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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第18年
ELISA試劑盒試驗(yàn)水浴保溫辦法與操作技巧2022/12/12
ELISA試劑盒的溫育常選用的溫度有43℃、37℃、室溫文4℃等。37℃是試驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的適宜溫度。在樹(shù)立ELISA方法作反響動(dòng)力學(xué)研究時(shí),試驗(yàn)標(biāo)明,兩次抗原抗體反響一般在37℃經(jīng)1~2小時(shí),產(chǎn)品的生成可達(dá)高峰。為加快反響,可進(jìn)步反響的溫度,有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行,但不宜選用更高的溫度。但因所需時(shí)刻太長(zhǎng),在ELISA試劑盒中一般不予選用。ELISA試劑盒實(shí)踐進(jìn)程操作技巧:1)加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本,防止刮擦包被板底部,加樣進(jìn)程中防止液體外濺,血清殘留在反響孔壁上。2)
淺談EL ISA檢測(cè)血清注意事項(xiàng)2022/12/02
大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按慣例方法收集應(yīng)留意防止溶血紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物貢以HRP為符號(hào)的ELISA測(cè)定中溶血標(biāo)本可能會(huì)添加啡特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有污染菌體中可能含有內(nèi)源性HRP也會(huì)發(fā)生假陽(yáng)性反應(yīng)。一般說(shuō)來(lái)在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4C。超越-周測(cè)定的需20°C保存.凍住血清融解后蛋白質(zhì)局部濃縮散布不均應(yīng)充沛混勻并防止發(fā)生氣泡?;鞚峄蛴谐练e的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾弄清后再檢測(cè)。重復(fù)東融會(huì)使抗體效價(jià)下跌所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作
你知道ELISA試劑盒加樣問(wèn)題及解決方法嗎2022/11/25
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中,加樣是重要的一項(xiàng)步驟,這一步驟在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中都有著很大的影響。今天上海研域生物針對(duì)這一問(wèn)題作出了一些整理,希望可以給大家?guī)?lái)幫助。一、加樣問(wèn)題的可能原因1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;2.手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));3.加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。二、解決方法1.標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:必須使用含抗凝劑的血液標(biāo)本收集管,采血后必須立即顛倒采血管混
細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)2022/11/16
進(jìn)入細(xì)胞間開(kāi)始細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),必須嚴(yán)格按照下列注意事項(xiàng):1.確定所有的細(xì)胞操作用的溶液和耗材都已經(jīng)消毒并檢測(cè)沒(méi)有問(wèn)題,不確定的溶液和耗材請(qǐng)勿使用,除非特殊情況,不要借用別人的溶液。2.確定衣服的袖口已經(jīng)卷起或者白大褂的袖口已經(jīng)扎緊。3.確定酒精燈內(nèi)的酒精量,需要的話及時(shí)進(jìn)行補(bǔ)充。4.確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開(kāi)啟瓶蓋,實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前可以把所有瓶蓋旋松。5.盡量不要直接傾倒溶液,除非瓶口沒(méi)有被燒壞。如果傾倒失敗,溶液粘在瓶口,請(qǐng)用噴過(guò)75%酒精的紙巾仔細(xì)清潔瓶口周?chē)ú?
