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上海繼錦化學(xué)科技有限公司
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小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)2010/12/21
本試劑盒僅供研究使用檢測(cè)范圍:31.2ng/ml-2000ng/mlzui低檢測(cè)限:7.8ng/ml特異性:本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的小鼠PEDF,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。有效期:6個(gè)月預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中PEDF含量。說(shuō)明1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。3.中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。4.剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能
人腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒使用說(shuō)明書(shū)2010/12/21
本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中TSGF含量。實(shí)驗(yàn)原理用純化的TSGF抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的TSGF抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的TSGF呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)2
人內(nèi)皮抑素(ES)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)2010/12/21
本試劑盒僅供研究使用檢測(cè)范圍:0.78ng/ml-50ng/mlzui低檢測(cè)限:0.195ng/ml特異性:本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的人ES,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。有效期:6個(gè)月預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中ES含量。說(shuō)明1.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。2.中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。3.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。4.剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水
人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)2010/12/21
本試劑盒僅供研究使用檢測(cè)范圍:1.25ng/ml-80ng/mlzui低檢測(cè)限:0.3ng/ml特異性:本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的人HMGB-1,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。有效期:6個(gè)月預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中HMGB-1含量。說(shuō)明1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。3.中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。4.剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能
ELISA法檢測(cè)細(xì)胞間黏附分子-12010/12/19
細(xì)胞黏附分子(ICAM)是存在于細(xì)胞表面的一類(lèi)具有復(fù)雜功能的糖蛋白,介導(dǎo)細(xì)胞之間的相互黏附,參與眾多的病理生理過(guò)程。目前,研究較多的黏附分子主要有免疫球蛋白超家族、整合素家族、選擇性家族、Cadherin家族等。細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)是黏附分子免疫球蛋白超家族中的一員,由內(nèi)皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞和上皮細(xì)胞表達(dá),其配體是白細(xì)胞黏附分子CD18家族中的2個(gè)成員:即淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原—1[lymphocytefunction-associatedantigen-1,LFA-l(CDu
ELISA測(cè)定的常用模式--固相捕獲法測(cè)IgM抗體2010/12/19
在病原體急性感染的診斷中,通常需檢測(cè)IgM抗體,如急性甲型肝炎診斷的血清抗HAVIgM檢測(cè)、急性乙型肝炎病毒感染的血清抗HBclgM檢測(cè)和TORCH項(xiàng)目的系列IgM檢測(cè)等。IgM抗體也有使用間接法測(cè)定的,如目前在市場(chǎng)上可見(jiàn)到的有些TORCH系列的IgM檢測(cè)試劑盒。在使用間接法測(cè)IgM抗體時(shí),由于臨床血清樣本中含有高濃度的IgG抗體,其中部分特異IgG抗體將與IgM抗體競(jìng)爭(zhēng)與固相抗原結(jié)合,從而干擾IgM抗體的檢測(cè)。因此,在使用間接法測(cè)定IgM抗體時(shí),通常須將血清樣本用抗人IgG抗體或SPA預(yù)處理,
ELISA法檢測(cè)腫瘤壞死因子2010/12/19
腫瘤壞死因子(TNF)是由激活的單核細(xì)胞巨噬細(xì)胞受內(nèi)毒素刺激后產(chǎn)生的一種分子量為17000的蛋白質(zhì)。其中,由巨噬細(xì)胞產(chǎn)生的稱TNF-α,是巨噬細(xì)胞介導(dǎo)細(xì)胞毒效應(yīng)的細(xì)胞因子;由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的稱TNF-β。TNF在體內(nèi)具有廣泛的生物學(xué)活性:可作為免疫應(yīng)答中的一種中間介質(zhì),既有抗病效應(yīng),又有致病效應(yīng);可引起腫瘤的出血壞死;可刺激成纖維細(xì)胞增殖;可增加HLA-A、HLA-B、HLA-C抗原的表達(dá);可激活中性粒細(xì)胞及殺傷細(xì)胞;可促進(jìn)B細(xì)胞增殖及分化、增加IL-2受體表達(dá)。肝臟是TNF的主要發(fā)源地,同時(shí)也是
