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上海聯(lián)碩生物科技有限公司
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離心管的使用方法與注意事項2022/06/09
定義:管狀試樣容器,可帶密封蓋或壓蓋。離心管的使用方法:1.因刻度離心管是量入式量器,使用前必須清洗干凈并作干燥處理。2.讀數(shù)時,一定要正確觀察彎液面,否則將引進一定的誤差。3.使用時,離心管的數(shù)量要根據(jù)離心機的型號決定,如用雙只套管的離心機做單只試驗,必須在另一只離心管中裝入同體積的液體,以保持平衡。4.離心管與離心機套管應(yīng)相配合。管子不宜太長,否則轉(zhuǎn)動時易發(fā)生破碎。但也不易太短,太短的管子在空中轉(zhuǎn)動時不穩(wěn)定,并易引起破碎。太粗套不進,太細轉(zhuǎn)動時不穩(wěn),圓口應(yīng)大于套管內(nèi)徑為準。5.離心管套入離心
PBS緩沖液的制備和作用2022/06/08
定義:管狀試樣容器,可帶密封蓋或壓蓋。離心管的使用方法:1.因刻度離心管是量入式量器,使用前必須清洗干凈并作干燥處理。2.讀數(shù)時,一定要正確觀察彎液面,否則將引進一定的誤差。3.使用時,離心管的數(shù)量要根據(jù)離心機的型號決定,如用雙只套管的離心機做單只試驗,必須在另一只離心管中裝入同體積的液體,以保持平衡。4.離心管與離心機套管應(yīng)相配合。管子不宜太長,否則轉(zhuǎn)動時易發(fā)生破碎。但也不易太短,太短的管子在空中轉(zhuǎn)動時不穩(wěn)定,并易引起破碎。太粗套不進,太細轉(zhuǎn)動時不穩(wěn),圓口應(yīng)大于套管內(nèi)徑為準。5.離心管套入離心
胰蛋白酶的作用有哪些2022/06/06
胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)為蛋白酶的一種,EC3.4.4.4,是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中,作為消化酶而起作用。在胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原被合成后,作為胰液的成分而分泌,受腸激酶,或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶,是肽鏈內(nèi)切酶,它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷。它不僅起消化酶的作用,而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體,起活化作用。是特異性*的蛋白酶,在決定蛋白質(zhì)的氨基酸排列中,它成為*的工具。胰蛋
蛋白酶k的定義,應(yīng)用以及保存方法2022/06/02
蛋白酶K是一種從白色念珠菌分離出來的強力蛋白溶解酶,具有很高的比活性,是DNA提取的關(guān)鍵試劑。該酶在較廣的pH范圍(4?12.5)內(nèi)及高溫(50?70°C)均有活性,用于質(zhì)?;蚧蚪MDNA、RNA的分離。在DNA提取中,主要作用是酶解與核酸結(jié)合的組蛋白,使DNA游離在溶液中,隨后用不同方法進行抽提,除去雜質(zhì),收集DNA。EDTA等螯合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活。蛋白酶K的應(yīng)用:蛋白酶K已廣泛應(yīng)用在皮革、毛皮、絲綢、醫(yī)藥、食品、釀造等方面。皮革工業(yè)的脫毛和軟化已大量利用蛋白酶,既節(jié)省時間,又
Trizol提取RNA的詳細步驟2022/06/01
