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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)本采集方法2011/12/01
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物標(biāo)本采集方法一、血液的采集常用的采血方法有割(剪)尾采血、眼眶靜脈叢采血、斷頭采血、心臟采血、頸靜脈(動(dòng)脈)采血、股動(dòng)脈(靜脈)采血、耳靜脈采血、前肢頭靜脈才學(xué)、后肢小靜脈采血等。二、尿液的采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的尿液常用代謝籠采集,也可通過其他裝置來采集。(一)用代謝籠采集尿液代謝籠用于收集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自然排出的尿液,是一種特別設(shè)計(jì)的為采集實(shí)驗(yàn)動(dòng)物各種排泄物的密封式飼養(yǎng)籠,有的代謝籠除可收集尿液外,又可收集糞便和動(dòng)物呼出的CO2。一般簡(jiǎn)單的代謝籠主要用來收集尿液。防在代謝籠內(nèi)飼養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,可通過其
ELISA的試劑盒的固相載體2011/11/29
固相載體在ELISA測(cè)定過程中作為吸附劑和容器,不參與化學(xué)反應(yīng)??勺鱁LISA中載體的材料很多,zui常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學(xué)活性,加之它的價(jià)格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式。ELISA載體的形狀主要有三種:微量滴定板、小珠和小試管。以微量滴定板zui為常用,于EILSA的產(chǎn)品稱為ELISA板,上標(biāo)準(zhǔn)的微量滴定板為8×12的96孔式。為便于作少量標(biāo)本的檢測(cè),有制成8聯(lián)孔條或12聯(lián)孔條的,放入座架后,大
生化試劑應(yīng)用常見問題的探討2011/11/26
試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標(biāo)之一,但不能反映試劑質(zhì)量的全部。試劑成份、純度、用量及穩(wěn)定性,才是保證試劑質(zhì)量的關(guān)鍵所在。目前市售的一些試劑具有抗干擾作用,主要是通過加入抗干擾物質(zhì)或使用新的色素原以避免內(nèi)源性物質(zhì)的干擾。但值得注意的是:一些試驗(yàn)項(xiàng)目在消除內(nèi)源性物質(zhì)干擾的同時(shí),會(huì)帶來樣品含量真實(shí)性的變化。一:試劑空白試劑空白吸光度是反映試劑質(zhì)量的指標(biāo)之一。每種試劑都有一定的空白吸光度范圍,試劑空白吸光度的改變往往提示該試劑的變質(zhì);如利用Trinder反應(yīng)為原理的檢測(cè)試劑會(huì)因含酚類物質(zhì)被氧化為醌而
怎樣正確進(jìn)行ELISA操作2011/11/24
怎樣正確進(jìn)行ELISA操作:一、臨床標(biāo)本的收集和保存用于ELISA測(cè)定的臨床標(biāo)本zui為常用的是血清(漿),有時(shí)因?yàn)樘囟ǖ臋z測(cè)目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標(biāo)本。目前臨床上使用血清標(biāo)本測(cè)定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。對(duì)用于激素和治療藥物測(cè)定的血清標(biāo)本的收集,要注意收集時(shí)間甚或體位有可能會(huì)對(duì)測(cè)定結(jié)果產(chǎn)生影響。如可的松在早晨4~6點(diǎn)之間,會(huì)有一峰值出現(xiàn):生長(zhǎng)激素、促黃體激素(LH)和促卵泡激素(FSH)均以陣發(fā)性方式釋放,因此,在
檢測(cè)細(xì)胞凋亡的幾種方法2011/11/22
檢測(cè)細(xì)胞凋亡的幾種方法一、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)核小體測(cè)定凋亡細(xì)胞的DNA斷裂使細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)核小體。核小體由組蛋白及其伴隨的DNA片斷組成,可由ELISA法檢測(cè)。(一)檢測(cè)步驟1、將凋亡細(xì)胞裂解后高速離心,其上清液中含有核小體2、在微定量板上吸附組蛋白體3、加上清夜使抗組蛋白抗體與核小體上的組蛋白結(jié)合4、加辣過氧化物酶標(biāo)記的抗DNA抗體使之與核小體上的DNA結(jié)合4、加酶的底物,測(cè)光吸收制。(二)用途該法敏感性高,可檢測(cè)5*100/ml個(gè)凋亡細(xì)胞。可用于人、大鼠、小鼠的凋亡檢測(cè)。該法不需要特
微生物培養(yǎng)基的制備方法2011/11/19
微生物培養(yǎng)基的制備方法培養(yǎng)基(medium)培養(yǎng)基是人工配制的適合微生物生長(zhǎng)繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。任何培養(yǎng)基中均需含有微生物所必需的能源、碳源、氮源、礦質(zhì)元素、水和生長(zhǎng)因素,但不同營(yíng)養(yǎng)類型、不同種類的微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)元素的要求又有很大差異。目前已使用的各種培養(yǎng)基都是前人經(jīng)過反復(fù)實(shí)踐,比較設(shè)計(jì)的成果。培養(yǎng)基的基本成分能源、碳源:自養(yǎng)微生物以二氧化碳為碳源,光或無機(jī)物為能源,在無機(jī)物組成的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。例如化能自養(yǎng)型的氧化硫桿菌培養(yǎng)基中,加入粉末狀硫?yàn)槟茉?,以空氣中的CO2為碳源。異養(yǎng)微生物以有
