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細胞因子ELISA試劑盒如何處理和保存？2021/10/19

一、血清標本如是以無菌操作別離，則能夠在2～8℃下保存一周，如為有菌操作，則主張冰凍保存。樣本的長時間保存，應(yīng)在-70℃以下。二、標本在保存中如呈現(xiàn)細菌污染所形成的的混濁或絮狀物時，應(yīng)離心沉淀后取上清檢測。三、要注意防止呈現(xiàn)嚴重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有相似過氧化物的活性，因此，在以HRP為符號酶的ELISA測定中，如血清標本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過程中吸附于固相，然后與后面加入的HRP底物反響顯色。四、冰凍保存的血清標本須注意防止因停電等形成的重復凍融。標本的重復凍融

胎牛血清、小牛血清、新生牛血清之間的區(qū)別2021/10/08

1、采血時間不同胎牛血清（FetalBovineSerum）是在母牛懷孕5-8個月時，通過胎牛心臟穿刺采血獲取的血清。新生牛血清（NewbornCalfSerum）是來自剛出生~出生后2周內(nèi)的新生牛靜脈取血。小牛血清（CalfSerum）采自出生后2周至1年內(nèi)的小牛靜脈取血。2、組份與比例不同兩者所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組份與比例不同。胎牛血清尤其含有胚胎發(fā)育所必需的生長因子。一些生長因子到胎牛10個月時就消失了。3、用途與用法不同某些細胞必需胎牛血清才能生長，而有

ELISA實驗技巧：ELISA試劑盒酶標板在上面情況下失效？2021/09/30

ELISA試劑盒的保質(zhì)期一般都是在一年，如果保存得當?shù)脑?，不會出現(xiàn)問題的。但不要反復凍融。當然如果是正常的DAS-ELISA檢測試劑盒等，應(yīng)該放在4℃左右冰箱保存。建議ELISA試劑盒解凍后一次用完。已開封或者使用后，剩余試劑仍需按照試劑瓶標簽所示的溫度保存，ELISA檢測試劑盒開封后的酶標板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。但要注意的是，如果將ELISA試劑盒剛從冰箱里面拿出來就立即使用的話，可能會影響，其直接的后果是對一些弱陽性標本的檢測出現(xiàn)假陰性。建議：先從冰箱中拿出來，在室溫下放

酶標板可分為那幾種？2021/09/27

酶標板(ELISAPLATE)在酶聯(lián)免疫吸附試驗(EnzymeLinkedImmunosorbentAssay,ELISA)中，參與免疫學反應(yīng)的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度、濃度和比例；緩沖液種類、濃度和離子強度、pH值和反應(yīng)溫度、時間等條件起著關(guān)鍵作用。一、高結(jié)合力酶標板酶標板經(jīng)表面處理后蛋白結(jié)合能力大大増強，可達300－400ng1gG/cm2，主要結(jié)合的蛋白分子量10kD。使用該類酶標板可提高敏感性，并可相對減少包被蛋白的濃度和用量，不足之處為較易產(chǎn)生非特異性反應(yīng)?？乖蚩贵w包被后，以

吐溫的用途有哪4種？2021/09/26

吐溫（或聚山梨酯）為非離子型表面活性劑，有異臭，溫暖而微苦，系一系列聚氧乙xi去水山梨醇的部分脂肪酸酯。廣泛用作乳化劑和油類物質(zhì)的增溶劑。聚山梨酯通常被認為是無毒、無刺激性的材料。據(jù)WHO的評估，按總聚山梨酯計算，日攝入量可高到25mg/kg體重。用途：1.生物學實驗中乳化蛋白，在使用時，Tween和同類型的TritonX-1OO(聚乙二醇辛基苯基醚)非離子型去污劑不破壞蛋白的結(jié)構(gòu)，可減少對蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞。離子型去污劑如SDS則破壞蛋白的結(jié)構(gòu)。2.在生物學實驗中作封閉劑，封閉劑應(yīng)

