人誘導(dǎo)性一氧化氮合成酶(iNOS)免疫組化試劑盒說(shuō)明書(shū)
保存方法:2-8℃保存。
有效期:一年。生產(chǎn)日期:見(jiàn)封口。
工作原理:
辣根過(guò)氧化物酶(HRP)的分子量(40000),它不會(huì)遮蓋抗原的結(jié)合部位,具有較高活性及特異性,可溶性佳,生成的產(chǎn)物不擴(kuò)散,可作用于多種底物,產(chǎn)生不同顏色且HRP穿透力強(qiáng),易進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。DAB在 H2O2存在的情況下,可以作為HRP的電子供體,產(chǎn)生褐色的不溶顆粒,可作為顯色的試劑。
試劑盒內(nèi)容:
| 名稱 | 規(guī)格 |
1 | 5%BSA | 15mL |
2 | 二抗 | 0.5 mL(未稀釋的) |
3 | SABC | 15 mL |
4 | H2O 2 | 10 mL |
5 | DAB顯色液 | 10 mL |
6 | 枸櫞酸鹽緩沖液 |
|
操作步驟:
1、防脫片劑處理后的切片在二甲苯中脫蠟,然后系列酒精梯度入水,每次3~5 min。
2、0.01mol/L pH7.4 PBS洗滌3次,每次5 min 。
3、3%H 2 O 2 室溫孵育 5-10 分鐘,以消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性。PBS洗滌2-3次,每次5 min;
4、0.01mol/L pH6.0檸檬酸緩沖液(氣管在80~88℃,其他組織92℃)復(fù)性20min,在溶液中冷卻至室溫。0.01 mol/L pH7.4的PBS洗滌3次,每次5 min 。
5、加入封閉液,于濕盒中感作30min,甩去多余的封閉液。
6、滴加血清到切片上37℃孵育1小時(shí)左右或者4℃到第二天清晨, 0.01 mol/LpH7.4的PBS洗滌3次,每次5 min 。
7、滴加FITC或者HRP酶標(biāo)二抗,覆蓋切片,置濕盒中37℃閉光感作30min左右,取出后洗滌(方法同上)。
8、DAB顯色。
9、蘇木素輕度復(fù)染。脫水,透明,封片。顯微鏡觀察。
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來(lái)源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來(lái)源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來(lái)源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問(wèn)題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。