上海研域教你如何培養(yǎng)出好的細(xì)胞2022/11/10
把細(xì)胞養(yǎng)好的三個(gè)關(guān)鍵要素是:良好的細(xì)胞來(lái)源,正確的實(shí)驗(yàn)操作,以及合適的培養(yǎng)體系。其中“合適的培養(yǎng)體系”就是要?jiǎng)?chuàng)造適合細(xì)胞生長(zhǎng)的環(huán)境,給細(xì)胞建立一個(gè)滿意的“家”。細(xì)胞培養(yǎng)基本條件:1.合適的細(xì)胞培養(yǎng)基合適的細(xì)胞培養(yǎng)基是體外細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的重要的條件之一,培養(yǎng)基不僅提供細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和促使細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的基礎(chǔ)物質(zhì),而且還提供培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)和繁殖的生存環(huán)境。2.血清目前,大多數(shù)合成培養(yǎng)基都需要添加血清。血清是細(xì)胞培養(yǎng)液中重要的成分之一,含有細(xì)胞生長(zhǎng)所需的多種生長(zhǎng)因子及其它營(yíng)養(yǎng)成分。3.無(wú)菌無(wú)毒細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境無(wú)菌無(wú)毒
分享人ELISA試劑盒的原理及優(yōu)勢(shì)2022/11/02
人ELISA試劑盒的原理及優(yōu)勢(shì):1、ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特一興反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性的試驗(yàn)技術(shù)。2、由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚ben乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而包正試驗(yàn)結(jié)果的特一興與穩(wěn)定性。3、Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。4、ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性
說(shuō)說(shuō)ELISA試劑盒的保溫方式有哪些2022/10/25
在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱為溫育,有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當(dāng)。ELISA屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)
ELISA液體樣本處理方法及收集注意事項(xiàng)2022/10/24
ELISA液體樣本:ELISA液體樣本處理原則:所有的液體樣本,用無(wú)菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),如果以后碰到其他的液體樣本,也按這個(gè)方法,納入?yún)R總表。1、血清:用無(wú)菌管收集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2、血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),
ELISA反應(yīng)需要一定時(shí)間的溫育快來(lái)了解吧2022/10/18
ELISA屬固相,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力
如何判斷ELISA試劑盒試劑是否合格你知道嗎2022/10/10
怎樣判斷ELISA試劑盒試劑是否合格一:查驗(yàn)技師應(yīng)具有從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能嫻熟操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有必定總結(jié)和剖析問(wèn)題的才干,對(duì)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中呈現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。二:運(yùn)用校對(duì)過(guò)的微量移液器,排除天然差錯(cuò)。移液器精確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。三:仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)嚴(yán)厲按照說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不行混用。值得改善的當(dāng)?shù)兀貜?fù)實(shí)驗(yàn)斷定建立后才干改善。四:洗刷*:洗板不*,酶結(jié)合物本底顯色會(huì)呈現(xiàn)假陽(yáng)性。洗刷液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳舊的洗刷液會(huì)呈現(xiàn)本底增高現(xiàn)
