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研域解析：如何讓ELISA實驗體系更穩(wěn)定?2019/12/05: ELISA檢測體系能夠說是現(xiàn)在運用多的檢測方法，并且技術(shù)手段很多，對于花板，假陽性，全顯色，全部顯色，顯色比空缺還低，這些都起到了至關(guān)重要的效果，一定要多留心，那么elisa檢測體系穩(wěn)定，這些實驗進(jìn)程都要留心。應(yīng)留心以下原理：由于蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的，靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體外表的疏水基團(tuán)間的效果，這種物理吸附長短特異性的，受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響，大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團(tuán)，故更易吸附到固相載體外表。小分子必需依靠和

研域共享:血清保存的六點注意事項2019/12/03: (1)需要長期保存的血清有必要儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時刻切勿超過1個月。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%，因而，血清在凍入低溫冰箱前，有必要預(yù)留一定體積空間，不然易發(fā)作污染或玻璃瓶凍裂。?(2)一般廠商供給的血清為無菌，無需再過濾除菌。如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾，切勿直接過濾血清。(3)瓶裝血清凍結(jié)需采用逐漸凍結(jié)法:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿形

本周焦點 ELISA試驗操作失敗的主要原因2019/11/29: 我們知道，ELISA測定中影響要素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在查驗中除正常反響外，有時常可見到一些過錯結(jié)果(即假陽性或假陰性)，那么致使試驗不成功的主要原因有哪些咧？：標(biāo)本的影響：溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測易發(fā)生假陽性?；蛟S是溶血血清中含有過氧化酶物質(zhì)(紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素)，在洗刷過程中往往難以*洗脫，它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O)，從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì)，即顯藍(lán)色，發(fā)生假陽性。所以嚴(yán)峻溶血標(biāo)本禁用。第二，標(biāo)本受細(xì)菌污染：因菌體

研域解析：關(guān)于細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)的那些事2019/11/28: 轉(zhuǎn)染，是將外源性基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)的一種專門技術(shù)。跟著基因與蛋白功用研討的深化，轉(zhuǎn)染目前已成為實驗室工作中常常涉及的基本辦法。轉(zhuǎn)染大致可分為物理介導(dǎo)、化學(xué)介導(dǎo)和生物介導(dǎo)三類途徑。電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于經(jīng)過物理辦法將基因?qū)爰?xì)胞的范例；化學(xué)介導(dǎo)辦法許多，如經(jīng)典的磷酸鈣共沉淀法、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染辦法、和多種陽離子物質(zhì)介導(dǎo)的技術(shù)；生物介導(dǎo)辦法，有較為原始的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)染，和現(xiàn)在比較多見的各種介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù)。抱負(fù)細(xì)胞轉(zhuǎn)染辦法，應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染功率高、細(xì)胞du性小等優(yōu)點。?需求指出的一點，不管采用哪種轉(zhuǎn)染技術(shù)，要

研域?qū)崙?zhàn)：科研血清實驗技能2019/11/26: 問題一：如何貯存和凍結(jié)血清才不會使產(chǎn)品質(zhì)量受損?答：將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但有必要注意的是，融解過程中有必要規(guī)矩地?fù)u晃均勻。長時刻貯存在2-8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等）可能聚集而構(gòu)成沉積或可見的混濁。因而，推薦在-20℃以下貯存血清，并防止反復(fù)凍融。主張血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時，請勿超過一個月。若一次無法用完一瓶，主張無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi)，再放回冷凍。問題二：血清中包含絮狀沉積，它

研域今日介紹：Elisa試劑盒的使用說明2019/11/22: 由于elisa辦法的操作簡單，現(xiàn)在越來越的科研工作者在做試驗時都會挑選elisa辦法，一些剛觸摸的elisa辦法的朋友們估量對elisa試劑盒不怎么了解，今日上海研域說明elisa試劑盒的使用說明：1.在貯存及孵育過程中防止將試劑暴露在強(qiáng)光中。一切試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸騰和污染，試劑防止遭到微生物的污染，由于蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的成果。2.小心汲取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時間和溫度。請注意在汲取標(biāo)本/規(guī)范品，酶結(jié)合物或底物時，個孔與*后一個孔加樣之間的時間距離如果太大，將會導(dǎo)致不同的“