elisa試劑盒樣本常規(guī)處理方法2011/11/15
elisa試劑盒樣本常規(guī)處理方法測(cè)方法:ELISA檢測(cè)類型:酶免免疫夾心法檢測(cè)范圍:見說明書靈敏度:見說明書檢測(cè)目標(biāo):人大小鼠豬犬羊兔等樣品形式:血清/血漿/細(xì)胞培養(yǎng)上清/其它生物液體保存與運(yùn)輸:短期4℃/長(zhǎng)期-20℃保存應(yīng)用范圍:科研用檢測(cè)試劑質(zhì)量保證:檢測(cè)用所有ELISA試劑盒全部都為進(jìn)口試劑,適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,靈敏度*。我們專業(yè)的ELISA技術(shù)服務(wù),保證對(duì)所售任何產(chǎn)品一概負(fù)責(zé)到底,每一份實(shí)驗(yàn)結(jié)果都真實(shí)可靠!注意事項(xiàng):1)在收
Elisa操作要點(diǎn)總結(jié)2011/11/12
Elisa操作要點(diǎn)總結(jié),的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的本公司要求使用的純化水電導(dǎo)率小于1.5μs/cm。1.標(biāo)本的采取和保存大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)
黃曲霉毒素的檢測(cè)方法2011/11/10
黃曲霉毒素的檢測(cè)方法1.生物鑒定法其特點(diǎn)是待檢樣品不需很純,主要用于定性,共有10種:(1)抑菌試驗(yàn);(2)對(duì)微生物遺傳因子影響試驗(yàn);(3)細(xì)菌發(fā)光試驗(yàn);(4)熒光反應(yīng);(5)組織培養(yǎng)檢測(cè)法;(6)雞胚試驗(yàn);(7)鴨胚試驗(yàn);(8)鱒魚試驗(yàn);(9)植物試驗(yàn);(10)飼喂實(shí)驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)。生物鑒定法是利用AFT能影響微生物、水生動(dòng)物、家禽等生物體的細(xì)胞代謝,來鑒定AFT的存在。其方法專一性差,靈敏度低,一般只作為化學(xué)分析法的佐證。2.化學(xué)分析法zui常用的為薄層層析法(TLC),適用于糧食及其制品、調(diào)味
在ELISA中實(shí)驗(yàn)條件的選擇2011/11/08
在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是非常重要的,其中包括:1.固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。2.包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有
細(xì)胞培養(yǎng)中污染的預(yù)防與清除2011/11/05
細(xì)胞培養(yǎng)中污染的預(yù)防與清除一、污染的預(yù)防預(yù)防是防止細(xì)胞培養(yǎng)過程中發(fā)生污染的辦法。只有預(yù)防工作做在前,才能將發(fā)生污染的可能性降到zui小程度。一般預(yù)防可從以下幾方面著手:(一)從操作者做起1、操作者責(zé)任心要強(qiáng),要細(xì)心穩(wěn)重,操作技術(shù)要熟練。進(jìn)無菌室前要用肥皂洗手或用5%新潔爾滅浸泡5分鐘,按規(guī)定穿隔離衣。進(jìn)入后關(guān)好門,坐下來盡量少走動(dòng)。工作開始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。事先要嚴(yán)格檢查器材、溶液和培養(yǎng)物,不要把污染品或未經(jīng)消毒的物品帶入無菌室內(nèi),更不能隨便使用,以免造成大批污染。2、
ELISA試劑盒的清洗2011/11/03
清洗ELISA試劑盒自備材料1.蒸餾水。2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振蕩器及磁力攪拌器等。ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng):1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的
血清使用中的常見問題解答2011/11/01
血清使用中的常見問題解答1.保存血清的辦法?我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。若你一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。2.如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?我們建議您將血清從冷凍箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。3.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的;而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,
自由基的產(chǎn)生方法2011/10/28