小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)2010/12/17
本試劑盒僅供研究使用特異性:本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的小鼠Cyclin-D3,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。有效期:6個(gè)月預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定小鼠血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中Cyclin-D3含量。說(shuō)明1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。3.中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。4.剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響
人p53上調(diào)細(xì)胞凋亡調(diào)控因子(PUMA)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒使用說(shuō)明書(shū)2010/12/17
本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!預(yù)期應(yīng)用ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中PUMA含量。實(shí)驗(yàn)原理用純化的PUMA抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的PUMA抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過(guò)*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的PUMA呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)2
人P53(P53)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)2010/12/17
本試劑盒僅供研究使用檢測(cè)范圍:0.78U/ml-50U/mlzui低檢測(cè)限:0.195U/ml特異性:本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的人P53,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。有效期:6個(gè)月預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中P53含量。說(shuō)明1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。3.中、英文說(shuō)明書(shū)可能會(huì)有不一致之處,請(qǐng)以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。4.剛開(kāi)啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)含有少許水樣
原代肝細(xì)胞分離方法2010/12/15
體外培養(yǎng)肝細(xì)胞的關(guān)鍵是如何分離得到形態(tài)完整、體外代謝活性高的肝細(xì)胞.自1953年Anderson[2]首創(chuàng)剪切法從肝臟分離肝細(xì)胞以來(lái),各實(shí)驗(yàn)室對(duì)肝細(xì)胞的分離方法進(jìn)行了不斷改進(jìn).在眾多方法中,主要分為非灌流的方法和灌流的方法.1.1采用非灌流的方法早期的研究一般通過(guò)非灌流這種簡(jiǎn)單的步驟分離肝細(xì)胞.1.1.1機(jī)械分離法:機(jī)械分離法是利用機(jī)械剪切及強(qiáng)力吹打等物理手段來(lái)分離肝細(xì)胞的方法[3].張頂etal[4]在分離樹(shù)鼩肝細(xì)胞的過(guò)程中,首先將樹(shù)鼩的肝臟剪成小塊,然后通過(guò)擠壓、剪碎和震蕩等機(jī)械手段,使肝細(xì)
標(biāo)本的收集與保存2010/12/15
臨床檢驗(yàn)常見(jiàn)的標(biāo)本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些標(biāo)本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。一、血液標(biāo)本有些生理因素,如吸煙、進(jìn)食、運(yùn)動(dòng)、情緒波動(dòng)、妊娠、體位等均可影響血液中某些成分的變化,有些甚至還有晝夜變化。因此血液標(biāo)本的采集應(yīng)盡量避免生理因素干擾,以條件一致為宜,如無(wú)法避免,應(yīng)在標(biāo)本上注明該因素。1.外周血一般選取左手無(wú)名指內(nèi)側(cè)采血,該部位應(yīng)無(wú)凍瘡,炎癥,水腫,破損。如該部位不符合要求,以其他手指部位代替。對(duì)燒傷病人,可選擇皮膚完整
ELISA實(shí)驗(yàn)質(zhì)量控制2010/12/15
從1949年美國(guó)CollegeofAmericanPathologists(簡(jiǎn)稱CAP)首先開(kāi)始研究臨床實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制(簡(jiǎn)稱質(zhì)控)問(wèn)題,美國(guó)學(xué)者Levery和Jenning于1950年發(fā)表*篇關(guān)于使用質(zhì)控圖的實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)控,臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的室內(nèi)質(zhì)控工作正式拉序幕。到70年代,實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制進(jìn)入一個(gè)新的階段--全面質(zhì)量管理,推行GoodLaboratoryParctice(簡(jiǎn)稱GLP)。進(jìn)入80年代末期,GLP的統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)生了,發(fā)展到"認(rèn)證實(shí)驗(yàn)室"管理階段。全面質(zhì)量管理的宗旨在于預(yù)防差錯(cuò)的產(chǎn)生
