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Lipofectamine™ 2000轉(zhuǎn)染試劑操作要點(diǎn)總結(jié)

來(lái)源:柏萊源(天津)生物科技有限公司   2025年07月29日 11:03  

Lipofectamine™ 2000轉(zhuǎn)染試劑操作要點(diǎn)總結(jié)

Lipofectamine2000 轉(zhuǎn)染試劑是一種常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑,由陽(yáng)離子脂質(zhì)和中性脂質(zhì)混合而成。其主要作用是幫助外源DNA、RNA或蛋白質(zhì)等分子有效地進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),實(shí)現(xiàn)基因轉(zhuǎn)染或蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染。在科研領(lǐng)域,Lipo2000廣泛應(yīng)用于基因轉(zhuǎn)染和siRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn),用于基因表達(dá)調(diào)控、基因沉默等研究。此外,它也可用于蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)染,將外源蛋白質(zhì)引入細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行功能研究。在使用時(shí),需注意根據(jù)不同的細(xì)胞類(lèi)型和待轉(zhuǎn)染分子優(yōu)化濃度和轉(zhuǎn)染時(shí)間,避免過(guò)高濃度或時(shí)間導(dǎo)致的細(xì)胞毒性。正確使用Lipo2000轉(zhuǎn)染試劑可以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性,為細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)研究提供重要支持!那么以下內(nèi)容,我們將為您匯總資深用戶(hù)在進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作時(shí)的經(jīng)驗(yàn),一起來(lái)學(xué)習(xí)下吧~

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Lipofectamine2000 轉(zhuǎn)染試劑的保存與運(yùn)輸:
由于Lipo2000是生物蛋白,存儲(chǔ)與運(yùn)輸?shù)臏囟葹?/span>4℃,所以就算是同一個(gè)批號(hào)的Lipo2000,只有在剛出廠分裝時(shí)活性才是相同的,但經(jīng)過(guò)供應(yīng)商的保存、運(yùn)輸(運(yùn)輸時(shí)溫控各不相同),其活性將有細(xì)微的變化。

Lipofectamine2000 轉(zhuǎn)染試劑的優(yōu)化:

每管Lipo2000的活性都具有差異,哪怕就算是同一管,使用的時(shí)間長(zhǎng)了,后期的活性相較于初始使用時(shí)也不太一樣,所以在拿到一管新的Lipo2000時(shí),一定要做一下活性?xún)?yōu)化;

如果一直使用Lipo2000做實(shí)驗(yàn),優(yōu)化的步驟可以簡(jiǎn)化:

假設(shè)之前轉(zhuǎn)化時(shí)每孔一直用4ul Lipo2000,那么優(yōu)化的步驟可以簡(jiǎn)化為只用5個(gè)孔,每個(gè)孔中Lipo2000用量分別為3ul,3.5ul,4ul, 4.5ul, 5ul其他條件不變,看哪個(gè)Lipo2000的用量結(jié)果最好,接下來(lái)的實(shí)驗(yàn)就選用優(yōu)化的用量。

Lipofectamine2000 轉(zhuǎn)染試劑使用要點(diǎn):

1. 使用前將整管的Lipo2000混勻,分裝,最好分成100ul/管;

2. 實(shí)驗(yàn)前,將分裝好的100ul Lipo2000和質(zhì)粒DNA(或RNA)放到實(shí)驗(yàn)臺(tái)上室溫平衡,不需要冰上保存;

3. 將Opti-MEM培養(yǎng)基放到水浴鍋中37°C平衡;

4. 按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行轉(zhuǎn)染,注意控制好每一步操作的時(shí)間;

5. Lipo2000的用量并不是越多越好,實(shí)際上,Lipo2000一旦加多,毒性會(huì)增加,細(xì)胞會(huì)死亡,轉(zhuǎn)化效率會(huì)大幅降低。

 

綜上所述,Lipofectamine™ 2000 作為高效、常用的轉(zhuǎn)染工具,其成功應(yīng)用的關(guān)鍵在于充分認(rèn)識(shí)其活性特性并實(shí)施精細(xì)的操作優(yōu)化。深刻理解其活性會(huì)因儲(chǔ)存、運(yùn)輸及使用過(guò)程而變化,是新批次試劑到手后必須進(jìn)行活性?xún)?yōu)化的核心原因。 我們?cè)趯?shí)操時(shí)要遵循經(jīng)驗(yàn)要點(diǎn)——優(yōu)化用量、規(guī)范分裝、注意平衡、控制時(shí)間、警惕毒性——將極大提升實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性和成功率。希望以上內(nèi)容能助您在基因表達(dá)、功能研究等實(shí)驗(yàn)中更加得心應(yīng)手,讓 Lipofectamine2000 轉(zhuǎn)染試劑成為您探索細(xì)胞奧秘的堅(jiān)實(shí)助力??茖W(xué)始于嚴(yán)謹(jǐn),成于細(xì)節(jié),預(yù)祝您的轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)順利高效!

產(chǎn)品名稱(chēng)

貨號(hào)

規(guī)格

貨期

Lipofectamine™ 2000 轉(zhuǎn)染試劑

11668019

1.5ml

現(xiàn)貨

柏萊源(天津)生物科技有限公司的優(yōu)勢(shì):

現(xiàn)貨供應(yīng):公司庫(kù)存充足,可快速發(fā)貨,減少用戶(hù)等待時(shí)間。

效期保障:嚴(yán)格把控產(chǎn)品質(zhì)量,確保試劑效期新鮮,保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

專(zhuān)業(yè)技術(shù)支持:提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)方案和技術(shù)指導(dǎo),幫助用戶(hù)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,提高實(shí)驗(yàn)成功率。

定制化服務(wù):根據(jù)用戶(hù)需求,提供個(gè)性化的產(chǎn)品和服務(wù)解決方案。

售后保障:完善的售后服務(wù)體系,及時(shí)解決用戶(hù)在使用過(guò)程中遇到的問(wèn)題。

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