有機(jī)化合物(Organiccompounds)發(fā)生化學(xué)反應(yīng)時(shí),總是伴隨著一部分共價(jià)鍵(covalentbond)的斷裂和新的共價(jià)鍵的生成。例如酪氨酸自由基(tyrosineradical),共價(jià)鍵的斷裂可以有兩種方式:均裂(homolyticbondcleavage)和異裂(heterolyticcleavage)。鍵的斷裂方式是兩個(gè)成鍵電子在兩個(gè)參與原子或碎片間平均分配的過程稱為鍵的均裂(homolyticbondcleavage)。兩個(gè)成鍵電子的分離可以表示為從鍵出發(fā)的兩個(gè)單箭頭。所形成的碎
人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)Elisa試劑盒說明書2011/10/25
檢測(cè)范圍:96T0.3pmol/L-8pmol/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中胰高血糖素樣肽1(GLP-1)含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)水平。用純化的人胰高血糖素樣肽1(GLP-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入胰高血糖素樣肽1(GLP-1),再與HRP標(biāo)記的胰高血糖素樣肽1(GLP-1)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)
人精氨酸加壓素(AVP)Elisa試劑盒說明書2011/10/22
檢測(cè)范圍:96T2ng/L-50ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中精氨酸加壓素(AVP)含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人精氨酸加壓素(AVP)水平。用純化的人精氨酸加壓素(AVP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入精氨酸加壓素(AVP),再與HRP標(biāo)記的精氨酸加壓素(AVP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺
乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基用途及其使用方法2011/10/20
用途:用于多管發(fā)酵法測(cè)定食品、純凈水和一次性使用衛(wèi)生用品中大腸菌群、糞大腸菌群和大腸桿菌(GB/T8538-2008和GB15979-2002)。原理:蛋白胨提供碳源和氮源滿足細(xì)菌生長(zhǎng)的需求;豬膽鹽可抑制革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的生長(zhǎng);乳糖是大腸菌群可發(fā)酵的糖類;溴甲酚紫是pH指示劑,酸性呈黃色,堿性呈紫色。配方(每升):蛋白胨20g豬膽鹽5g乳糖10g溴甲酚紫0.01gzui終pH7.4±0.2使用方法:1、稱取本品35克(單料)或70克(雙料)加入蒸餾水或去離子水1L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝于帶有
黃根的幾種鑒別方法2011/10/18
一:性狀鑒別:根多呈圓柱形,略彎曲,長(zhǎng)8-25cm,直徑0.5-1.5cm。表面均呈紅棕色或灰綜色,有縱皺及支根痕,外皮業(yè)糙,易成片狀剝落;上端較粗,偶有膨大的根頭,下部較細(xì),常扭曲。根莖粗細(xì)均勻,具突起的節(jié),節(jié)間長(zhǎng)0.7-2cm。體輕,質(zhì)硬脆,易折斷,斷面皮部黃白色,木部淡黃色或黃色,射線放射狀排列,根莖中部有髓。無臭,味微苦。以質(zhì)硬、外皮色紅棕色、斷面色黃白者為佳。二:顯微鑒別:根及根芭橫切面:根的zui外面有落皮層,基間散有纖維群及石細(xì)胞;木栓層為10余列細(xì)胞。皮層狹窄,有纖維和纖維束散在
密蒙花的含量測(cè)定2011/10/15
照液相色譜法(附錄ⅥD)測(cè)定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲醇-水-醋酸(45:54.5:0.5)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為326nm。理論板數(shù)按蒙花苷峰計(jì)算應(yīng)不低于1000。對(duì)照品溶液的制備精密稱取蒙花苷對(duì)照品10mg,置100ml量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得(每1ml中含蒙花苷0.1mg)。供試品溶液的制備取本品粉末0.5g,精密稱定,置索氏提取器中,加石油醚(60~90℃)100ml,加熱回流2小時(shí),棄去石油醚,藥渣揮干,再加甲醇100ml繼續(xù)加熱回流4小時(shí),提取
人谷胱甘肽過氧化酶(GSH-Px)ELISA試劑盒2011/10/11
操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。80μg/ml5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液40μg/ml4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20μg/ml3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10μg/ml2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5μg/ml1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試
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