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原代細胞培養(yǎng)中zui常用的是分散細胞培養(yǎng)之一。分散細胞培養(yǎng)，即將組織塊用機械法或化學法使細胞分散。如欲從胎兒或新生兒的組織分離到活性的游離細胞，經典的方法是用蛋白水解酶（如胰蛋白酶和膠原酶）消化細胞間的結合物，或用金屬離子螯合劑（如EDTA）除去細胞互相粘著所依賴的Ca2+，再經機械輕度振蕩，使之成為單細胞。
舉例：神經細胞分散培養(yǎng)實驗-基本技術指南
從神經組織解離到建立原代細胞培養(yǎng)通常需要幾天，甚至數(shù)周。這個過程不僅繁瑣， 還很單調。其實還有一種捷徑，幾個小時就能實現(xiàn)從神經組織到體外培養(yǎng)細胞系的產生。 這個無縫的流程讓研究人員充分利用了寶貴的樣品，同時還有寶貴的時間。本文就舉個例 子，說明一下從組織樣品到細胞培養(yǎng)的每一步。
步驟1：神經組織解離
神經組織的解離是第1步。Neural Tissue Dissociation Kit能夠將胚胎、新 生或成體來源的組織溫和解離成單細胞懸液。兩步的酶解過程只需要不到一個小時，就能 產生大量下游分析即用的活細胞。解離過程可以手工完成，也可自動完成。
解離過 程如下：
將腦組織切成小塊，收集在HBSS中，300×g離心2分鐘 → 加入預熱的酶混 合物1，37°C孵育 → 再加入酶混合物2 → 解離（手工解離或自動解離）→ 加到30 μm 細胞濾器中，用HBSS洗滌兩次
步驟2：髓磷脂碎片的去除+神經細胞的分離
獲得了單細胞 懸液之后，下一步就是目的細胞的分離。在細胞分離方面，MACS技術無疑是金標準，目 前發(fā)表的文獻已達12000多篇。別急，在細胞分離之前還有一個小插曲。那就是去除對后 續(xù)免疫標記有干擾的髓磷脂（myelin）。美天旎zui近推出的Myelin Removal Beads能夠從 神經細胞懸液中去除髓磷脂，標記+分離的全過程只需要35分鐘。
髓磷脂的去除是了為回收率。做過比對實驗，將步驟1得到的細胞懸液分成兩組，一組用 Myelin Removal Beads處理，一組不處理。然后分別從兩組中分離神經前體細胞。*組 （處理過）的回收率達95%，第二組（未處理）只有80%。
步驟3：神經細胞培養(yǎng) 分離到了你想要的神經細胞， 下一步就是原代細胞培養(yǎng)了。
（來源：乾思生物 http://www.atcccell.com/article/細胞庫技術欄 ）
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