DNA將10,000倍流速減少;洗脫液中減少約為200倍。而同時(shí)處理裂解液和洗脫液,添加了HL-SAN可將DNA減少約4,000倍。


ArcticZymes 是一家專(zhuān)注于開(kāi)發(fā)和商業(yè)化新型冷適應(yīng)酶的高科技生物公司。公司成立于20世紀(jì)80年代后期,總部位于挪威北部的特羅姆瑟(Troms?)。ArcticZymes 利用北極海洋d特的環(huán)境,從極地微生物中發(fā)現(xiàn)和開(kāi)發(fā)冷適應(yīng)酶,廣泛應(yīng)用于分子研究、體外診斷和治療領(lǐng)域。


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