葡萄糖苷酶的催化機理、作用及應(yīng)用2021/09/22

葡萄糖苷酶是糖苷水解酶大家族中的一大類酶，主要功能為水解葡萄糖苷鍵，釋放出葡萄糖作為產(chǎn)物，是生物體糖代謝途徑中*的一類酶。一、主要催化機理：1、保留型酶的“兩步法”機制：大多數(shù)葡萄糖苷酶都是保留型葡萄糖苷酶，其催化機理通常都遵循“兩步法”機制。第一步：作為親核基團的羧基負離子親核進攻糖苷鍵上的異頭碳，同時作為廣義酸堿對的另一個催化羧基上的氫與糖苷鍵上的氧原子形成氫鍵，第一次形成含氧碳正離子樣過渡態(tài)（Oxocarbenium-liketransitionstate）。經(jīng)過鍵的形成有斷裂，糖基分子的

胰蛋白酶的作用有哪些？2021/09/18

胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)為蛋白酶的一種，EC3.4.4.4，是從牛、羊、豬的胰臟提取的一種絲氨酸蛋白水解酶。在脊椎動物中，作為消化酶而起作用。在胰臟是胰蛋白酶的前體胰蛋白酶原被合成后，作為胰液的成分而分泌，受腸激酶，或胰蛋白酶的限制分解成為活化胰蛋白酶，是肽鏈內(nèi)切酶，它能把多肽鏈中賴氨酸和精氨酸殘基中的羧基側(cè)切斷。它不僅起消化酶的作用，而且還能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前體，起活化作用。是特異性*的蛋白酶，在決定蛋白質(zhì)的氨基酸排列中，它成為*的工具。胰蛋

透析袋的透析類型有哪些？2021/09/15

透析袋通常是由半透膜制成的袋狀容器。在生物大分子的制備過程中，除去鹽、少量有機溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品時都要用到透析的技術(shù)-透析袋。自ThomasGraham1861年發(fā)明透析方法至今已有一百多年。透析已成為生物化學實驗室常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過程中，除鹽、除少量有機溶劑、除去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。透析只需要使用專用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi)，將此透析袋浸入水或緩沖液中，樣品溶液中的大分子量的生物大分子

細胞培養(yǎng)的具體步驟和要求以及注意事項2021/09/13

一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。移人15ml離心管中，加入10ml預(yù)熱的DMEM*培養(yǎng)基，輕輕吹勻，離心，2000rpmX2min，棄上清液。加入10mlDMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入10mlDMEM*培養(yǎng)基，輕輕吹打，接種于10cm盤中，在含5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。二、細胞傳代細胞密度達到80%~90%時．去培養(yǎng)基，10mlPBS清洗2次。加入3ml含0．25%EDTA的胰蛋白酶，放人細胞培養(yǎng)箱3min。加人1mlDMEM*培養(yǎng)基終止胰酶消化

PBS緩沖液和Hanks緩沖液的區(qū)別2021/09/10

PBS：磷酸緩沖鹽溶液——具有pH緩沖作用的等滲鹽溶液。PBS溶液又稱磷酸鹽緩沖溶液，一般選擇K2HPO4和KH2PO4配制，因為鈉鹽溶解的較慢。根據(jù)不同pH的溶液，稱量不同質(zhì)量的磷酸鹽，也可以用pH計調(diào)溶液的pH。PBS一般用作支持電解質(zhì)。其配置方法如下：采用去離子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液，按以下步驟進行：(1)配制1/15mol/LKH2PO4，即每升水中溶解9.078克KH2PO4;(2)配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O，即每升水中溶解11.8

移液器的使用方法和注意事項2021/09/07

一、方法/步驟：1、首先設(shè)定移液體積：從大量程調(diào)節(jié)至小量程為正常調(diào)節(jié)方法，逆時針旋轉(zhuǎn)刻度即可；從小量程調(diào)節(jié)至大量程時，應(yīng)先調(diào)至超過設(shè)定體積刻度，再回調(diào)至設(shè)定體積，這樣可以保證移液器的精確度。2、接著裝配移液槍頭：將移液槍垂直插入槍頭中，稍微用力左右微微轉(zhuǎn)動就可以使其緊密結(jié)合。3、然后進行垂直吸液：吸頭j端浸入液面3mm以下，吸液前槍頭先在液體中預(yù)潤洗2～3次確保移液的精度和準度，以防有較大誤差。4、然后放液吸液：放液時如果量很小則應(yīng)吸頭j端可靠容器內(nèi)壁。一定要慢吸慢放，以防突然松開溶液吸入過快而