1、在提取組織RNA時,每50~100mg組織用1mlTrizol試劑對組織進行裂解;提取細胞RNA時,先離心沉淀細胞,每5-10╳106個細胞加1mlTrizol后,反復(fù)用槍吹打或劇烈振蕩以裂解細胞。2、將組織或細胞的Trizol裂解液轉(zhuǎn)入EP管中,在室溫15~30C下放置5分鐘;在EP管中,按照每1mlTRIZOL加0.2ml氯/仿的量加入氯/仿,蓋上EP管蓋子,在手中用力震蕩15秒,在室溫下(15℃~30℃)放置2~3分鐘后,12000g(2℃~8℃)離心15分鐘。3、取上層水相置于新EP
細胞培養(yǎng)瓶的樣式及分類 .2022/05/31
細胞培養(yǎng)瓶,顧名思義就是用來培養(yǎng)細胞的。根據(jù)材質(zhì)可以分為玻璃的和塑料的,底部形狀有正方形、長方形、三角形等,根據(jù)瓶子容積有5至500ml供選擇。另外,表面經(jīng)過特殊改性處理后,可以讓細胞更好的進行貼壁培養(yǎng),這樣根據(jù)細胞貼壁面積又可以分為25~175cm2多種。國產(chǎn)的細胞培養(yǎng)瓶一般蓋子都是封閉的,不帶內(nèi)墊,常用于密閉培養(yǎng),可保證其密閉性;進口的培養(yǎng)瓶的蓋子樣式比較多:密閉蓋、聚酯蓋、透氣蓋、隔墊蓋等。密閉蓋的性能和國產(chǎn)的是相同的,聚酯蓋常用于開放培養(yǎng),只需輕輕旋松瓶蓋便可保證瓶內(nèi)氣體與環(huán)境中氣體的交
丙三醇的性質(zhì)和貯存方法2022/05/30
丙三醇,又名甘油,化學(xué)式為C3H8O3,無色、無臭、味甜,外觀呈澄明黏稠液態(tài),是一種有機物,能從空氣中吸收潮氣,也能吸收硫化q、氰化q和二氧化l。難溶于苯、l仿、四氯化d、二硫化d、石油m和油類,是甘油三酯分子的骨架成分。性質(zhì)與穩(wěn)定性1.無色、透明、無臭、粘稠液體,味甜,具有吸濕性。與水和醇類、胺類、酚類以任何比例混溶,水溶液為中性。溶于11倍的乙酸乙酯。不溶于苯、lv仿、四氯化d、二硫化d、石油m、油類、長鏈脂肪醇。可燃,遇二氧化鉻、氯s鉀等強氧化劑能引起燃燒和爆炸。也是許多無機鹽類和氣體的良
什么是細胞松弛素B?2022/05/27
一、概述:細胞松弛素BC29H37NO5是從真菌類Helminthosporiumde-mariodeum中分離得到的代謝產(chǎn)物。是以希臘語的cytos(細胞)和chalasis(松弛)組合而命名的。在許多動植物細胞的細胞運動中,特別是可逆地抑制同微絲系有關(guān)的現(xiàn)象。例如在0.5—1.0微克/毫升濃度下作用24小時,會使鼠的培養(yǎng)纖維芽細胞只進行核分裂,而細胞質(zhì)的分裂受到抑制,從而成為多核細胞。5微克/毫升可阻止蛙的受精卵的卵裂溝的形成,致使不能進行正常的卵裂,也抑制淋巴球、海膽卵、肺上皮細胞等的細胞
聚乳酸的特性和優(yōu)點2022/05/26
單個的乳酸分子中有一個羥基和一個羧基,多個乳酸分子在一起,-OH與別的分子的-COOH脫水縮合,-COOH與別的分子的-OH脫水縮合,就這樣,它們手拉手形成了聚合物,叫做聚乳酸。聚乳酸也稱為聚丙交酯,屬于聚酯家族。聚乳酸的特性:聚乳酸(H-[OCHCH3CO]n-OH)的熱穩(wěn)定性好,加工溫度170~230℃,有好的抗溶劑性,可用多種方式進行加工。由聚乳酸制成的產(chǎn)品除能生物降解外,生物相容性、光澤度、透明性、手感和耐熱性好。聚乳酸(PLA)還具有一定的耐菌性、阻燃性和抗紫外性。聚乳酸的優(yōu)點:⑴聚乳
脫落酸的特性與應(yīng)用2022/05/25
脫落酸是一種具有倍半萜結(jié)構(gòu)的植物激素。1963年美國艾迪科特等從棉鈴中提純了一種物質(zhì)能顯著促進棉苗外植體葉柄脫落,稱為脫落素II。英國韋爾林等也從短日照條件下的槭樹葉片提純一種物質(zhì),能控制落葉樹木的休眠,稱為休眠素。1965年證實,脫落素II和休眠素為同一種物質(zhì),統(tǒng)一命名為脫落酸。脫落酸的特性:1.植物的生長平衡因子脫落酸又叫S-誘抗素。具有促進植物平衡吸收水、肥和協(xié)調(diào)體內(nèi)代謝的能力??捎行д{(diào)控植物的根/冠和營養(yǎng)生長與生殖生長,對提高農(nóng)作物的品質(zhì)、產(chǎn)量具有重要作用。2.植物的抗逆誘導(dǎo)因子S-誘抗
