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細(xì)胞因子ELISA試劑盒如何處理和保存？2021/10/19: 一、血清標(biāo)本如是以無(wú)菌操作別離，則能夠在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，則主張冰凍保存。樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存，應(yīng)在-70℃以下。二、標(biāo)本在保存中如呈現(xiàn)細(xì)菌污染所形成的的混濁或絮狀物時(shí)，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測(cè)。三、要注意防止呈現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有相似過(guò)氧化物的活性，因此，在以HRP為符號(hào)酶的ELISA測(cè)定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相，然后與后面加入的HRP底物反響顯色。四、冰凍保存的血清標(biāo)本須注意防止因停電等形成的重復(fù)凍融。標(biāo)本的重復(fù)凍融

胎牛血清、小牛血清、新生牛血清之間的區(qū)別2021/10/08: 1、采血時(shí)間不同胎牛血清（FetalBovineSerum）是在母牛懷孕5-8個(gè)月時(shí)，通過(guò)胎牛心臟穿刺采血獲取的血清。新生牛血清（NewbornCalfSerum）是來(lái)自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。小牛血清（CalfSerum）采自出生后2周至1年內(nèi)的小牛靜脈取血。2、組份與比例不同兩者所含的促細(xì)胞生長(zhǎng)因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎發(fā)育所必需的生長(zhǎng)因子。一些生長(zhǎng)因子到胎牛10個(gè)月時(shí)就消失了。3、用途與用法不同某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng)，而有

ELISA實(shí)驗(yàn)技巧：ELISA試劑盒酶標(biāo)板在上面情況下失效？2021/09/30: ELISA試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年，如果保存得當(dāng)?shù)脑?huà)，不會(huì)出現(xiàn)問(wèn)題的。但不要反復(fù)凍融。當(dāng)然如果是正常的DAS-ELISA檢測(cè)試劑盒等，應(yīng)該放在4℃左右冰箱保存。建議ELISA試劑盒解凍后一次用完。已開(kāi)封或者使用后，剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，ELISA檢測(cè)試劑盒開(kāi)封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。但要注意的是，如果將ELISA試劑盒剛從冰箱里面拿出來(lái)就立即使用的話(huà)，可能會(huì)影響，其直接的后果是對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。建議：先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放

酶標(biāo)板可分為那幾種？2021/09/27: 酶標(biāo)板(ELISAPLATE)在酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(EnzymeLinkedImmunosorbentAssay,ELISA)中，參與免疫學(xué)反應(yīng)的抗原、抗體、標(biāo)記抗體或抗原的純度、濃度和比例；緩沖液種類(lèi)、濃度和離子強(qiáng)度、pH值和反應(yīng)溫度、時(shí)間等條件起著關(guān)鍵作用。一、高結(jié)合力酶標(biāo)板酶標(biāo)板經(jīng)表面處理后蛋白結(jié)合能力大大増強(qiáng)，可達(dá)300－400ng1gG/cm2，主要結(jié)合的蛋白分子量10kD。使用該類(lèi)酶標(biāo)板可提高敏感性，并可相對(duì)減少包被蛋白的濃度和用量，不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應(yīng)?？乖蚩贵w包被后，以

吐溫的用途有哪4種？2021/09/26: 吐溫（或聚山梨酯）為非離子型表面活性劑，有異臭，溫暖而微苦，系一系列聚氧乙xi去水山梨醇的部分脂肪酸酯。廣泛用作乳化劑和油類(lèi)物質(zhì)的增溶劑。聚山梨酯通常被認(rèn)為是無(wú)毒、無(wú)刺激性的材料。據(jù)WHO的評(píng)估，按總聚山梨酯計(jì)算，日攝入量可高到25mg/kg體重。用途：1.生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中乳化蛋白，在使用時(shí)，Tween和同類(lèi)型的TritonX-1OO(聚乙二醇辛基苯基醚)非離子型去污劑不破壞蛋白的結(jié)構(gòu)，可減少對(duì)蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞。離子型去污劑如SDS則破壞蛋白的結(jié)構(gòu)。2.在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中作封閉劑，封閉劑應(yīng)

