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上海聯(lián)碩生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第17年
瓊脂糖凝膠的作用2022/12/23
瓊脂糖凝膠是以瓊脂糖為支持介質(zhì)制備的凝膠。瓊脂糖分為一般瓊脂糖和經(jīng)化學(xué)修飾后熔點(diǎn)降低的低熔點(diǎn)瓊脂糖,瓊脂糖的熔點(diǎn)在62?65°C之間,融化后在37°C下可維持液態(tài)數(shù)小時(shí),30°C時(shí)凝固成膠。多用于對(duì)染色體DNA在凝膠內(nèi)進(jìn)行原位酶切及DNA片段回收。瓊脂糖凝膠由于孔徑大常用于大分子蛋白質(zhì)、DNA的分離?;窘Y(jié)構(gòu)瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級(jí)鏈如氫鍵來維持網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的疏密依靠瓊脂糖的濃度。一般情況下,它的結(jié)構(gòu)是穩(wěn)定的,可以在許多條件下使用(如水,pH4-9范圍內(nèi)的鹽溶液)。瓊脂糖凝膠在40℃
妥曲珠利的藥理2022/12/21
(1)藥效學(xué)妥曲珠利屬三嗪酮化合物,具有廣譜抗球蟲活性。廣泛用于雞球蟲病。妥曲珠利對(duì)球蟲的作用部位十分廣泛,對(duì)球蟲的兩個(gè)無性周期均有作用,如抑制裂殖體,小配子體的核分裂和小配子體的壁形成體。由于本品干擾球蟲細(xì)胞核分裂和線粒體,影響蟲體的呼吸和代謝功能,加之又能使細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膨大,發(fā)生嚴(yán)重空胞化,因而具有殺球蟲作用。(2)藥動(dòng)學(xué)家禽內(nèi)服妥曲珠利,約有50%以上藥物吸收,吸收后藥物主要匯集于肝臟、腎臟,但迅速被代謝成砜類化合物。藥物在雛雞體內(nèi)的半衰期約為2天。但最近有資料證實(shí),妥曲珠利在仔雞可食用組織
硝酸纖維素膜NC膜的選擇2022/12/20
um指的是膜孔徑,而從上面膜的生產(chǎn)過程,我們可以看出,膜的孔徑實(shí)際上是沒有辦法界定的.由于干燥成型等過程的非絕對(duì)均一,膜的孔徑也是非均一的.膜孔徑的說法實(shí)際上是沿用了一直以來的一個(gè)形象稱呼.而以秒為單位的定義為,每4cm膜,水的層析時(shí)間是***s.該單位已經(jīng)越來越被各大廠商所接受,成為了一個(gè)通用的比較標(biāo)準(zhǔn).以下我們將采用s單位來進(jìn)行交流.換算情況大致為:8um=135s;6um=180s.不同秒數(shù)的膜對(duì)反應(yīng)有什么影響呢?首先,我們分析一下液體在膜上的運(yùn)動(dòng)過程.一張長度為4cm的膜,每隔1cm做一
實(shí)驗(yàn)室常用的細(xì)胞耗材及其用途2022/12/19
細(xì)胞耗材是細(xì)胞培養(yǎng)過程中的實(shí)驗(yàn)工具,經(jīng)常用到的耗材包括培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿和培養(yǎng)板三種,那么他們各自都有什么用途呢?1、培養(yǎng)皿:培養(yǎng)皿是一種用于微生物或細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室器皿,由一個(gè)平面圓盤狀的底和一個(gè)蓋組成,一般用玻璃或塑料制成。培養(yǎng)皿材質(zhì)基本上分為兩類,主要為塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞的貼壁培養(yǎng)也可能用到。塑料的可能是聚yixi材料的,有一次性的和多次使用的,適合實(shí)驗(yàn)室接種、劃線、分離細(xì)菌的操作,可以用于植物材料的培養(yǎng)。2、培養(yǎng)板:細(xì)胞培養(yǎng)板根據(jù)底部形狀的不同可分為平
實(shí)驗(yàn)室的中針式過濾器的使用方法2022/12/16
針式過濾器是在實(shí)驗(yàn)室中HPLC及IC分析時(shí)進(jìn)行樣品前處理的重要耗材,可以過濾樣本溶液,去顆粒污染物,保護(hù)儀器。作為實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用的方便可靠的過濾工具,針式過濾器有利于實(shí)驗(yàn)操作步驟的簡(jiǎn)化,可以大幅提高工作效率。掌握針式過濾器的使用方法核注意事項(xiàng)十分重要。針式過濾器有不同的膜材質(zhì),不同材質(zhì)的膜應(yīng)用不同,應(yīng)該根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選取適合樣本過濾的膜,將針式過濾器連接到注射器上,要輕輕擰緊以保證密封良好,針式過濾器分滅菌和非無菌兩種類型,滅菌型針式過濾器使用前需進(jìn)行預(yù)處理,過濾器安裝完成后用清水對(duì)過濾系統(tǒng)進(jìn)行沖
