單克隆抗體生產(chǎn)相關(guān)載體--pEE系列

pEE系列載體是Lonza生物公司研發(fā)的Glutamine Synthetase(GS, 谷氨酰胺合成酶)基因表達(dá)系統(tǒng)，利用谷氨酰胺合成酶篩選標(biāo)記，能夠高水平的在哺乳細(xì)胞內(nèi)表達(dá)目的基因，zui常用的有pEE6.4 和pEE12.4 表達(dá)載體。

GS酶是生物體內(nèi)以谷氨酸和氨為底物合成谷氨酰胺的酶。GS酶的活性能夠被甲硫氨酸砜亞胺（methionine sulphoximine，MSX）選擇性的抑制。一些哺乳動(dòng)物細(xì)胞，例如小鼠骨髓瘤細(xì)胞(NSO細(xì)胞系)無法表達(dá)GS，所以在不添加谷氨酰胺的情況下，細(xì)胞將無法生長。對于這些細(xì)胞系，在無谷氨酰胺的培養(yǎng)基內(nèi)，一個(gè)轉(zhuǎn)染的GS基因可以作為一個(gè)篩選標(biāo)記。其他的一些細(xì)胞系，例如CHO-KI，能夠產(chǎn)生內(nèi)源性的GS酶。對于這些細(xì)胞，在無谷氨酰胺培養(yǎng)基內(nèi)，在高水平足夠抑制GS酶合成的MSX（甲硫氨酸砜亞胺）的作用下，可以對細(xì)胞的生長提供一個(gè)選擇壓力。

目前，GS（谷氨酰胺合成酶）表達(dá)系統(tǒng)為近年來國外zui流行的表達(dá)蛋白藥物或抗體的哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)，在此系統(tǒng)中表達(dá)的單克隆抗體量經(jīng)?？蛇_(dá)到1克/升以上水平。

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