你知道魚(yú)ELISA試劑盒操作中有哪些技術(shù)優(yōu)勢(shì)嗎2022/09/28
魚(yú)ELISA試劑盒是一種敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的ELISA試劑盒,其試劑安穩(wěn)、易保留、操作簡(jiǎn)練、作用區(qū)分客觀等要素,適宜于大規(guī)模篩查實(shí)驗(yàn)又能夠用于少數(shù)標(biāo)本的檢查,能夠做定性實(shí)驗(yàn)也能夠做定量分析。魚(yú)ELISA試劑盒操作技術(shù)優(yōu)勢(shì):1.操作前應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過(guò)程中避免液體外濺,血清殘留在反
?血清實(shí)驗(yàn)相關(guān)問(wèn)題解答2022/09/21
1.如何貯存和凍結(jié)血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?答:將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但有必要注意的是,融解過(guò)程中有必要規(guī)矩地?fù)u晃均勻。長(zhǎng)時(shí)刻貯存在2-8℃時(shí),血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而構(gòu)成沉積或可見(jiàn)的混濁。因而,推薦在-20℃以下貯存血清,并防止反復(fù)凍融。主張血清應(yīng)保存在-2O℃。若存放于4℃時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。若一次無(wú)法用完一瓶,主張無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。2.血清中包含絮狀沉積,它們是什么
?細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)問(wèn)題解答2022/09/14
一、細(xì)胞培養(yǎng)基礎(chǔ)問(wèn)答1.BHK細(xì)胞就是指BHK21嗎?答:BHK細(xì)胞是指幼年敘利亞地鼠腎細(xì)胞(BabyHamsterSyrianKidney),1961年建株。原始的細(xì)胞株是成纖維細(xì)胞,貼壁依賴性。1963年獲得單細(xì)胞克隆細(xì)胞。后經(jīng)無(wú)數(shù)次傳代后細(xì)胞可懸浮生長(zhǎng),它廣泛用于增殖各種病毒,生產(chǎn)獸用疫苗。常用的是BHK21的一個(gè)亞克隆細(xì)胞,即克隆13或C13。2.二倍體細(xì)胞有什么特點(diǎn)?答:二倍體細(xì)胞的染色體組型是2n核型;貼壁依賴接觸抑制;一般可傳代50代;無(wú)致瘤性。如W1-38:正常胚肺組織人二倍體細(xì)
你們知道血清的應(yīng)用與貯存是如何操作的嗎2022/09/02
你們知道血清的應(yīng)用與貯存是如何操作的嗎?下面我就來(lái)給你們介紹一下準(zhǔn)確的應(yīng)用及保存血清,才能使血清施展應(yīng)有的效果。應(yīng)用前處理:大部分血清在應(yīng)用前必需滅活處置,即560C30分鐘。滅活的目標(biāo)是去除血清中的補(bǔ)體身分,防止補(bǔ)體對(duì)細(xì)胞發(fā)生毒性感化。血清顛末滅活也會(huì)喪失一些對(duì)細(xì)胞無(wú)利的成分,如發(fā)展因子,是以也有人提出血清不經(jīng)滅活間接用于造就,這樣做的前提是確認(rèn)血清中不含補(bǔ)體身分。對(duì)付一些品德高的胎牛血清和新牛血清能夠斟酌不經(jīng)滅活間接用于細(xì)胞造就。貯存條件:血清一樣平常貯存于一200C,同時(shí)應(yīng)防止重復(fù)凍融。購(gòu)
上海研域跟您淺談ELISA實(shí)驗(yàn)中的基質(zhì)效應(yīng)與過(guò)錯(cuò)2022/08/23
當(dāng)ELISA實(shí)驗(yàn)中的樣本值較低挨近試劑盒的靈敏度時(shí),就容易發(fā)生樣本值低于空白值的現(xiàn)象,特別是在血清和血漿樣本的查看。ELISA實(shí)驗(yàn)專(zhuān)家對(duì)此現(xiàn)象的要素分析有兩個(gè)方面,一是基質(zhì)效應(yīng)、二是實(shí)驗(yàn)過(guò)錯(cuò)。一、基質(zhì)效應(yīng)分析中,基質(zhì)指的是樣本中被分析物以外的組分,基質(zhì)常常對(duì)分析物的分析進(jìn)程有顯著的煩擾,并影響分析成果的準(zhǔn)確性,這些影響和煩擾被稱為基質(zhì)效應(yīng)。仿照物與被測(cè)樣本在蛋白豐度、復(fù)雜性、pH等要素都會(huì)存在差異。當(dāng)單個(gè)樣本或少量樣本值低于空白值時(shí),可能是過(guò)錯(cuò)要素,這時(shí)應(yīng)增加重復(fù),進(jìn)步操作技術(shù)。當(dāng)許多樣本都低于
ELISA檢測(cè)操作注意事項(xiàng)問(wèn)題及解決方案2022/08/18