考馬斯亮蘭的測(cè)定含量2022/12/15
簡(jiǎn)介該方法用于大多數(shù)蛋白質(zhì)的定量是比較精確的,但不適用于小分子堿性多肽的定量。如核糖核酸酶或溶菌酶。去污劑的濃度超過0.2%影響測(cè)定結(jié)果,如TritonX-100、SDS、NP-40等。常用于細(xì)胞骨架的檢驗(yàn)。濃染液將100mg考馬斯亮藍(lán)G-250溶于50mL95%乙醇,加入100mL85%的磷酸,然后,用蒸餾水補(bǔ)充至1000mL,此染液放4℃至少6個(gè)月保持穩(wěn)定。樣本準(zhǔn)備盡量使用與待測(cè)樣本性質(zhì)相近的蛋白質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)品,例如測(cè)定抗體,可用純化的抗體作為標(biāo)準(zhǔn)。如果待測(cè)樣本是未知的,也可用抗體作為標(biāo)準(zhǔn)蛋白
原位雜交技術(shù)服務(wù)分類2022/12/14
基因組原位雜/交技術(shù)基因組原位雜/交(Genomeinsituhybridization,GISH)技術(shù)是20世紀(jì)80年代末發(fā)展起來的一種原位雜/交技術(shù)。它主要是利用物種之間DNA同源性的差異,用另一物種的基因組DNA以適當(dāng)?shù)臐舛茸鞣庾?,在靶染色體上進(jìn)行原位雜/交。GISH技術(shù)剛開始應(yīng)用于動(dòng)物方面的研究(Pinkeletal.,1986),在植物上剛開始應(yīng)用于小麥雜/zhong和栽培種的鑒定(余舜武等2001;王文奎等2000)。熒光原位雜/交技術(shù)熒光原位雜/交(Fluorescenceinsi
超氧化物岐化酶是什么2022/12/13
超氧化物歧化酶(SuperoxideDismutase,SOD)是生物體內(nèi)存在的一種抗氧化金屬酶,它能夠催化超氧陰離子自由基歧化生成氧和過氧化氫,在機(jī)體氧化與抗氧化平衡中起到至關(guān)重要的作用,與很多疾病的發(fā)生、發(fā)展密不可分。分類按照SOD中金屬輔基的不同,大致可將SOD分為三大類,分別為Cu/Zn-SOD、Mn-SOD、Fe-SOD。①Cu/Zn-SOD:呈藍(lán)綠色,主要存在于真核細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)內(nèi),被認(rèn)為存在于比較原始的生物類群中且分布最/廣的一種。②Mn-SOD:呈粉紅色,主要存在于原核生物和真核生
什么是預(yù)染蛋白marker2022/12/12
ELISA試劑盒蛋白marker可分為未預(yù)染的Marker即寬分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)、高分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)以及低分子量蛋白標(biāo)準(zhǔn)以及預(yù)染的Marker即單色預(yù)染和多色預(yù)染。那么,什么是預(yù)染蛋白marker?預(yù)染蛋白marker為一些純化好的蛋白的混合物.這些蛋白混合物與一種藍(lán)色染料共價(jià)偶聯(lián).可在凝膠電泳時(shí)出現(xiàn)強(qiáng)度均勻的8條帶.同未預(yù)染的蛋白marker相比,預(yù)染蛋白marker因與染料共價(jià)偶聯(lián)而在SDS-PAGE電泳時(shí)的遷移特性發(fā)生某些改變。預(yù)染蛋白分子量標(biāo)準(zhǔn)預(yù)染蛋白分子量是一些純化好的蛋白混合物,通過與染料
蛋白酶K的應(yīng)用2022/12/09
蛋白酶K已廣泛應(yīng)用在皮革、毛皮、絲綢、醫(yī)藥、食品、釀造等方面。皮革工業(yè)的脫毛和軟化已大量利用蛋白酶,既節(jié)省時(shí)間,又改善勞動(dòng)衛(wèi)生條件。蛋白酶還可用于蠶絲脫膠、肉類嫩化、酒類澄清。臨床上可作藥用,如用胃蛋白酶治療消化不良,用酸性蛋白酶治療支氣管炎,用彈性蛋白酶治療脈管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶對(duì)外科化膿性創(chuàng)口的凈化及胸腔間漿膜粘連的治療。加酶洗衣粉是洗滌劑中的新產(chǎn)品,含堿性蛋白酶,能去除衣物上的血/漬和蛋白污物,但使用時(shí)注意不要接觸皮膚,以免損傷皮膚表面的蛋白質(zhì),引起皮疹、濕疹等過敏現(xiàn)象。值得注