研域快訊：動物組織樣本的前處理方法2019/11/21: 一、勻漿介質(zhì)的制備:一般采用pH7.4,0.01mol/LTris-HCl,1mmol/LEDTA-2Na,0.01mol/L蔗糖,0.8%氯化鈉溶液或直接用0.86%的生理鹽水作為勻漿介質(zhì)。二、組織勻漿的制備1、取組織塊（0.1g～0.2g）*少可到2～5mg在冰冷的生理鹽水中漂洗，除去血液，濾紙拭干，準(zhǔn)確稱重，放入5ml的勻漿管中。2、按重量(g):體積(ml)=1:9的比例加入9倍體積的勻漿介質(zhì)（pH7.4，0.01mol/LTris-HCl，1mmol/LEDTA-2Na,0.01mol

研域與您嘮嘮抗體特異性的那些事兒2019/11/19: 特異性的挑選首要需求考慮四個方面：蛋白特異性、種屬特異性、試驗辦法特異性、符號物的特異性。1.蛋白特異性：針對需求檢測的蛋白查找抗體，幾個細(xì)節(jié)要區(qū)分，重組表達(dá)的蛋白和內(nèi)源性蛋白的檢測，對抗體的要求是不一樣的，留意查看抗體說明書的檢測說明。如果重組蛋白不是全長表達(dá)，則需求留意抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內(nèi)。2.種屬特異性：同種蛋白不同物種，有著或大或小的差異?，F(xiàn)在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規(guī)劃多肽抗原的，根據(jù)蛋白的同源性的狀況與其他種屬發(fā)生交叉反響。需求參照說明書注明

研域頭條：您了解科研血清實驗的世界嘛?2019/11/15: 血清是我公司的主打產(chǎn)品種類，今日上海研域帶您一起來看看科研血清學(xué)實驗的，重點放在血清學(xué)的反響中。那么什么是血清學(xué)反響呢？●一般特點：1.抗原體的結(jié)合具有特異性，當(dāng)有共同抗原體存在時，會呈現(xiàn)穿插反響。2.抗原體的結(jié)合是分子表面的結(jié)合，這種結(jié)合雖相當(dāng)穩(wěn)定，但是可逆的。3.抗原體的結(jié)合是按必定份額進(jìn)行的，只要份額適當(dāng)時，才干呈現(xiàn)可見反響。4.血清學(xué)反響大體分為兩個階段進(jìn)行，但其間無嚴(yán)厲界限?！癯练e反響可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合，在有適量電解質(zhì)存在下，通過必定時刻，構(gòu)成肉眼可見的沉積物，稱為沉積反響。反響

研域課堂:ELISA試劑盒相關(guān)抗體反響規(guī)則?2019/11/14: 昨天上午來自西南大學(xué)的呂同學(xué)通過QQ交談聯(lián)系到本公司業(yè)務(wù)員，此次呂同學(xué)想要了解ELISA試劑盒相關(guān)抗體反響規(guī)則是什么？隨后本公司業(yè)務(wù)員為呂同學(xué)安排了技能專員進(jìn)行解析。技能解析ELISA試劑盒相關(guān)抗體反響規(guī)則：1.初度反響發(fā)生抗體：當(dāng)抗原*次進(jìn)入機(jī)體時，需經(jīng)一定的潛伏期才能發(fā)生抗體，且抗體發(fā)生的量也不多，在體內(nèi)維持的時刻也較短。?2.再次反響發(fā)生抗體：當(dāng)相同抗原第二次進(jìn)入機(jī)體后，開始時，由于原有抗體中的一部分與再次進(jìn)入的抗原結(jié)合，可使原有抗體量略為降低，隨后，抗體效價敏捷大量增加，可比初度反響發(fā)生

