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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第18年
在實(shí)驗(yàn)時(shí)怎樣挑選到適合自己試驗(yàn)的抗體呢?2019/10/22
一、關(guān)于特異性的選擇:特異性的選擇首要需求考慮四個(gè)方面:蛋白特異性、種屬特異性、實(shí)驗(yàn)方法特異性、符號(hào)物的特異性。?1、蛋白特異性:針對(duì)需求檢測(cè)的蛋白查找抗體,幾個(gè)細(xì)節(jié)要差異,重組表達(dá)的蛋白和內(nèi)源性蛋白的檢測(cè),對(duì)抗體的要求是不相同的,留心檢查抗體闡明書(shū)的檢測(cè)闡明。假定重組蛋白不是全長(zhǎng)表達(dá),則需求留心抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內(nèi)。2、種屬特異性:同種蛋白不同物種,有著或大或小的差異。現(xiàn)在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規(guī)劃多肽抗原的,根據(jù)蛋白的同源性的情況與其他種屬發(fā)作穿插
研域小講堂:重生牛血清的首要成分有哪些?2019/10/18
血清的成分盡管比較簡(jiǎn)單,但是仍是有很多成分沒(méi)有被破解,這也是一直讓科研人員頭痛的一件事,而且重生牛血清的成分還受供體的一些要素所影響,例如供體的年齡和生理情況,這些都會(huì)影響血清的成分,所以研討血清成分也是一件比較復(fù)雜的工作,那么重生血清有哪些成分?1.蛋白質(zhì)重生牛血清的服務(wù)商介紹,重生牛血清中的首要成份中除包含可攜帶金屬離子、脂肪酸和本身是激素類蛋白外,首要還有白蛋白,球蛋白。2.多肽血小板促生長(zhǎng)因子能促細(xì)胞分裂,據(jù)專人介紹重生牛血清是多肽宗族的重要成員,多肽具有著重要的效果,比方它可以促進(jìn)細(xì)胞
研域課堂:血清中常見(jiàn)的幾個(gè)問(wèn)題2019/10/17
保存血清的方法?血清應(yīng)保存在-5C至-2OC。然而,若存放于4C時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶,建議將無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8C冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過(guò)程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。如何避免沉淀物的產(chǎn)生?1、解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20。C至37。C),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2、解凍血清時(shí),請(qǐng)
在試驗(yàn)中EISA試劑盒的條件挑選2019/10/15
在ELISA試劑盒中,進(jìn)行各項(xiàng)試驗(yàn)條件的挑選是很重要的,其間包括:(1)固相載體的挑選:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等?,F(xiàn)在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不論何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一試驗(yàn)條件下進(jìn)行反響,調(diào)查其顯色反響是否均一性,據(jù)此判明其吸附功能是否良好。(2)包被抗體(或抗原)的挑選:將抗體(或抗原)吸附在固相載體外表時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)刻及其蛋
研域課堂:原代細(xì)胞的培育辦法2019/10/11
1、安排塊培育法(1)依照前述辦法取材,將安排剪成或切成1mm3巨細(xì)的小塊,并參加少許培育基使安排濕潤(rùn)。(2)將小塊均勻涂布于瓶壁,每小塊距離0.2cm~0.5cm,一般在25mL培育瓶(底面積為17.5cm2)可接種20~30小塊為宜,小塊放置后,輕輕翻轉(zhuǎn)培育瓶,使瓶底朝上,然后于瓶?jī)?nèi)參加適量培育基蓋好瓶塞,將瓶歪斜放置在37℃溫箱內(nèi)。(3)培育2~4小時(shí),待小塊貼附后,將培育瓶緩慢翻轉(zhuǎn)平放,靜置培育,動(dòng)作要輕,嚴(yán)禁搖擺和來(lái)回振動(dòng),以防因?yàn)榧?dòng)而使小塊漂起而造成培育失敗,若安排塊不易貼壁可預(yù)先
研域課堂:血清攪擾性內(nèi)源性與外源性物質(zhì)的詳解2019/10/10