酶切體系的建立2010/12/15
酶切體系的建立一、建立一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的酶切反應(yīng)目前大多數(shù)研究者遵循一條規(guī)則,即10個(gè)單位的內(nèi)切酶可以切割1μg不同來(lái)源和純度的DNA。通常,一個(gè)50μl的反應(yīng)體系中,1μl的酶在1XNEBuffer終濃度及相應(yīng)溫度條件下反應(yīng)1小時(shí)即可降解1μg已純化好的DNA。如果加入更多的酶,則可相應(yīng)縮短反應(yīng)時(shí)間;如果減少酶的用量,對(duì)許多酶來(lái)說(shuō),相應(yīng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(不超過(guò)16小時(shí))也可*反應(yīng)。二、選擇正確的酶不言而喻,選擇的酶在底物DNA上必須至少有一個(gè)相應(yīng)的識(shí)別位點(diǎn)。識(shí)別堿基數(shù)目少的酶比堿基數(shù)目多的酶更頻繁地切割底
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)2010/12/15
半連續(xù)式培養(yǎng)1.半連續(xù)式培養(yǎng)又稱為重復(fù)分批式培養(yǎng)或換液培養(yǎng)。采用機(jī)械攪拌式生物反應(yīng)器系統(tǒng),懸浮培養(yǎng)形式。在細(xì)胞增長(zhǎng)和產(chǎn)物形成過(guò)程中,每間隔一段時(shí)間,從中取出部分培養(yǎng)物,再用新的培養(yǎng)液補(bǔ)足到原有體積,使反應(yīng)器內(nèi)的總體積不變。這種類(lèi)型的操作是將細(xì)胞接種一定體積的培養(yǎng)基,讓其生長(zhǎng)至一定的密度,在細(xì)胞生長(zhǎng)至zui大密度之前,用新鮮的培養(yǎng)基稀釋培養(yǎng)物,每次稀釋反應(yīng)器培養(yǎng)體積的1/2~3/4,以維持細(xì)胞的指數(shù)生長(zhǎng)狀態(tài),隨著稀釋率的增加培養(yǎng)體積逐步增加。或者在細(xì)胞增長(zhǎng)和產(chǎn)物形成過(guò)程中,每隔一定時(shí)間,定期取出部
影響ElISA實(shí)驗(yàn)效果常見(jiàn)問(wèn)題原因分析及解決辦法2010/12/14
ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。?操作步驟可能原因解決辦法選擇試劑選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣1.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;2.手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));3.加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。1.標(biāo)本為血清:將血液先自然存放12小時(shí)后,再用3000
常用試劑的性質(zhì)與制備(一)2010/12/14
常用試劑的性質(zhì)與制備純化有機(jī)化學(xué)實(shí)驗(yàn)經(jīng)常用到大量的試劑,包括無(wú)機(jī)試劑和有機(jī)試劑,市售的試劑有分析純(A.R)、化學(xué)純(C.P)、工業(yè)級(jí)(T.P)等級(jí)別,其中分析純的純度較高,工業(yè)級(jí)則帶有較多的雜質(zhì)。在某些有機(jī)反應(yīng)中,對(duì)試劑或溶劑的要求較高,即使微量的雜質(zhì)或水分的存在,也會(huì)對(duì)反應(yīng)的速率、產(chǎn)率和產(chǎn)品純度帶來(lái)一定的影響,因此掌握一些必要的試劑的純化方法是十分必要的。在實(shí)際工作中還會(huì)經(jīng)常遇到無(wú)法買(mǎi)到某種試劑或買(mǎi)不到高純度試劑的情況,影響實(shí)驗(yàn)工作正常進(jìn)行,因此,了解一些常用試劑的制備方法也是十分必要的。在
蛋白質(zhì)的定量測(cè)定實(shí)驗(yàn)2010/12/13
蛋白質(zhì)定量是生物化學(xué)、食品檢驗(yàn)和其它生命學(xué)科zui常涉及的分析內(nèi)容,是臨床診斷的重要指標(biāo),也是許多生物制品、藥物、食品質(zhì)量檢測(cè)的重要指標(biāo)。生化實(shí)驗(yàn)中,在對(duì)生化藥品,特別是蛋白質(zhì)、酶、某些多肽或蛋白質(zhì)激素的分離純化時(shí),對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行準(zhǔn)確可靠的定量分析是非常重要的。然而蛋白質(zhì)的種類(lèi)很多,結(jié)構(gòu)不均一,分子量又相差很大,功能各異,這給建立一個(gè)理想而又通用的蛋白質(zhì)定量分析的方法帶來(lái)了很大的困難。目前測(cè)定蛋白質(zhì)含量的方法有很多種,不同的方法各有其特點(diǎn)。紫外分光光度法是根據(jù)蛋白質(zhì)的物理性質(zhì)來(lái)對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行定量的;
Tris緩沖液不同溫度與pH的關(guān)系2010/12/10
Tris緩沖液不同溫度與pH的關(guān)系(pHvsTemperatureforTrisBuffer)Tris緩沖液的pH值(0.05M)5°C25°C37°C7.767.206.917.897.307.027.977.407.128.077.507.228.187.607.308.267.707.408.377.807.528.487.907.628.588.007.718.688.107.808.788.207.918.888.308.018.988.408.109.098.508.229.188.
幾種常用溶液的配制方法2010/12/10
1、PBS:取PBS溶于1000ml的蒸餾水中,混勻,測(cè)pH值應(yīng)在7.2~7.4之間,若偏離此范圍,請(qǐng)用0.1N的HCL或NaOH調(diào)整。2、TBS:2.1Tris緩沖液配方:(0.5MpH7.6)Tris(三羥甲基氨基甲烷)60.57g1NHCL約420ml雙蒸水加至1000mlTris緩沖液配制方法:先以少量雙蒸水(300~500ml)溶解Tris,加入HCl后,用HCl(1N)或NaOH(1N)將pH調(diào)至7.6,zui后雙蒸水加至1000ml。此液為儲(chǔ)備液,4℃冰箱中保存。2.2TBS配方:
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