研域干貨：培養(yǎng)細(xì)胞樣品怎么處理？2019/11/14: 樣本處理的方法：1.融解RIPA裂解液，混勻。取恰當(dāng)量的裂解液，在運用前數(shù)分鐘內(nèi)參加PMSF，使PMSF的終濃度為1mM。2.關(guān)于貼壁細(xì)胞：去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍(假如血清中的蛋白沒有干擾，能夠不洗)。依照6孔板每孔參加150-250微升裂解液的份額參加裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充沛觸摸。一般裂解液觸摸細(xì)胞1-2秒后，細(xì)胞就會被裂解。3.充沛裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。關(guān)于安

你知道植物Elisa試劑盒可為哪些類型嗎？2019/11/12: 植物ELISA試劑盒技術(shù)可用于測定抗原，也可用于測定抗體。ELISA方法中有二個必要的試劑：(1)固相的抗原或抗體，即"免疫吸附劑"（immunosorbent）；(2)酶符號的抗原或抗體，稱為"結(jié)合物"（conjugate）；一般可將植物Elisa試劑盒分為以下幾種類型，首要需求根據(jù)自己的待檢物來判定試劑盒類型。1)雙抗體夾心法：針對抗原分子上兩個不同抗原決定簇的單克隆抗體分別作為固相捕獲抗體和酶標(biāo)檢測抗體。適用于測定二價或二價以上的大分子抗原如血漿中的細(xì)胞因子，不適用于測定半抗原及小分子單價

研域淺析：影響胎牛血清質(zhì)量的幾大要素2019/11/08: 外觀;拿到血清，早接觸的是血清外觀，關(guān)于短少細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人來說，外觀的判斷尤為重要1、色彩根據(jù)血紅蛋白含量的不同，胎牛血清可表現(xiàn)出或赤色，我國的細(xì)胞培養(yǎng)用血清標(biāo)準(zhǔn)是不高于20mg/dl，實際上，血紅蛋白含量的高低對血清并無直接影響，這個目標(biāo)的含義在于能體現(xiàn)出采血進(jìn)程的謹(jǐn)慎規(guī)范程度，良好的操作能降低血清的溶血。2、沉積進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低，表現(xiàn)為稀薄、清淡，而國產(chǎn)血清，由于絕大多數(shù)是重生牛血清，相對而言愈加粘稠，色彩略深，這關(guān)于開始接觸血清的人很難判斷，但把兩者進(jìn)行比照，可簡單

今日討論：抗體特異性都有哪些斷定2019/11/07: 抗體的特異性斷定抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的辨認(rèn)才干?？贵w的特異性高，它的辨認(rèn)才干就強(qiáng)。衡量特異性一般以交叉反應(yīng)率來標(biāo)明。交叉反應(yīng)率可用競賽克制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原別離做競賽克制曲線，核算各自的結(jié)合率，求出各安閑IC50時的濃度，并按公式核算交叉反應(yīng)率。假如所用抗原濃度IC50濃度為pg/管，而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時，標(biāo)明這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0，即該血清的特異性較好。拓展延伸：1.抗體的效價斷定不管是用于確診仍是用于醫(yī)治，制

研域課堂：ELISA試劑盒操作注意事項2019/11/05: 由于ELISA試劑盒操作方法簡略，現(xiàn)在越來越多的科研人員都知道elisa試劑盒的操作方法，可是您們知道操作時還應(yīng)注意哪些嗎？今日上海研域就來向你說明elisa試劑盒的操作注意事項：1、試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，運用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟掉，不行保存。2、實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，防止蛻變。3、不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前運用。4、運用一次性的吸頭防止穿插污染，吸取終止液和底物A、B液時，防止運用帶金屬部分的加樣器。5、運用潔凈的塑料容

