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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
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大鼠胰島素細(xì)胞傳代的方法2021/12/09
大鼠胰島素細(xì)胞傳代方法:我們在收到細(xì)胞后,取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況。如果細(xì)胞已長滿,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下:1.棄去培養(yǎng)液,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次。2.加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶,細(xì)胞隨即脫落下來。3.加入6-8ml*培養(yǎng)基,吸出,分到新的培養(yǎng)瓶中。1:3~1:6傳代;2
ELISA實(shí)驗(yàn)中基質(zhì)效應(yīng)該如何避免2021/11/25
在ELISA實(shí)驗(yàn)的時候,我們經(jīng)常會遇到樣品濃度挨近試劑盒的靈敏度,容易發(fā)生樣本OD450值低于空白值的現(xiàn)象,特別是在血清和血漿樣本中。這就有可能是基質(zhì)效應(yīng)導(dǎo)致的結(jié)果。什么是基質(zhì)效應(yīng)呢?首先我們要知道什么是基質(zhì),基質(zhì)是指樣品中目標(biāo)分析物以外的部分。由于基質(zhì)成分會對分析過程有顯著干擾,影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確性。業(yè)內(nèi)把這些影響統(tǒng)稱為基質(zhì)效應(yīng)。這是ELISA試劑盒開發(fā)和使用中需要避開的雷。如何判斷是否是基質(zhì)效應(yīng)呢?當(dāng)單個樣本或少量樣本值低于空白值時,可能是實(shí)驗(yàn)操作出現(xiàn)問題,這時應(yīng)增加重復(fù),進(jìn)步操作技術(shù)。當(dāng)許
ELISA實(shí)驗(yàn)需要注意哪些問題2021/11/19
Elisa實(shí)驗(yàn)中應(yīng)該注意的問題有哪些呢?今天上海研域生物帶你詳細(xì)的了解會影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素,包括樣品稀釋、試劑盒平衡、樣品和試劑的混勻、加樣、溫育等問題。1、樣品稀釋:一般產(chǎn)品的樣品稀釋倍數(shù)均通過大量試驗(yàn)確定,以保證試驗(yàn)的靈敏度和特異性。酶聯(lián)免疫反應(yīng)是一種敏感性很高的反應(yīng),如果血清不稀釋,不可避免會產(chǎn)生很強(qiáng)的非特異性反應(yīng),出現(xiàn)假陽性。2、試劑盒平衡:Elisa中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上。平衡時間太短會造成試劑混勻不夠,樣品孵育
小鼠五聚素3ELISA檢測試劑盒樣本處理2021/11/11
小鼠五聚素3ELISA檢測試劑盒樣本處理要注意哪些問題?檢測方法:ELISA酶聯(lián)免疫法測試種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、牛、羊、豬、雞、鴨elisa試劑盒等種屬保存條件:2~8℃,佳溫度6攝氏度,有效期6個月。產(chǎn)品庫存:現(xiàn)貨供應(yīng)產(chǎn)品性狀:48T/96T,盒裝液體品牌:上海研域生物檢測波長:450nm研究領(lǐng)域:炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、新陳代謝、信號通路、免疫學(xué)。注意要點(diǎn):僅供科研實(shí)驗(yàn),不得用于其他用途;請仔細(xì)閱讀使用說明書,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果.免費(fèi)代測,從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)
ELISA試劑盒標(biāo)本保存方法有哪些2021/11/04
ELISA試劑盒標(biāo)本保存方法有哪些呢?我們在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中標(biāo)本是非常重要的,經(jīng)常會出現(xiàn)ELISA操作員反映在標(biāo)本保存時出現(xiàn)溶血、凝集不全、受細(xì)菌污染等現(xiàn)象發(fā)生,上海研域生物特針對如何正確保存標(biāo)本問題做出總結(jié)。一、標(biāo)本保存不當(dāng)在冰箱中保存過久的標(biāo)本,血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、甚至造成假陽性;標(biāo)本放置時間過長(如一天以上),有時抗原或抗體免疫活性減弱,亦可出現(xiàn)假陰性。為克服上述干擾,ELISA測定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即
流式抗體的選擇使用及注意事項(xiàng)2021/10/28
流式抗體的選擇:1、流式抗體本身也是抗體,所以選擇流式抗體一定要滿足抗體選擇基本的條件:目標(biāo)蛋白特異性,反應(yīng)種屬以及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)。2、流式抗體熒光標(biāo)記的方式包括直接標(biāo)記和間接標(biāo)記兩種。在流式實(shí)驗(yàn)過程中,盡量減少實(shí)驗(yàn)工序和過程,以保證實(shí)驗(yàn)的真實(shí)和準(zhǔn)確性。因此在條件允許的范圍內(nèi),建議盡量用直接標(biāo)記的抗體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)而不去做間接標(biāo)記。3、流式抗體熒光標(biāo)記的選擇:如果實(shí)驗(yàn)中檢測單一指標(biāo):不同熒光標(biāo)記在不同的儀器上強(qiáng)度不同。FACSCalibur儀器為例:PE>APC>PE-Cy5>PerCP>FITC>PerC
ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想怎么辦2021/10/21