ELISA試劑盒檢測(cè)中血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本中攪擾性物質(zhì)是引起檢測(cè)后成果偏高或偏低的主要原因,攪擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類:1、外源性物質(zhì)外源性物質(zhì)常常是因?yàn)橛糜贓LISA試劑盒測(cè)定的血標(biāo)本的收集、儲(chǔ)存等不當(dāng)所形成的。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本儲(chǔ)存過(guò)久、標(biāo)本凝聚不全和采血管中添加物等影響。1)標(biāo)本溶血因?yàn)楦鞣N人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出很多具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶為符號(hào)的ELISA試劑盒測(cè)定中,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,
密不可分: 抗體試劑的保質(zhì)期與貯存溫度2019/10/08
依據(jù)產(chǎn)品的不同品牌、功能,其保質(zhì)期是不必定的;抗體試劑的保質(zhì)期與貯存溫度有著親近的關(guān)系,以下為我司技術(shù)部整理出來(lái)的以供大家參考:抗體由于性質(zhì)和所運(yùn)用的貯存條件不同,其存儲(chǔ)的“保質(zhì)期”可能從幾周到幾年不等。一些確診性抗體被證明經(jīng)過(guò)12-在4℃的貯存能堅(jiān)持其功能。抗體的貯存時(shí)間取決于抗體固有的性質(zhì)和貯存條件??贵w(尤其是酶)必須存放在適當(dāng)?shù)臏囟群蚿H值規(guī)模。一、保存溫度要求一般來(lái)說(shuō),抗體存放在≤4℃的清潔,滅菌的玻璃或塑料管。貯存在室溫下一般會(huì)由于微生物的成長(zhǎng)導(dǎo)致抗體退化和/或失活??贵w貯存液放在4
關(guān)于細(xì)胞因子ELISA試劑盒的五種檢測(cè)辦法2019/09/29
細(xì)胞因子ELISA試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗體ELISA檢測(cè)。ELISA是研究蛋白抗體的重要辦法。它采用抗原與抗體的特異反響將待測(cè)物與酶進(jìn)行直接或直接結(jié)合,然后通過(guò)酶與底物發(fā)生顏色反響,進(jìn)行定性和定量分析。接下來(lái)我們來(lái)介紹細(xì)胞因子ELISA試劑盒的五種檢測(cè)辦法。一、直接法?使用了二抗添加信號(hào)強(qiáng)度,也使抗體的挑選多樣化,可是直接法簡(jiǎn)單發(fā)生穿插反響。直接法只能用于測(cè)定抗體,首要用于疾病的診斷,其優(yōu)點(diǎn)是只需要改變包被抗原,酶標(biāo)抗體是通用的。二、捕獲法全稱捕獲包被法也稱為反向直接法,首要
讓細(xì)胞活躍的訣竅你知道多少?2019/09/27
細(xì)胞但是許多生物學(xué)試驗(yàn)的主角。如果細(xì)胞心境欠好,那么試驗(yàn)的效果也不會(huì)好到哪兒去。如何讓細(xì)胞活躍?1.保證一切試驗(yàn)室資料都無(wú)菌穿插污染是細(xì)胞培育的大敵。即使是輕微的污染,也或許毀了幾個(gè)星期的效果。因培育箱內(nèi)溫暖潮濕,真菌極易成長(zhǎng),因而有必要留意定時(shí)清潔。此外,在將培育瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺(tái)之前,運(yùn)用酒精擦洗潔凈,以防止污染。2.小心處理您的培育物細(xì)胞培育的脆弱性怎么著重也不為過(guò)。劇烈搖晃,或連續(xù)的溫度波動(dòng)或許會(huì)對(duì)成長(zhǎng)發(fā)生不利的影響。保證培育箱是水平的,溫度均一,且遠(yuǎn)離電動(dòng)儀器。此外,
研域詳解:血清攪擾性內(nèi)源性與外源性物質(zhì)2019/09/26
ELISA試劑盒檢測(cè)中血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本中攪擾性物質(zhì)是引起檢測(cè)后成果偏高或偏低的主要原因,攪擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類:1、外源性物質(zhì)外源性物質(zhì)常常是因?yàn)橛糜贓LISA試劑盒測(cè)定的血標(biāo)本的采集、儲(chǔ)存等不妥所造成的。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本儲(chǔ)存過(guò)久、標(biāo)本凝聚不全和采血管中添加物等影響。1)標(biāo)本溶血因?yàn)楦鞣N人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出很多具有過(guò)氧化物酶活性的血紅蛋白,在以辣根過(guò)氧化物酶為符號(hào)的ELISA試劑盒測(cè)定中,會(huì)導(dǎo)致非特異性顯色,
關(guān)于進(jìn)口ELISA試劑盒的操作技術(shù)2019/09/24
進(jìn)口ELISA試劑盒操作過(guò)程的操控:①嚴(yán)格按照試劑闡明操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。②加樣后及時(shí)放入孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。防止孵育時(shí)刻人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反響孔周圍,難以清洗*。③加樣時(shí)保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)防止觸摸金屬器械。加停止液時(shí)要防止發(fā)生氣泡。④用洗板機(jī)洗板時(shí),確保洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(挑選干凈、無(wú)或少塵的吸水資料)上輕輕拍干;還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過(guò)程中易發(fā)生拖帶現(xiàn)象。⑤合理安排檢丈量,防止反響板