研域干貨:進(jìn)口ELISA試劑盒實驗需符合的要求2019/11/01: 為了保證進(jìn)口ELISA試劑盒實驗的安穩(wěn)及順利完成，客戶們首先要考慮的便是產(chǎn)品的選擇，必定要選用質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品，萬萬不能夠圖廉價，忽視質(zhì)量保證。對此，上海研域ELISA技術(shù)部著重：運用試劑盒需符要求。而主要要求，我們可以根據(jù)以下幾個方面參考：1、檢驗技師應(yīng)具有從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能熟練操作實驗儀器、器械，具有必定總結(jié)和分析問題的能力，對ELISA試劑盒實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。2、運用校對過的微量移液器，排除自然差錯。移液器準(zhǔn)確與否對定量檢測尤為重要。3、仔細(xì)閱讀說明書

研域干貨：特級胎牛血清使用方法2019/10/31: 隨著特級胎牛血清提取技術(shù)的不斷改良升級，品質(zhì)上乘的胎牛血清適用領(lǐng)域日益廣泛，很多用戶都把服務(wù)完善的特級胎牛血清作為實驗室領(lǐng)域的*培養(yǎng)基材質(zhì)，但在實際使用過程中，用戶需謹(jǐn)記以下三點方可保證胎牛血清的使用效果，并較好的完成實驗研究。1.滅活處理很多操作人員為了保護(hù)特級胎牛血清會采取滅火的方式對其進(jìn)行保護(hù)。但對于長時間高溫處理對血清來說，會造成血清中沉淀物增多，若必須滅火時，操作人員需注意溫度不要太高，時間不宜太長，一定要按照血清滅活操作規(guī)程來執(zhí)行滅活操作。滅活過程也要對血清不停的進(jìn)行搖晃，防止產(chǎn)生過

研域干貨：植物安排樣本的前處理2019/10/29: 一、勻漿介質(zhì)一般采用0.05mol/LTris-HCl,pH7.4磷酸鹽緩沖液(PBS),客戶可根據(jù)樣本及測定目標(biāo)的情況自行設(shè)定濃度,意圖是堅持樣本的等滲環(huán)境。二、安排勻漿的制備1、取安排塊（0.2g～0.5g）可到5～10mg在冰冷的PBS中漂洗，濾紙拭干，稱重，放入5ml的勻漿管中。2、按重量(g):體積(ml)=1:4的比例參加4倍體積的勻漿介質(zhì)于勻漿管中，冰水浴條件下,用眼科小剪盡快剪碎安排塊。3、勻漿的方式：手藝勻漿，機(jī)器勻漿。①手藝勻漿：左手持勻漿管將下端刺進(jìn)盛有冰水混合物的器皿中，

研域解析：抗體試劑的保質(zhì)期與儲存溫度2019/10/25: 抗體因為性質(zhì)和所運用的儲存條件不同，其存儲的“保質(zhì)期”可能從幾周到幾年不等。一些確診性抗體被證明通過12-在4℃的儲存能保持其功用。每個抗體存儲的優(yōu)佳條件是*的，但是我們還是可以總結(jié)抗體存儲的一些建議和一般原則?？贵w的儲存時刻取決于抗體固有的性質(zhì)和儲存條件?？贵w（尤其是酶）有必要存放在恰當(dāng)?shù)臏囟群蚿H值范圍。為了維持蛋白質(zhì)的活性，以及避免其聚集，經(jīng)常保存在一定濃度的丙三醇，蔗糖，或相似的物質(zhì)里面。根據(jù)產(chǎn)品的不同品牌、功用，其保質(zhì)期是不必定的；抗體試劑的保質(zhì)期與儲存溫度有著親近的關(guān)系，以下為我司技

研域干貨：常見ELISA試劑盒試驗技能要點2019/10/24: 1.準(zhǔn)備好所有試驗額定所需物品，如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等；2.依據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量確認(rèn)所需試劑的量；3.按闡明書將所用試劑平衡至室溫，制造所需試劑；4.標(biāo)本制備要規(guī)范，每份標(biāo)本體積要按2-3個復(fù)孔以上的量制備，盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法試驗者，留意低溫保存。試驗中為了確認(rèn)信號和背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)試驗中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的規(guī)范品的系列稀釋。按試劑闡明書慣例供給的范圍進(jìn)行操作。規(guī)范品的制造：對于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔

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