讓大部分ELISA實(shí)驗(yàn)人員頭疼的問題,就是在ELISA實(shí)驗(yàn)后結(jié)果不理想。那碰到這種情況我們應(yīng)該怎么解決呢?其實(shí)做科研實(shí)驗(yàn),就是這樣在不斷探索中尋求真理。很難有人能*的實(shí)驗(yàn)成功。在做實(shí)驗(yàn)時那些千萬不能忽視的一些小細(xì)節(jié),還有我們在做實(shí)驗(yàn)過程中能夠盡量避免一些誤區(qū)。我們來一起簡單了解下影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想的因素有哪些,然后盡量在實(shí)驗(yàn)的時候避開這些誤區(qū)。1.操作前應(yīng)對實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18c~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合
檢測植物elisa試劑盒操作步驟2021/09/24
檢測植物試劑盒操作步驟:1.編號:將樣品對應(yīng)微孔按序編號,每板應(yīng)設(shè)陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液
豬Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理及優(yōu)點(diǎn)2021/09/15
豬Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理及優(yōu)點(diǎn)豬Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:將目標(biāo)抗體包被于微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標(biāo)抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標(biāo)記和親和素,再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。豬Elisa試劑盒技術(shù)原理:特色服務(wù):提供免費(fèi)代測,技術(shù)
ELISA試劑盒特點(diǎn)2021/09/07
ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISAKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。ELISA試劑盒有以下特點(diǎn):一、高效、靈敏、特異的抗體;二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;五、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。elisa試劑盒回收率是反應(yīng)待測物在樣品分析過程中的損失的程
ELISA試劑盒的儲存日期2021/09/02
對于我們購買回來的Elisa試劑盒儲存及有效期,相信大家都是根據(jù)盒子上的日期決定它的有效期的,但是如果我們實(shí)驗(yàn)開封過的試劑盒,怎么確定它有多久的有效期呢?這點(diǎn)可能很多人不知道該如何保存。不用擔(dān)心,我司為您詳細(xì)解析關(guān)于Elisa試劑盒的儲存于有效期多久。根據(jù)我司規(guī)定未開封的試劑盒:所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請注意,收到試劑盒后請盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A、檢測溶液B以及96孔板保存于-20℃。老師們再使用后的Elisa試劑盒:剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑
ELISA實(shí)驗(yàn)條件該如何選擇2021/08/26
在ELISA實(shí)驗(yàn)中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:1.固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。2.包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一
怎么才能降低ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)誤差概率2021/08/19
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)誤差概率如何降低?在實(shí)驗(yàn)操作的過程中,我們除了需要多點(diǎn)細(xì)心之外,還有一些需要重點(diǎn)注意的地方:1:檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。2:校對使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對定量檢測尤為重要。3:仔細(xì)閱讀說明書嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。ELISA試劑盒不同批號的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方,反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn)。4:洗滌洗板不*,酶結(jié)合
ELISA操作指南——酶免疫測定2021/08/12
酶免疫測定(enzymeimmunoassay,EIA),是將酶催化作用的高效性與抗原抗體反應(yīng)的特異性相結(jié)合的一種微量分析技術(shù)。酶標(biāo)記抗原抗體后形成的酶標(biāo)記物,既保留抗原或抗體的免疫活性,又保留酶的催化活性。當(dāng)酶標(biāo)記物與待測樣品中相應(yīng)的抗原或抗體相互作用時,可形成酶標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物。利用復(fù)合物上標(biāo)記的酶催化底物顯色,其顏色深淺與待測樣品中抗原或抗體的量相關(guān)。該方法靈敏度可達(dá)到ng~pg/ml水平。常用的標(biāo)記物有辣根過氧化物酶HRP和堿性磷酸酶AP等。酶免疫測定分為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme
實(shí)驗(yàn)中常見的細(xì)胞耗材的種類和作用2021/08/05
在我們?nèi)粘?shí)驗(yàn)中經(jīng)常會用到細(xì)胞耗材,那么這些細(xì)胞耗材包含哪些呢?它們的作用又在哪里呢?本文將詳細(xì)為你講解。首先講到的是培養(yǎng)皿:培養(yǎng)皿是一種用于微生物或細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室器皿,由一個平面圓盤狀的托底和頂部一個蓋組成,一般用玻璃或塑料制成。培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類,主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動物細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚乙xi材料的,有一次性的和多次使用的,適合實(shí)驗(yàn)室接種、劃線、分離細(xì)菌的操作,可以用于植物材料的培養(yǎng)。其次是培養(yǎng)板:細(xì)胞培養(yǎng)板我們可以按照底部
ELISA酶聯(lián)試劑盒基本原理2021/08/02
ELISA酶聯(lián)試劑盒基本原理是什么呢?ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫試劑盒)基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價結(jié)合,此種結(jié)合不會改變抗體的免疫學(xué)特性,也不會影響酶的生物學(xué)活性。此種酶標(biāo)記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。滴加底物溶液后,底物可在酶作用下使其所含的供氫體由無色的還原型變成有色的氧化型,出現(xiàn)顏色反應(yīng)。因此,可通過底物的顏色反應(yīng)來判定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng),顏色反應(yīng)的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反應(yīng)可通過ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn),酶聯(lián)免疫
小鼠心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒使用注意事項(xiàng)2021/07/28
小鼠心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠心鈉肽(ANP)水平。用純化的小鼠心鈉肽(ANP)包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入小鼠心鈉肽(ANP),再與HRP標(biāo)記的白小鼠心鈉肽(ANP)結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的白介素1β呈正相關(guān)。小鼠心鈉肽(ANP)ELISA試劑盒注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方
夏日試驗(yàn)更應(yīng)依照說明書操作注意事項(xiàng)2021/07/21
夏日炎熱,因?yàn)樘鞖庠颍还苁遣僮髦?,還是保存中出錯的,都或許對小鼠ELISA試劑盒試驗(yàn)成果形成不行拯救的影響,研域(上海)提示我們更應(yīng)該依照ELISA試劑盒說明書中注意事項(xiàng)來完結(jié)試驗(yàn)。1.試驗(yàn)嚴(yán)格依照闡明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)成果判定有必要以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。2.酶標(biāo)包被板開封后如未用完,應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存。3.主張一切的規(guī)范品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小試驗(yàn)誤差。4.為避免交叉污染,規(guī)范品、樣本和空白對照每加一個就要替換一次吸頭;酶標(biāo)工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分
細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)黑點(diǎn)是什么原因?2021/07/13
近日有一位實(shí)驗(yàn)新手提出疑問:細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)黑點(diǎn)是什么情況?是不是被污染了?此問題也是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的常見問題之一,我公司技術(shù)員針對此問題解析道:一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動。如果細(xì)胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。而如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):1.細(xì)胞生長過老,破碎的細(xì)胞殘
原代細(xì)胞成為干細(xì)胞的“溫床”2021/07/07
對于這項(xiàng)新成果,研究人員表示,“深入了解讓原代細(xì)胞存活和健康的因素,就能在這些因素出問題時提出關(guān)于乳腺癌發(fā)展的新觀點(diǎn)。我們的這項(xiàng)研究指出原代細(xì)胞是原代細(xì)胞微環(huán)境的重要組成部分?!币豁?xiàng)新研究發(fā)現(xiàn),作為免疫系統(tǒng)中復(fù)雜角色之一的原代細(xì)胞具有撫育細(xì)胞的功能,研究表明原代細(xì)胞在維持原代細(xì)胞微環(huán)境方面發(fā)揮了重要的作用。原代細(xì)胞原代細(xì)胞是指具有成熟分化成幾種不同類型細(xì)胞潛能的特殊細(xì)胞。其中原代細(xì)胞有助于保持青春期和妊娠期乳房發(fā)育,這是乳腺細(xì)胞生長的兩個動態(tài)周期。干細(xì)胞有多種類型,比如用以發(fā)育成某些器官(如乳腺
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