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如何選擇適合實驗需求的正常小鼠血清?

來源：亞科因（武漢）生物技術(shù)有限公司 2025年06月26日 15:47

選擇適合實驗需求的正常小鼠血清需從多個維度綜合考量，包括實驗類型、動物背景、血清質(zhì)量及合規(guī)性等。以下是系統(tǒng)化的選擇指南：

一、明確實驗?zāi)康呐c需求

1.實驗類型與應(yīng)用場景

細胞培養(yǎng)：需選擇熱滅活（56℃，30分鐘）或未滅活血清，需關(guān)注促細胞增殖效果（如小鼠胚胎干細胞培養(yǎng)需高純度血清）。

免疫實驗：若用于抗體封閉或阻斷，需確認(rèn)血清中無目標(biāo)抗原抗體（如檢測小鼠源性蛋白時，避免使用同源血清導(dǎo)致交叉反應(yīng)）。

體內(nèi)實驗：如腹腔注射、造模輔助，需選擇無內(nèi)毒素、無外源因子的血清，避免引發(fā)動物炎癥反應(yīng)。

分子生物學(xué)：用于蛋白沉淀、核酸保護等，需關(guān)注血清中的蛋白酶、核酸酶活性（選擇低活性或滅活處理的血清）。

2.物種與品系匹配

同源性優(yōu)先：小鼠實驗原則上使用小鼠血清，避免異源血清（如牛血清）引發(fā)免疫反應(yīng)。

品系特異性：根據(jù)實驗動物品系選擇對應(yīng)血清（如C57BL/6小鼠實驗建議使用同品系血清，避免Balb/c等品系差異導(dǎo)致的背景干擾）。

二、血清來源與動物背景控制

1.動物年齡與性別

年齡：

幼鼠（4~6周齡）血清：抗體水平低，適合需要低免疫球蛋白的實驗（如細胞培養(yǎng)初期）。

成年鼠（8~12周齡）血清：營養(yǎng)成分與抗體含量較均衡，適用于多數(shù)常規(guī)實驗。

老齡鼠（>18周齡）血清：可能含更多衰老相關(guān)因子，非特殊需求需謹(jǐn)慎選擇。

性別：

雌性血清：激素水平較穩(wěn)定，適合生殖系統(tǒng)相關(guān)實驗。

雄性血清：蛋白濃度略高，適用于需要高營養(yǎng)支持的細胞培養(yǎng)。

2.健康與飼養(yǎng)條件

SPF級標(biāo)準(zhǔn)：選擇來自SPF級（無特定病原體）飼養(yǎng)環(huán)境的小鼠血清，避免細菌、病毒（如鼠痘病毒、仙臺病毒）或寄生蟲污染（如弓形蟲）。

飼養(yǎng)周期記錄：確認(rèn)小鼠未接觸實驗相關(guān)抗原（如未免疫過特定蛋白），避免血清中含目標(biāo)抗體干擾實驗。

三、血清質(zhì)量控制指標(biāo)

1.關(guān)鍵理化指標(biāo)

蛋白濃度：正常小鼠血清蛋白濃度約為60~80g/L，過低可能提示采血過程溶血或稀釋，過高需確認(rèn)是否為濃縮血清。

溶血程度：肉眼觀察血清應(yīng)為淡黃色透明液體，深紅色或渾濁提示溶血（血紅蛋白>50mg/dL會影響細胞活性）。

內(nèi)毒素水平：細胞實驗要求內(nèi)毒素≤0.1EU/mL，體內(nèi)實驗需≤0.05EU/mL（通過鱟試劑法檢測）。

2.微生物與外源因子檢測

無菌檢測：需通過細菌（如大腸桿菌、葡萄球菌）、真菌（如念珠菌）培養(yǎng)驗證（培養(yǎng)14天無菌落生長）。

病毒篩查：至少包含鼠肝炎病毒（MHV）、小鼠細小病毒（MPV）、乳酸脫氫酶升高病毒（LDV）等檢測（PCR或ELISA法）。

3.功能驗證

細胞培養(yǎng)測試：接種3T3細胞等標(biāo)準(zhǔn)細胞株，觀察細胞增殖曲線（24~72小時倍增率應(yīng)≥1.5倍）及貼壁率（≥90%）。

免疫實驗驗證：如用于ELISA封閉，需測試血清對包被抗原的非特異性結(jié)合率（應(yīng)<5%）。

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