国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質譜|電化學|元素分析|水分測定儀|樣品前處理|試驗機|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術中心>行業(yè)標準>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

小鼠潘氏細胞特異性防御素α5(DEFA5)ELISA說明書

來源:上海繼錦化學科技有限公司   2014年11月02日 13:37  

小鼠潘氏細胞特異性防御素α5(DEFA5)

試劑盒使用說明書

貨號: EIA-2566

 

 

  • 本試劑盒用于體外定量檢測小鼠血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中潘氏細胞特異性防御素α5(DEFA5)的含量。
  • 有效期:6個月
  • 保存條件:2-8

 

 

 

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被潘氏細胞特異性防御素α5(DEFA5)抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的潘氏細胞特異性防御素α5(DEFA5)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

 

樣本處理及要求

1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時后于2000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 2000g離心30分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:2000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響zui后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。

需要而未提供的試劑和器材

  1. 酶標儀(450nm)
  2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
  3. 37℃恒溫箱
  4. 蒸餾水或去離子水

 

 

試劑盒組成

名稱

96孔配置

48孔配置

備注

微孔酶標板

12孔×8條

12孔×4條

標準品

0.5mL*6管

0.5mL*6管

樣本稀釋液

6mL

3mL

檢測抗體-HRP

10mL

5mL

20×洗滌緩沖液

25mL

15mL

按說明書稀釋

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

終止液

6mL

3mL

封板膜

2張

2張

說明書

1份

1份

自封袋

1個

1個

1.  標準品濃度依次為:1000、500、250、125、62.5、31.2 pg/ml。

2.  經(jīng)過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過zui大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

 

注意事項

  1. 嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
  2. 洗板不正確可以導致不準確的結果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
  3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
  4. 底物顯色液應呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
  5. 避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結果。
  6. 在儲存和溫育時避免強光直接照射。
  7. 平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
  8. 任何反應試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應試劑的生物活性。
  9. 不能使用過期產(chǎn)品。

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。

 

試劑準備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡后方可使用。

20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

 

操作步驟

  1.  從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
  2.  設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
  3.  樣本孔待測樣本50μL;空白孔不加。
  4.  除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
  5.  棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板4-5次(也可用洗板機洗板)。
  6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
  7.  每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

 

實驗結果計算

所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程將樣品的OD值代入方程,計算出樣品濃度

 

試劑盒性能

  1. 檢測范圍31.2 pg/ml - 1000 pg/ml
  2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于5.0 pg/ml。
  3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
  4. 重復性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
  5. 標準曲線(典型案例,非本試劑盒提供)

 

Standard Concentration

Mean OD450

Adjusted

0

0.043

none

31.2

0.121

0.078

62.5

0.236

0.193

125

0.355

0.312

250

0.541

0.498

500

1.198

1.155

1000

2.169

2.126

 

               

免責聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權或有權使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權不得轉載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權使用作品的,應在授權范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關法律責任。
  • 本網(wǎng)轉載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責,不承擔此類作品侵權行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉載時,必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負版權等法律責任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權等問題,請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關權利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
北票市| 正阳县| 蓝田县| 松滋市| 九龙县| 都安| 利川市| 芦溪县| 扬中市| 武清区| 安顺市| 余干县| 辛集市| 黄梅县| 鄂伦春自治旗| 许昌县| 洪雅县| 呼伦贝尔市| 亚东县| 玉环县| 六盘水市| 平陆县| 龙泉市| 灵宝市| 宣汉县| 贡觉县| 红原县| 徐闻县| 阿巴嘎旗| 阿瓦提县| 景宁| 洛川县| 邛崃市| 鹤壁市| 潜山县| 霸州市| 普安县| 四平市| 华宁县| 濉溪县| 雅安市|