納米二氧化硅的應(yīng)用2021/08/24

納米二氧化硅(英文名稱nano-silicondioxide)是一種無機化工材料，俗稱白炭黑。納米二氧化硅的物化性質(zhì)：1.外觀為為無定形白色粉末，粒子尺寸范圍在1~100納米，微結(jié)構(gòu)為球形，呈絮狀和網(wǎng)狀的準顆粒結(jié)構(gòu)。2.不能溶于水和酸(氫氟酸除外)及有機溶劑，能溶于堿及氫氟酸。3.屬于非金屬酸性氧化物，與金屬氧化物在高溫下生成硅酸鹽，除氫氟酸外不與其他酸反應(yīng)，與強堿反應(yīng)生成鹽，能與氫氟酸反應(yīng)生成氟硅酸，納米二氧化硅的應(yīng)用：納米二氧化硅的用途分非常廣泛，一般添加重量在0.5-2%，個別產(chǎn)品體系可到

細胞轉(zhuǎn)染的方法及常用步驟2021/08/23

一、方法1、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法陽離子脂質(zhì)體表面帶正電荷，能與核酸的磷酸根通過靜電作用，將DNA分子包裹入內(nèi)，形成DNA脂復合物，也能被表面帶負電的細胞膜吸附，再通過融合或細胞內(nèi)吞進入細胞。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染適用于把DNA轉(zhuǎn)染入懸浮或貼壁培養(yǎng)細胞中，是目前實驗室方便的轉(zhuǎn)染方法之一，其轉(zhuǎn)染率較高，優(yōu)于磷酸鈣法。由于脂質(zhì)體對細胞有一定的毒性，所以轉(zhuǎn)染時間一般不超過24小時。常用細胞類型：cos-7、BHK、NIH3T3、Hela等。2、電穿孔轉(zhuǎn)染法電流能夠可逆地擊穿細胞膜形成瞬時的水通路或膜上小孔促使DNA分子進入

六偏磷酸鈉的性質(zhì)和應(yīng)用2021/08/19

六偏磷酸鈉為NA2O/P2O5分子比近1的玻璃狀磷酸鹽，過去稱為"格蘭漢姆"鹽。于1832年由格蘭漢姆發(fā)現(xiàn)，他將磷酸二氫鈉加熱脫水而得的鹽，在其熔點(625℃)下加熱，并使熔融物迅速冷卻，而制得有吸濕性的格蘭漢姆鹽。六偏磷酸鈉的性質(zhì)：摩爾質(zhì)量:611.77g·mol-1外觀:白色、無臭、結(jié)晶粉末密度:2.484g/cm3熔點:616°C(分解)沸點:1500°C溶解度(水):易溶溶解度(有機溶劑):不溶吸濕性:強，在溫水、酸或堿溶液中易水解為正磷酸鹽。其他性質(zhì):熔點616℃(分解)，相對密度2.

Tris-HCl緩沖液有哪些優(yōu)缺點?2021/08/18

優(yōu)點：①因為Tris堿的堿性較強，所以可以只用這一種緩沖體系配制pH范圍由酸性到堿性的大范圍pH值的緩沖液；②對生物化學過程干擾很小，不與鈣、鎂離子及重金屬離子發(fā)生沉淀。缺點：①緩沖液的pH值受溶液濃度影響較大，緩沖液稀釋十倍，pH值的變化大于0.1；②溫度效應(yīng)大，溫度變化對緩沖液pH值的影響很大，即：△pKa／℃＝－0.031，例如：4℃時緩沖液的pH＝8.4，則37℃時的pH＝7.4，所以一定要在使用溫度下進行配制，室溫下配制的Tris-HCl緩沖液不能用于0℃～4℃。③易吸收空氣中的CO2