以下是影響ELISA檢測(cè)的關(guān)鍵因素,也是眾多ELISA用戶在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常遇到的問(wèn)題及解決方案:?jiǎn)栴}:為什么所有試劑和檢測(cè)樣本要平衡至室溫后再進(jìn)行加樣操作?解決方案:溫度是ELISA結(jié)合反應(yīng)的重要影響因素。為了使所有樣本在一致的溫度下反應(yīng),實(shí)驗(yàn)前務(wù)必將所有試劑平衡至室溫,包括檢測(cè)樣本。避免因溫度的動(dòng)力學(xué)反應(yīng)差異而導(dǎo)致ELISA檢測(cè)結(jié)果的不準(zhǔn)確。問(wèn)題:為什么標(biāo)準(zhǔn)曲線線性較差?解決方案:按照推薦方式保存標(biāo)準(zhǔn)品;溶解標(biāo)準(zhǔn)品之前需短暫離心,*收集粉末;確保標(biāo)準(zhǔn)品*溶解和混勻(大約10min),然后再進(jìn)行后續(xù)
提取原代細(xì)胞的方法與詳細(xì)步驟2022/08/11
原代細(xì)胞是通過(guò)一定的方法如酶法或機(jī)械法或生長(zhǎng)法使細(xì)胞從人體和動(dòng)物的母體器官、組織或液體中分離出來(lái),并在受控環(huán)境條件下分離的細(xì)胞在體外或其他人體和動(dòng)物體內(nèi)生長(zhǎng)。原代細(xì)胞的提取方法詳細(xì)步驟:1.整個(gè)操作要在潔凈通風(fēng)的超凈臺(tái)下進(jìn)行,所有的器材要高壓消毒。2.根據(jù)BALB/c小鼠的體重,將小鼠置于盛有75%乙醇的燒杯內(nèi),這一步不僅可以消毒,也可以讓小鼠體毛浸濕,后續(xù)剃去皮毛的時(shí)候不會(huì)沾到剪刀或組織上。3.用鑷子輕輕挑起小鼠的心臟,裝有PBS的注射器插入心尖,同時(shí)在右心耳處剪開(kāi)一個(gè)小口,緩慢推動(dòng)注射器,隨
上海研域與您分享ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作經(jīng)驗(yàn)2022/08/02
對(duì)于ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作,一些老師可謂是得心順手,操作起來(lái)很流暢;但對(duì)于一些實(shí)驗(yàn)新手,大概只是背熟了理論概況,在實(shí)踐上,還是缺乏經(jīng)驗(yàn),不知從何下手:今日,上海研域公司為幫助大家更好更順利的完成實(shí)驗(yàn),特對(duì)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行了總結(jié),大家一起來(lái)看看吧:1.實(shí)驗(yàn)中每一個(gè)步驟都要認(rèn)真對(duì)待,省去任何一個(gè)步驟或者不認(rèn)真對(duì)待都可能導(dǎo)致ELISA實(shí)驗(yàn)的失敗2.頭吸完后馬上從移液器上取下來(lái),以免忙亂的時(shí)候又以同一汲取另一種試劑3.實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前認(rèn)真做個(gè)實(shí)驗(yàn)計(jì)劃,做實(shí)驗(yàn)時(shí)專(zhuān)心致志不要三心二意注意力不集中
細(xì)胞培養(yǎng)需注意哪些過(guò)程2022/07/26
細(xì)胞培養(yǎng)一、準(zhǔn)備工作準(zhǔn)備工作的內(nèi)容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無(wú)菌室或超凈臺(tái)的清潔與消毒,培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試等。二、取材在無(wú)菌環(huán)境下從機(jī)體取出某種組織細(xì)胞,經(jīng)過(guò)一定的處理后接入培養(yǎng)器血中,這一過(guò)程稱為取材。如是細(xì)胞株的擴(kuò)大培養(yǎng)則無(wú)取材這一過(guò)程。機(jī)體取出的組織細(xì)胞的初次培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。理論上講各種動(dòng)物和人體內(nèi)的所有組織都可以用于培養(yǎng),實(shí)際上幼體組織比成年個(gè)體的組織容易培養(yǎng),分化程度低的組織比分化高的容易培養(yǎng)。取材后應(yīng)立即處理,盡快培養(yǎng),因故不能馬上培
淺析血清是ELISA試劑盒常用標(biāo)本2022/07/21
血清是ELISA試劑盒常用標(biāo)本ELISA試劑盒檢測(cè)中血漿一般可視為與血清平等的標(biāo)本,標(biāo)本中攪擾性物質(zhì)是引起檢測(cè)后成果偏高或偏低的主要原因,攪擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類(lèi):1.內(nèi)源性物質(zhì)常見(jiàn)的攪擾物質(zhì)有:類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜靶抗原本身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、穿插反響物質(zhì)和其它物質(zhì)等。類(lèi)風(fēng)濕因子:血清中IgM、IgG型類(lèi)風(fēng)濕因子(RF)在ELISA試劑盒檢測(cè)中,可與ELISA試劑盒體系中的捕獲抗體及酶符號(hào)二抗的FC段直接結(jié)合,然后導(dǎo)致檢測(cè)OD值偏高。補(bǔ)體:ELI
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