葡萄糖苷酶的催化機(jī)理、作用及應(yīng)用2021/09/22: 葡萄糖苷酶是糖苷水解酶大家族中的一大類(lèi)酶，主要功能為水解葡萄糖苷鍵，釋放出葡萄糖作為產(chǎn)物，是生物體糖代謝途徑中*的一類(lèi)酶。一、主要催化機(jī)理：1、保留型酶的“兩步法”機(jī)制：大多數(shù)葡萄糖苷酶都是保留型葡萄糖苷酶，其催化機(jī)理通常都遵循“兩步法”機(jī)制。第一步：作為親核基團(tuán)的羧基負(fù)離子親核進(jìn)攻糖苷鍵上的異頭碳，同時(shí)作為廣義酸堿對(duì)的另一個(gè)催化羧基上的氫與糖苷鍵上的氧原子形成氫鍵，第一次形成含氧碳正離子樣過(guò)渡態(tài)（Oxocarbenium-liketransitionstate）。經(jīng)過(guò)鍵的形成有斷裂，糖基分子的

胰蛋白酶的作用有哪些？2021/09/18: 胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)為蛋白酶的一種，EC3.4.4.4，是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動(dòng)物中，作為消化酶而起作用。在胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原被合成后，作為胰液的成分而分泌，受腸激酶，或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶，是肽鏈內(nèi)切酶，它能把多肽鏈中賴(lài)氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷。它不僅起消化酶的作用，而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體，起活化作用。是特異性*的蛋白酶，在決定蛋白質(zhì)的氨基酸排列中，它成為*的工具。胰蛋

透析袋的透析類(lèi)型有哪些？2021/09/15: 透析袋通常是由半透膜制成的袋狀容器。在生物大分子的制備過(guò)程中，除去鹽、少量有機(jī)溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品時(shí)都要用到透析的技術(shù)-透析袋。自ThomasGraham1861年發(fā)明透析方法至今已有一百多年。透析已成為生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)室常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過(guò)程中，除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。透析只需要使用專(zhuān)用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中的大分子量的生物大分子

細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟和要求以及注意事項(xiàng)2021/09/13: 一、細(xì)胞復(fù)蘇將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。移人15ml離心管中，加入10ml預(yù)熱的DMEM*培養(yǎng)基，輕輕吹勻，離心，2000rpmX2min，棄上清液。加入10mlDMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入10mlDMEM*培養(yǎng)基，輕輕吹打，接種于10cm盤(pán)中，在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。二、細(xì)胞傳代細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)．去培養(yǎng)基，10mlPBS清洗2次。加入3ml含0．25%EDTA的胰蛋白酶，放人細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加人1mlDMEM*培養(yǎng)基終止胰酶消化

PBS緩沖液和Hanks緩沖液的區(qū)別2021/09/10: PBS：磷酸緩沖鹽溶液——具有pH緩沖作用的等滲鹽溶液。PBS溶液又稱(chēng)磷酸鹽緩沖溶液，一般選擇K2HPO4和KH2PO4配制，因?yàn)殁c鹽溶解的較慢。根據(jù)不同pH的溶液，稱(chēng)量不同質(zhì)量的磷酸鹽，也可以用pH計(jì)調(diào)溶液的pH。PBS一般用作支持電解質(zhì)。其配置方法如下：采用去離子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液，按以下步驟進(jìn)行：(1)配制1/15mol/LKH2PO4，即每升水中溶解9.078克KH2PO4;(2)配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O，即每升水中溶解11.8

移液器的使用方法和注意事項(xiàng)2021/09/07: 一、方法/步驟：1、首先設(shè)定移液體積：從大量程調(diào)節(jié)至小量程為正常調(diào)節(jié)方法，逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度即可；從小量程調(diào)節(jié)至大量程時(shí)，應(yīng)先調(diào)至超過(guò)設(shè)定體積刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以保證移液器的精確度。2、接著裝配移液槍頭：將移液槍垂直插入槍頭中，稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動(dòng)就可以使其緊密結(jié)合。3、然后進(jìn)行垂直吸液：吸頭j端浸入液面3mm以下，吸液前槍頭先在液體中預(yù)潤(rùn)洗2～3次確保移液的精度和準(zhǔn)度，以防有較大誤差。4、然后放液吸液：放液時(shí)如果量很小則應(yīng)吸頭j端可靠容器內(nèi)壁。一定要慢吸慢放，以防突然松開(kāi)溶液吸入過(guò)快而