研域小講堂:該怎樣挑選適宜的HA標(biāo)簽抗體?2019/09/20
HA標(biāo)簽可位于蛋白質(zhì)的C端或N端,該系統(tǒng)已廣泛使用于多種細(xì)胞類型,相應(yīng)的HA標(biāo)簽抗體也被廣泛使用。HA標(biāo)簽抗體能特異識(shí)別C結(jié)尾或N結(jié)尾帶有HA標(biāo)簽(HA-tagged)的交融蛋白,也能夠用于檢測(cè)和HAtag交融表達(dá)蛋白的表達(dá)、細(xì)胞內(nèi)ding位,以及純化、定性或定量檢測(cè)HAtag交融表達(dá)蛋白等。挑選適宜HA標(biāo)簽抗體需求考慮的要素我們?cè)谔暨x一個(gè)標(biāo)簽抗體時(shí),首要根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)使用上的需求。這兒需求考慮的要素包含,HA抗體的使用檢測(cè)類型、HA抗體的克隆性及制備來(lái)歷等。比方該HA抗體是否能用于免疫熒光IF的
在細(xì)胞培育中怎么消除組織培育的污染呢?2019/09/19
當(dāng)重要的培育污染時(shí),研究者可能企圖消除或控制污染。首要,確定污染物是細(xì)菌、真菌、支原體或酵母,把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔脫離,用試驗(yàn)室消毒劑消毒培育器皿和超凈臺(tái),檢查HEPA過(guò)濾器。高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對(duì)一些細(xì)胞系,因而,做劑量反應(yīng)試驗(yàn)確定抗生素和抗霉菌素發(fā)生的劑量水平。下面是我司推薦的確定水平和消除培育污染的試驗(yàn)過(guò)程:?1.在無(wú)抗生素的培育基中消化、計(jì)數(shù)和稀釋細(xì)胞,稀釋到慣例細(xì)胞傳代的濃度。2.渙散細(xì)胞懸液到多孔培育板中,或幾個(gè)小培育瓶中。在一個(gè)濃度梯度范圍內(nèi),把選擇抗生素加入到每一個(gè)孔
研域小講堂:血清應(yīng)該如何解凍!2019/09/19
血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。然而,若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若您一次無(wú)法用完一瓶,主張將無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。那么,如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?將血清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須留意的是,溶解過(guò)程中必須規(guī)矩地?fù)u晃均勻。避免發(fā)生沉淀物。1、解凍血清時(shí),請(qǐng)依照所主張的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫),若血清凍結(jié)時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃,試驗(yàn)顯現(xiàn)非常簡(jiǎn)單發(fā)生沉淀物。2、解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成
準(zhǔn)確度好是ELISA試劑盒試驗(yàn)的主要優(yōu)勢(shì)之一2019/09/17
準(zhǔn)確度好是ELISA試劑盒試驗(yàn)的主要優(yōu)勢(shì)之一,那么怎么知道ELISA試劑盒的準(zhǔn)確度是多少呢?當(dāng)ELISA試劑盒同一樣本達(dá)必定次數(shù)后所得的一組數(shù)據(jù),其中靠近均值(X)的±1SD范圍內(nèi)的數(shù)據(jù),占該組數(shù)據(jù)的68%,在X±2SD范圍內(nèi)散布的數(shù)據(jù)占整體的95%,在X±3SD范圍內(nèi)散布的數(shù)據(jù)占整體的99%。當(dāng)我們要求檢驗(yàn)結(jié)果在X±2SD范圍內(nèi)為合格時(shí),將有95%的數(shù)據(jù)可能合格。準(zhǔn)確度是指測(cè)定結(jié)果與真值(或靶值)挨近的程度。準(zhǔn)確度不能以數(shù)字表明,往往用不準(zhǔn)確度來(lái)衡量。測(cè)定結(jié)果與靶值的違背程度稱為差錯(cuò),它表明該
怎么區(qū)分所購(gòu)的ELISA試劑盒價(jià)格能否測(cè)手中的樣本呢?2019/09/10
