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瑞氏染液使用方法

來源:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司   2013年04月15日 10:48  

瑞氏染液實驗原理:

本品為染色液,適用于各種脫落細(xì)胞和血細(xì)胞的形態(tài)觀察前的染色(涂片染色),為臨床觀察血細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)、識別血細(xì)胞及其異常變化、進(jìn)行白細(xì)胞分類計數(shù)及檢查血液內(nèi)寄生蟲和細(xì)菌等診斷提供幫助。細(xì)胞核蛋白和淋巴細(xì)胞胞漿是由酸性物質(zhì)組成,它與堿性染料美藍(lán)結(jié)合,染成紫藍(lán)色,而細(xì)胞漿則相反,因含有堿性物質(zhì)而與酸性染料伊紅結(jié)合,染成粉紅色;經(jīng)瑞氏染色后,細(xì)胞核和淋巴細(xì)胞胞漿被染成紫藍(lán)色,細(xì)胞漿染成粉紅色。

瑞氏染液使用方法:

1. 制作血液或脫落細(xì)胞涂片,自然干燥固定;

2. 用蠟筆在血膜兩頭劃線,滴加瑞氏染液35滴以覆蓋整個血膜,固定12分鐘;滴加等量或稍多的緩沖液(未加緩沖液涂片上有染料顆粒殘留),吸球吹勻或搖動玻片染色510分鐘; 

3. 用流動水從玻片的一側(cè)沖去染液,自然干燥(或濾紙吸干);

4. 鏡檢。

瑞氏染液注意事項:

1. 使用場所應(yīng)通風(fēng),并遠(yuǎn)離火源; 

2. 制作血涂片應(yīng)注意:玻片應(yīng)干凈,推片與載片保持3045°角,血液推開后應(yīng)立即在空氣中揮動,使其迅速干燥,以免血細(xì)胞變形,固定后方可染色;

3. 血膜未干透,細(xì)胞尚未牢固附在玻片上,在染色過程中容易脫落,因此血膜必需充分干燥;

4. 染液的濃度、染色時間及實驗室的溫度要控制,染液越淡,室溫越低,所需染色時間越長,因此染色時間應(yīng)視具體情況而定;所加染液以覆蓋涂片為宜,不能過少,以免蒸發(fā)而染料沉淀;

   5. 細(xì)胞染色對氫離子濃度十分敏感,稀釋染液必須用緩沖液,沖洗用水應(yīng)近中性,否則各種細(xì)胞染色反應(yīng)異常,致使細(xì)胞的識別困難;

6. 沖洗時應(yīng)用流水將染液沖去,不能先倒掉染液,以免染料沉著于血片上;

7. 染色液可重復(fù)使用,但不能無數(shù)次重復(fù),若有沉淀物應(yīng)過濾后使用;

8. 染色過深可用甲醇或酒精適當(dāng)脫色,不復(fù)染。

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