轉(zhuǎn)化生長因子TGF-beta Superfamily2022/12/08
轉(zhuǎn)化生長因子β(TGF-beta)超家族是最大的分泌性生長因子家族,它由幾個(gè)亞家族組成,包括TGF-βs、骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMPs)、生長和分化因子(GDFs)、激活素、抑制素和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞衍生的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNFs)。TGF-β信號(hào)傳導(dǎo)是通過配體結(jié)合由I型和II型跨膜絲氨酸/蘇氨酸激酶受體組成的異聚體復(fù)合物而啟動(dòng)的。配體結(jié)合后,II型受體將I型受體轉(zhuǎn)磷酸化。I型受體激酶隨后磷酸化受體調(diào)節(jié)的Smads(R-Smads),然后與co-Smad、Smad4結(jié)合,并轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核并激活靶基因的轉(zhuǎn)錄。
瓊脂糖的電泳技術(shù)2022/12/07
特點(diǎn)天然瓊脂(agar)是一種多聚糖,主要由瓊脂糖(agarose,約占80%)及瓊脂膠(agaropectin)組成。瓊脂糖是由半乳糖及其衍生物構(gòu)成的中性物質(zhì),不帶電荷,而瓊脂膠是一種含硫酸根和羧基的強(qiáng)酸性多糖,由于這些基團(tuán)帶有電荷,在電場(chǎng)作用下能產(chǎn)生較強(qiáng)的電滲現(xiàn)象,加之硫酸根可與某些蛋白質(zhì)作用而影響電泳速度及分離效果。因此,多用瓊脂糖為電泳支持物進(jìn)行平板電泳,其優(yōu)點(diǎn)如下。(1)瓊脂糖凝膠電泳操作簡(jiǎn)單,電泳速度快,樣品不需事先處理就可以進(jìn)行電泳。(2)瓊脂糖凝膠結(jié)構(gòu)均勻,含水量大(約占98%~
6-芐氨基嘌呤的生理作用2022/12/06
用途機(jī)理用途:6-BA是第一個(gè)人工合成的細(xì)胞分裂素。6-BA具有抑制植物葉內(nèi)葉綠素、核酸、蛋白質(zhì)的分解。目前6BA在柑橘保花保果和促進(jìn)花芽分化上大量應(yīng)用,比如6BA是個(gè)高效能植物生長調(diào)節(jié)劑,在促進(jìn)發(fā)芽、促進(jìn)花芽分化、提高坐果率、促進(jìn)果實(shí)生長、提高果品品質(zhì)等多方面表現(xiàn)良好。機(jī)理:屬廣譜性植物生長調(diào)節(jié)劑,可促進(jìn)植物細(xì)胞生長,抑制植物葉綠素的降解,提高氨基酸的含量,延緩葉片衰老等,可用于發(fā)綠豆芽和黃豆芽,最大使用量為0.01g/kg,殘留量小于0.2mg/kg。誘導(dǎo)芽的分化,促進(jìn)側(cè)芽生長,促進(jìn)細(xì)胞分裂
腫瘤壞死因子有什么臨床應(yīng)用2022/12/05
應(yīng)用TNF在治療腫瘤等方面開始臨床Ⅱ期試驗(yàn),也可與IL-2聯(lián)人事治療腫瘤,目前認(rèn)為全身用藥的療效不及局部用藥,后者如病灶內(nèi)注射,局部濃度高且副作用也較輕。近年來已采用TNF基因治療開始對(duì)黑素瘤等腫瘤進(jìn)行臨床驗(yàn)證。值得重視的TNF又與臨床某些疾病的發(fā)生有關(guān)。(1)感染性休克:目前認(rèn)為革蘭氏陰性桿菌或腦膜炎球菌引起的彌漫性血管內(nèi)凝血、中毒性休克是由于細(xì)菌內(nèi)毒素刺激機(jī)體產(chǎn)生過量TNF-α,引起發(fā)熱,心臟、腎上腺嚴(yán)重?fù)p害,呼吸循環(huán)衰竭,甚至引起死亡,其TNF水平與病死率正相關(guān)。其發(fā)病機(jī)理可能是TNF刺激
二甲基亞砜用途與作用2022/12/02
二甲基亞砜,英文名稱DMSO。無色粘稠液體。有吸濕性。能與水、乙醇、丙酮、乙醛、吡啶、乙酸乙酯、苯二甲酸二丁酯、二惡烷和芳烴化合物等任意互溶,不溶于乙炔以外的脂肪烴類化合物。二甲基亞砜用途廣泛,可用作溶液和反應(yīng)試劑。DMSO在有機(jī)合成,醫(yī)藥、電子等方面均有應(yīng)用。二甲基亞砜特別用于無水化學(xué)合成反應(yīng)及醫(yī)藥中間體合成反應(yīng)溶劑。使用該溶劑能提高反應(yīng)速度,反應(yīng)收率,縮短反應(yīng)時(shí)間。二甲基亞砜是有機(jī)溶媒,溶解范圍廣,并具有一定的消炎止癢作用,在實(shí)驗(yàn)室中作為溶媒被廣泛使用。也廣泛用作滲透性冷凍保護(hù)劑。在生物方面