現(xiàn)在ELISA試劑盒價(jià)格查看的樣本中,除了細(xì)胞上清外,還有比較大的一部分是血清和血漿樣本。關(guān)于ELISA試劑盒客戶來(lái)說(shuō),在試驗(yàn)中或許用到不一樣的樣本,怎么區(qū)分所購(gòu)的ELISA試劑盒能否測(cè)手中的樣本呢?關(guān)于zui常見(jiàn)的細(xì)胞上清,咱們都知道,培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)程中,無(wú)分外狀況一般是10%的牛血清參與培養(yǎng)基中,經(jīng)過(guò)培養(yǎng)后,細(xì)胞的吸收耗費(fèi),zui后細(xì)胞上清中蛋白含量會(huì)很少,并且關(guān)于一般牛血清出產(chǎn)的廠家來(lái)說(shuō),在出產(chǎn)進(jìn)程中現(xiàn)已去除了,所以對(duì)一般ELISA而言,不會(huì)影響抗體抗原的。1、如廠家沒(méi)有供應(yīng)專門用于血清血漿樣
研域教您一抗/二抗該怎么選?2019/09/06
我們?cè)谏钪薪?jīng)常會(huì)面臨做選擇這樣的一個(gè)難題,其實(shí)做選擇本身并不是多么困難的事情,關(guān)鍵在于您是否了解自己內(nèi)心真正需要的是什么。就好比我們的實(shí)驗(yàn)者在選擇產(chǎn)品的品牌、質(zhì)量、規(guī)格等,根據(jù)這些信息再去做相關(guān)的判斷。比如zui簡(jiǎn)單的一個(gè)例子,不少的伙伴都對(duì)一抗、二抗的選擇方面甚是苦惱,那如何選擇呢,研域教您!擇一抗宿主物種通常,當(dāng)使用偶聯(lián)二抗檢測(cè)未偶聯(lián)一抗時(shí),產(chǎn)生抗體的宿主動(dòng)物物種就顯得非常重要。對(duì)于免疫組織化學(xué),產(chǎn)生一抗的物種應(yīng)盡可能與樣品物種不同。這是為了避免抗免疫球蛋白的二抗與樣品中的內(nèi)源性免疫球蛋白
研域小課堂:關(guān)于細(xì)胞傳代方法您做對(duì)了嗎?2019/09/05
經(jīng)過(guò)自主研發(fā)和兼并重組不斷擴(kuò)展企業(yè)產(chǎn)品線,逐步發(fā)展為試劑的專業(yè)制造商和電子商務(wù)集成供應(yīng)商,成為試劑職業(yè)發(fā)展的者。在開(kāi)始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全。一:細(xì)胞與試劑方面:1、細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢合適)2、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等合適細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)3、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)4、7.5%NaHC03溶液?5、0.25%胰蛋白酶6、PBS洗液。二;試驗(yàn)小用具方面:1、小方瓶(100m1)2、克氏瓶3、膠塞4、吸管(10ml、
研域淺談:怎么防止血清中發(fā)作沉積?2019/09/03
您不樂(lè)意種花,您說(shuō),我不愿看見(jiàn)它一點(diǎn)點(diǎn)凋落。是的,為了防止結(jié)束,您防止了全部開(kāi)始,明顯這不是咱們想看到的結(jié)果。在咱們科研小伙伴血清試驗(yàn)過(guò)程中,怎樣防止血清中發(fā)作沉積也是一大問(wèn)題!上海研域不想讓您錯(cuò)失,特邀和您一起共享怎樣防止血清中發(fā)作沉積。血清,指血液凝固后,在血漿中除掉纖維蛋白分離出的淡通明液體或指纖維蛋白已被除掉的血漿。其主要效果是供給根本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、供給激素和各種生長(zhǎng)因子、供給結(jié)合蛋白、供給促接觸和擴(kuò)展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培育中的細(xì)胞起到某些維護(hù)效果。如何防止血清中發(fā)作沉積按如下操
研域生物:ELISA試劑盒檢測(cè)有哪些范圍呢2019/08/30
ELISA試劑盒靈敏度高是一大優(yōu)點(diǎn),而這其實(shí)也是和檢測(cè)樣本有些關(guān)聯(lián)的,我們一般說(shuō)來(lái),如果待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較高,則對(duì)靈敏度要求相對(duì)小一些。如果待測(cè)樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問(wèn)題。一般來(lái)說(shuō),試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準(zhǔn)確的,低于這個(gè)值因?yàn)榕c曲線是個(gè)“S”型結(jié)構(gòu)有關(guān),所以結(jié)果是有偏差的,是一種估算。再加上實(shí)驗(yàn)誤差,所以達(dá)不到理想的效果。建議選擇試劑盒時(shí),應(yīng)該看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。那么ELISA試劑盒檢測(cè)哪些范圍呢?一般說(shuō)來(lái),診斷試劑的檢
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