如何合成芝麻酚？2021/08/17

芝麻酚，又名3,4-亞甲二氧基苯酚，是芝麻油的重要的香氣成分，也是芝麻油重要的品質(zhì)穩(wěn)定劑。芝麻酚的用途：芝麻酚具有非常強的抗氧化能力，常用于食品、醫(yī)藥的抗氧化劑，同時它更是合成抗高血壓藥物、心血管藥物的重要的起始原料，同時也是農(nóng)藥胡椒基丁基醚的原料。芝麻酚在國際上非常緊俏，尤其是藥物合成領(lǐng)域的需求量很大。芝麻酚的合成方法：芝麻酚的合成技術(shù)主要有三條:其一是從芝麻油中提取，其二是有胡椒胺出發(fā)進行全合成，其三是從洋茉莉醛出發(fā)的半合成路線。從芝麻油中提取芝麻酚，溶劑耗量大，成本較高，不適合工業(yè)化生產(chǎn);

胎牛血清和小牛血清的區(qū)別2021/08/13

小牛血清和胎牛血清的區(qū)別：1、來源不同：（1）小牛血清取自出生10－30天的小牛，出生三月齡小牛動脈采血分離血清。（2）胎牛血清是在屠宰懷孕母牛的時候,通過心臟穿刺采血獲取的胎牛的血清。2、品質(zhì)不同：（1）小牛血清品質(zhì)不如胎牛血清。（2）胎牛血清是p質(zhì)z高的，因為胎牛還未接觸外界，血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。3、用途與用法不同：（1）小牛血清而有些細胞只需小牛血清即可。（2）胎牛血清某些細胞必需胎牛血清才能生長。4、外觀不同：（1）小牛血清外觀黃色澄清，微溶血，有異物稍粘稠液體

關(guān)于地塞米松的藥理作用2021/08/10

地塞米松又名氟美松、氟甲強地松龍、德沙美松，是糖皮質(zhì)類激素。它于于1957年第一次合成，并列名于世界衛(wèi)生組織基本藥物標準清單之中，為基礎(chǔ)公衛(wèi)體系需備藥物之一。地塞米松的理化特征：化學名：(11β16α)-9-Fluoro-11,17,21-trihydroxy-16-methylpregna-1,4-diene-3,20-dioneCAS號：50-02-2分子式：C22H29FO5分子量：392.5溶解度：ethanol:1mg/mL地塞米松的藥理作用：抗炎作用:本產(chǎn)品可減輕和防止組織對炎癥的反

蛋白酶K助力您的生化研究2021/08/09

什么是蛋白酶K？蛋白酶K（ProteinaseK）是一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶，基因序列來源于白色念球菌白色念球菌（Tritirachiumalbumlimber），具有很高的比活性。用于mRNA和DNA與蛋白質(zhì)的分離。它有什么作用？蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理，它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用，以增加探針與靶核酸結(jié)合的機會提高雜交信號。但蛋白酶K的濃度過高、消化時間過長或孵育溫度過高時都會對細胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞，導致組織切片的脫落細胞核的消失，從而影響雜

氫氧化鈉的定義和主要用途2021/08/05

氫氧化鈉，化學式為NaOH，俗稱燒堿、火堿、苛性鈉，溶解時散發(fā)出氨味，為一種具有很強腐蝕性的強堿，一般為片狀或顆粒形態(tài)，易溶于水(溶于水時放熱)并形成堿性溶液，另有潮解性，易吸取空氣中的水蒸氣(潮解)和二氧化碳(變質(zhì))。NaOH是化學實驗室其中一種需要準備的化學品，亦為常見的化工品之一。純品是無色透明的晶體。密度2.130g/cm3。熔點318.4℃。沸點1390℃。工業(yè)品含有少量的氯化鈉和碳酸鈉，是白色不透明的晶體。有塊狀，片狀，粒狀等。氫氧化鈉在水處理中可作為堿性清洗劑，溶于乙醇和甘油;不溶