Western blotting實(shí)驗(yàn)完整流程-從蛋白提取到出結(jié)果2022/12/01
1.提蛋白(不同細(xì)胞類型的蛋白或細(xì)胞不同部位的蛋白提取方法或有不同,需要提前查找資料)我用的是凱基生物公司的全蛋白提取試劑盒一般是取100mg標(biāo)本+1mllysisbuffer+10ul磷酸酶抑制劑+10ulPMSF+1ul蛋白酶抑制劑放入研磨器研磨,直至研磨成勻漿(注意冰上操作,有的試劑盒說明在研磨時(shí)加液氮),倒入EP管,放入離心機(jī)離心,12,000g/5min,取上清。另一種提蛋白試劑,用RIPAbuffer(Gibco)+1%cOmplete™,EDTA-freeProteaseInhib
透析袋的用處有多大?2022/11/30
透析袋是用半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi),而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外,直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液”,袋(膜)外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。新透析袋可用沸水煮五至十分鐘,再用蒸餾水洗凈,即可使用。透析膜可用動(dòng)物膜和玻璃紙等,但用的多的還是用纖維素制成的透析膜,截留分子量MWCO(即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的小分子量)。截留分子量越大也就是說透過性
DMEM培養(yǎng)基的高糖與低糖有哪些區(qū)別?2022/11/29
DMEM培養(yǎng)基由MEM培養(yǎng)基改良而來,是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞優(yōu)先選擇的一款培養(yǎng)基。根據(jù)葡萄糖含量的高低,DMEM培養(yǎng)基一般可以區(qū)分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)兩種。其中,高糖型DMEM培養(yǎng)基有利于細(xì)胞停泊于一個(gè)位置生長,適于生長較快、附著較困難的腫瘤細(xì)胞等。而做單抗細(xì)胞融合時(shí),則一般會(huì)選用使用低糖型DMEM培養(yǎng)基。高糖型DMEM使細(xì)胞生長過快,反而不利于融合細(xì)胞的染色體穩(wěn)定。DMEM培養(yǎng)基的高糖與低糖有哪些區(qū)別?1、用途不同:低糖DMEM用于養(yǎng)干細(xì)胞可防分化,高糖DM
濾膜中的有機(jī)系和水系區(qū)別在哪里?2022/11/28
再生纖維素膜(RegeneratedCelluloseMembranes,RC)為疏水型濾膜,具有非特異性吸附低,特別適合于除微粒過濾,其化學(xué)兼容性強(qiáng),可以耐受大多數(shù)有機(jī)溶劑,其化學(xué)兼容性如下表所示。直徑50mm和47mm,孔徑0.45μm作為標(biāo)準(zhǔn)用于溶劑的超凈和脫氣過濾以及HPLC流動(dòng)相的過濾。主要用于有機(jī)溶劑的過濾。醋酸纖維素膜(CelluloseAcetateMembranes,CA)具有很高的流速和熱穩(wěn)定性以及非常低的吸附。0.2μm的濾膜非常適合于水溶液、緩沖液、血清和培養(yǎng)基的除菌過濾
胎牛血清的生產(chǎn)工藝流程有哪些2022/11/25
胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時(shí),將胎牛取出并進(jìn)行心臟穿刺取血。穿刺取血可較大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈采血。和新生牛血清相比,胎牛血清顯然產(chǎn)量低,成本高。胎牛血清應(yīng)用在哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中;因此,胎牛血清應(yīng)用很廣泛。比如,胎牛血清能夠用在科研、工業(yè)生產(chǎn)、人獸疫苗生產(chǎn)的質(zhì)量控制及生物技術(shù)藥物的質(zhì)量控制領(lǐng)域。真正胎牛血清的生產(chǎn)工藝流程有哪些呢?胎牛血清主要步驟:1.固定和麻醉胎牛原血清采集的關(guān)鍵技術(shù)主要是懷孕母牛的剖腹產(chǎn)和太牛的全封閉無菌心臟穿刺采血,對(duì)懷孕8
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