納米二氧化硅的應(yīng)用2021/08/24: 納米二氧化硅(英文名稱(chēng)nano-silicondioxide)是一種無(wú)機(jī)化工材料，俗稱(chēng)白炭黑。納米二氧化硅的物化性質(zhì)：1.外觀(guān)為為無(wú)定形白色粉末，粒子尺寸范圍在1~100納米，微結(jié)構(gòu)為球形，呈絮狀和網(wǎng)狀的準(zhǔn)顆粒結(jié)構(gòu)。2.不能溶于水和酸(氫氟酸除外)及有機(jī)溶劑，能溶于堿及氫氟酸。3.屬于非金屬酸性氧化物，與金屬氧化物在高溫下生成硅酸鹽，除氫氟酸外不與其他酸反應(yīng)，與強(qiáng)堿反應(yīng)生成鹽，能與氫氟酸反應(yīng)生成氟硅酸，納米二氧化硅的應(yīng)用：納米二氧化硅的用途分非常廣泛，一般添加重量在0.5-2%，個(gè)別產(chǎn)品體系可到

細(xì)胞轉(zhuǎn)染的方法及常用步驟2021/08/23: 一、方法1、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法陽(yáng)離子脂質(zhì)體表面帶正電荷，能與核酸的磷酸根通過(guò)靜電作用，將DNA分子包裹入內(nèi)，形成DNA脂復(fù)合物，也能被表面帶負(fù)電的細(xì)胞膜吸附，再通過(guò)融合或細(xì)胞內(nèi)吞進(jìn)入細(xì)胞。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細(xì)胞中，是目前實(shí)驗(yàn)室方便的轉(zhuǎn)染方法之一，其轉(zhuǎn)染率較高，優(yōu)于磷酸鈣法。由于脂質(zhì)體對(duì)細(xì)胞有一定的毒性，所以轉(zhuǎn)染時(shí)間一般不超過(guò)24小時(shí)。常用細(xì)胞類(lèi)型：cos-7、BHK、NIH3T3、Hela等。2、電穿孔轉(zhuǎn)染法電流能夠可逆地?fù)舸┘?xì)胞膜形成瞬時(shí)的水通路或膜上小孔促使DNA分子進(jìn)入

六偏磷酸鈉的性質(zhì)和應(yīng)用2021/08/19: 六偏磷酸鈉為NA2O/P2O5分子比近1的玻璃狀磷酸鹽，過(guò)去稱(chēng)為"格蘭漢姆"鹽。于1832年由格蘭漢姆發(fā)現(xiàn)，他將磷酸二氫鈉加熱脫水而得的鹽，在其熔點(diǎn)(625℃)下加熱，并使熔融物迅速冷卻，而制得有吸濕性的格蘭漢姆鹽。六偏磷酸鈉的性質(zhì)：摩爾質(zhì)量:611.77g·mol-1外觀(guān):白色、無(wú)臭、結(jié)晶粉末密度:2.484g/cm3熔點(diǎn):616°C(分解)沸點(diǎn):1500°C溶解度(水):易溶溶解度(有機(jī)溶劑):不溶吸濕性:強(qiáng)，在溫水、酸或堿溶液中易水解為正磷酸鹽。其他性質(zhì):熔點(diǎn)616℃(分解)，相對(duì)密度2.

Tris-HCl緩沖液有哪些優(yōu)缺點(diǎn)?2021/08/18: 優(yōu)點(diǎn)：①因?yàn)門(mén)ris堿的堿性較強(qiáng)，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液；②對(duì)生物化學(xué)過(guò)程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。缺點(diǎn)：①緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大，緩沖液稀釋十倍，pH值的變化大于0.1；②溫度效應(yīng)大，溫度變化對(duì)緩沖液pH值的影響很大，即：△pKa／℃＝－0.031，例如：4℃時(shí)緩沖液的pH＝8.4，則37℃時(shí)的pH＝7.4，所以一定要在使用溫度下進(jìn)行配制，室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃～4℃。③易吸收空氣中的CO2