消泡劑的物理性質(zhì)是什么?有哪些用途?2022/05/24
消泡劑,也稱消沫劑,是在食品加工過程中降低表面張力,抑制泡沫產(chǎn)生或消除已產(chǎn)生泡沫的食品添加劑。我國許可使用的消泡劑有乳化硅油、高碳醇脂肪酸酯復(fù)合物、聚氧丙烯甘油醚、聚二甲基硅氧烷等。消泡劑的物理性質(zhì):1、消泡快,抑泡性能好。2、不影響起泡體系的基本性質(zhì)。3、擴散性、滲透性好。4、化學(xué)性穩(wěn)定。5、無生理活性,無腐蝕、無毒、無不良副作用、不燃、不爆,安全性高。消泡劑的用途:1、硅油消泡劑在石油行業(yè)用得十分廣泛,已成為生產(chǎn)過程中*的一個重要助劑。由于鉆井液中大量使用強起泡性便面活性劑,不僅抽提原油離不
殼寡糖的應(yīng)用領(lǐng)域有哪些2022/05/23
殼寡糖又叫殼聚寡糖、低聚殼聚糖,是將殼聚糖經(jīng)特殊的生物酶技術(shù)降解得到的一種聚合度在2~20之間寡糖產(chǎn)品,分子量≤3200Da,是水溶性較好、功能作用大、生物活性高的低分子量產(chǎn)品。它具有殼聚糖所沒有的較高溶解度,全溶于水,容易被生物體吸收利用等諸多*的功能,其作用為殼聚糖的14倍。殼寡糖的應(yīng)用領(lǐng)域:1.醫(yī)藥領(lǐng)域使傷口免受細菌的感染,而且還可以滲透空氣和水分,促進傷口愈合。被生物體內(nèi)的溶菌酶降解生成天然的代謝物,具有無毒、能被生物體*吸收的特點,因此用它作藥物緩釋劑具有較大的*性。2.食品領(lǐng)域乳品:
先鋒霉素的類型和作用2022/05/18
先鋒霉素的類型和作用:先鋒霉素(頭孢菌素)類抗生素是臨床上常用的抗菌藥物,按發(fā)現(xiàn)年代以及抗菌性質(zhì)可分為一、二、三、四代。1962~1970年發(fā)現(xiàn)生產(chǎn)的為第一代,如頭孢噻吩(先鋒霉素1號)、頭孢噻啶(先鋒霉素2號)、頭孢氨芐(先鋒霉素4號)。頭孢脞啉(先鋒霉素5號)、頭孢拉啶(先鋒霉素6號)。1970~1976年生產(chǎn)的為第二代,如頭孢盂多、頭孢替定、頭孢呋新等。1976~1983年發(fā)現(xiàn)生產(chǎn)的為第三代,如頭孢隆胎、頭孢哌酮(先鋒必),頭孢三嗪(菌必治),頭孢他啶(復(fù)達欣)等。第四代是80年代中期開發(fā)
辣椒堿的用途有哪些2022/05/16
椒堿又稱辣椒辣素,是一種有機化合物,分子式為C18H27NO3。在自然界它存在于茄科植物辣椒(Capsicumannuum)及其變種,從石油/醚中析出者為單斜晶,矩形片狀物。最大紫外線吸收在227nm,281nm(ε7000;2500)。是一種極度辛辣的香草酰胺類生物堿。辣椒堿為白色結(jié)晶粉末,是辣椒屬植物紅辣椒的活性成分。急性毒性:腹腔-大鼠LD50:9.5毫克/公斤;口服-小鼠LC50:47.2毫克/公斤。用途:1、辣椒燃燒脂肪的奧秘是什么?關(guān)鍵在于——辣椒堿,只須吃上一兩勺,它的刺激口味即刻
緩沖溶液作用原理、pH值和應(yīng)用2022/05/13
緩沖溶液(BufferSolution)是一種能在加入少量酸或堿和水時大大減低pH變動的溶液。緩沖溶液(BufferSolution)是一種能在加入少量酸或堿和水時大大減低pH變動的溶液。pH緩沖系統(tǒng)對維持生物的正常pH值和正常生理環(huán)境起到重要作用。多數(shù)細胞僅能在很窄的pH范圍內(nèi)進行活動,而且需要有緩沖體系來抵抗在代謝過程中出現(xiàn)的pH變化。在生物體中有三種主要的pH緩沖體系,它們是蛋白質(zhì)緩沖系統(tǒng)、重碳酸鹽緩沖系統(tǒng)以及磷酸鹽緩沖系統(tǒng)。每種緩沖體系所占的分量在各類細胞和器官中是不同的。在生化研究工作
干粉培養(yǎng)基的配置和注意事項2022/05/12