如何合成芝麻酚？2021/08/17: 芝麻酚，又名3,4-亞甲二氧基苯酚，是芝麻油的重要的香氣成分，也是芝麻油重要的品質(zhì)穩(wěn)定劑。芝麻酚的用途：芝麻酚具有非常強(qiáng)的抗氧化能力，常用于食品、醫(yī)藥的抗氧化劑，同時(shí)它更是合成抗高血壓藥物、心血管藥物的重要的起始原料，同時(shí)也是農(nóng)藥胡椒基丁基醚的原料。芝麻酚在國(guó)際上非常緊俏，尤其是藥物合成領(lǐng)域的需求量很大。芝麻酚的合成方法：芝麻酚的合成技術(shù)主要有三條:其一是從芝麻油中提取，其二是有胡椒胺出發(fā)進(jìn)行全合成，其三是從洋茉莉醛出發(fā)的半合成路線(xiàn)。從芝麻油中提取芝麻酚，溶劑耗量大，成本較高，不適合工業(yè)化生產(chǎn);

胎牛血清和小牛血清的區(qū)別2021/08/13: 小牛血清和胎牛血清的區(qū)別：1、來(lái)源不同：（1）小牛血清取自出生10－30天的小牛，出生三月齡小牛動(dòng)脈采血分離血清。（2）胎牛血清是在屠宰懷孕母牛的時(shí)候,通過(guò)心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清。2、品質(zhì)不同：（1）小牛血清品質(zhì)不如胎牛血清。（2）胎牛血清是p質(zhì)z高的，因?yàn)樘ヅ＿€未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分最少。3、用途與用法不同：（1）小牛血清而有些細(xì)胞只需小牛血清即可。（2）胎牛血清某些細(xì)胞必需胎牛血清才能生長(zhǎng)。4、外觀(guān)不同：（1）小牛血清外觀(guān)黃色澄清，微溶血，有異物稍粘稠液體

關(guān)于地塞米松的藥理作用2021/08/10: 地塞米松又名氟美松、氟甲強(qiáng)地松龍、德沙美松，是糖皮質(zhì)類(lèi)激素。它于于1957年第一次合成，并列名于世界衛(wèi)生組織基本藥物標(biāo)準(zhǔn)清單之中，為基礎(chǔ)公衛(wèi)體系需備藥物之一。地塞米松的理化特征：化學(xué)名：(11β16α)-9-Fluoro-11,17,21-trihydroxy-16-methylpregna-1,4-diene-3,20-dioneCAS號(hào)：50-02-2分子式：C22H29FO5分子量：392.5溶解度：ethanol:1mg/mL地塞米松的藥理作用：抗炎作用:本產(chǎn)品可減輕和防止組織對(duì)炎癥的反

蛋白酶K助力您的生化研究2021/08/09: 什么是蛋白酶K？蛋白酶K（ProteinaseK）是一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶，基因序列來(lái)源于白色念球菌白色念球菌（Tritirachiumalbumlimber），具有很高的比活性。用于mRNA和DNA與蛋白質(zhì)的分離。它有什么作用？蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理，它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用，以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會(huì)提高雜交信號(hào)。但蛋白酶K的濃度過(guò)高、消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或孵育溫度過(guò)高時(shí)都會(huì)對(duì)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞，導(dǎo)致組織切片的脫落細(xì)胞核的消失，從而影響雜

氫氧化鈉的定義和主要用途2021/08/05: 氫氧化鈉，化學(xué)式為NaOH，俗稱(chēng)燒堿、火堿、苛性鈉，溶解時(shí)散發(fā)出氨味，為一種具有很強(qiáng)腐蝕性的強(qiáng)堿，一般為片狀或顆粒形態(tài)，易溶于水(溶于水時(shí)放熱)并形成堿性溶液，另有潮解性，易吸取空氣中的水蒸氣(潮解)和二氧化碳(變質(zhì))。NaOH是化學(xué)實(shí)驗(yàn)室其中一種需要準(zhǔn)備的化學(xué)品，亦為常見(jiàn)的化工品之一。純品是無(wú)色透明的晶體。密度2.130g/cm3。熔點(diǎn)318.4℃。沸點(diǎn)1390℃。工業(yè)品含有少量的氯化鈉和碳酸鈉，是白色不透明的晶體。有塊狀，片狀，粒狀等。氫氧化鈉在水處理中可作為堿性清洗劑，溶于乙醇和甘油;不溶

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