干粉培養(yǎng)基是將配制好的培養(yǎng)基進行脫水處理,這樣便于保存及銷售。干粉培養(yǎng)基的優(yōu)缺點:優(yōu)點在于便于運輸、可以長期儲存,不過需要使用者自行配置方可以使用,配制時需要制備細胞培養(yǎng)用的純水,有時也存在溶解性不好的問題。缺點在于批次間的重復(fù)性不太好。干粉培養(yǎng)基的配置:1.在一個盡可能接近總體積的容器中加入比預(yù)期培養(yǎng)基總體積少5%的雙蒸水。2.在室溫(20℃到30℃)的水中加入干粉培養(yǎng)基,輕輕攪拌,不要加熱。3.水洗包裝袋的內(nèi)部,轉(zhuǎn)移全部的痕量干粉到容器內(nèi)。4.加NaHCO3到培養(yǎng)基中。5.用雙蒸水稀釋到想要
關(guān)于蛋白質(zhì)綴合的方案你了解多少2022/05/11
關(guān)于蛋白質(zhì)綴合的簡捷方案你了解多少?以下是使用SMCC和DTT詳細說明PE-蛋白質(zhì)綴合的方案,供參考。注意:該方案使用IgG(MW:150kDa)作為其綴合蛋白,但是其他蛋白質(zhì)可以用適當(dāng)修飾的量替代。PE準備注意:如果PE作為溶液(通常為硫酸銨)儲存,則必須首先進行離心分離。離心并棄去上清液,然后在PBS中以與原溶液相同的濃度重建沉淀物。如果PE以固體形式儲存,立即懸浮在PBS中。對于計劃結(jié)合的每mgIgG,使用3.5mgPE。1.將PE溶液透析,每1升PE對1升PBS進行透析。重復(fù)一次。2.對
細胞復(fù)蘇的主要步驟及注意事項,有哪些?2022/05/10
主要步驟:①將冷凍管從液氮中取出,迅速投入37℃水浴融化,細胞融化后要盡快(約1min)移出37℃水浴。37℃水浴時間延長會提高細胞死亡率,復(fù)蘇過程中一般細胞死亡率在20%~25%之間。②迅速用酒精棉球擦拭冷凍管外部殺菌消毒,然后放置在冰浴上。③小心開啟瓶蓋,把細胞轉(zhuǎn)入含有4mL培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中,然后把培養(yǎng)瓶移至培養(yǎng)箱,36℃~38℃培養(yǎng)1h,讓細胞貼壁。④細胞貼壁后,小心移棄培養(yǎng)基,主要是去掉DMSO(懸浮生長細胞要通過離心沉淀除去DMSO)、死細胞及其碎片,加5mL新鮮培養(yǎng)基,36℃~38℃
透析袋預(yù)處理的方法2022/05/09
為防干裂,出廠前透析袋一般都經(jīng)10%的甘油處理,透析袋中含有微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì),它們對蛋白質(zhì)和其他生物活性物質(zhì)有害,用前必須除去。新購進的普通型透析袋必須經(jīng)過處理才能使用。方法一:把透析袋剪成適當(dāng)長度(10-20cm)的小段。在大體積(500ml)的2%(w/v)的碳酸氫鈉和1mmol/LEDTA2Na(pH=8.0)中將透析袋煮沸10min。用蒸餾水*清洗透析袋。放在500ml的1mmol/LEDTA2Na(pH=8.0)中將之煮沸10min。冷卻后,置于30%或者5
細胞培養(yǎng)板的分類與選擇2022/05/06
一、按底部形狀據(jù)底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V細胞培養(yǎng)板型)平底的什麼類型的細胞都可用﹐但當(dāng)細胞數(shù)目較少﹐如做克隆時﹐就用96孔平底板﹐另外﹐做MTT等實驗時﹐無論貼壁和懸浮細胞﹐一般均用平底板。至于U或V型板﹐一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學(xué)方面﹐當(dāng)做兩種不同淋巴細胞溷合培養(yǎng)時﹐需要二者相互接觸以刺激﹐因此﹐一般需要U型板﹐因細胞會由于重力的作用而聚集在一個很小的范圍內(nèi)。V型板的用途更少﹐一般用于細胞殺傷實驗時﹐為了使效靶細胞緊密接觸﹐常使用V型板﹐但這種試驗也可用U型板替代(
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