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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
胃蛋白酶提取法中分離純化技術(shù)的研究進(jìn)展2012/05/02
胃蛋白酶提取法中分離純化技術(shù)的研究進(jìn)展摘要:本文就胃蛋白酶的生物提取法,對(duì)其在過(guò)程中的分離、純化技術(shù)展開(kāi)綜述。其中,分離技術(shù)主要介紹了:鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、底物親和法、透析法。純化技術(shù)主要介紹了:凝膠過(guò)濾法、透析離子交換法。綜合比較各分離純化方法的特點(diǎn),得到*的分離純化方法有機(jī)溶劑與鹽析共沉淀法、膜分離技術(shù)、等電點(diǎn)沉淀法與底物親和法。關(guān)鍵詞:胃蛋白酶分離純化應(yīng)用.生物提取法胃蛋白酶1.1工藝路線(自溶、過(guò)濾)(脫脂、去雜質(zhì))豬胃黏膜→自溶液→上清液(濃縮、干燥)→胃蛋白酶成品1.2工藝過(guò)程(
蛋白質(zhì)的分離純化方法2012/05/02
蛋白質(zhì)的分離純化方法沉淀法:原理:是使蛋白質(zhì)膠體顆粒的表面水化膜或表面電荷破壞,從而使蛋白質(zhì)沉淀。?鹽析法?有機(jī)溶劑沉淀法?等點(diǎn)電沉淀法?選擇性變性沉淀法?聚合物沉淀法在生物大分子制備中zui常用的幾種沉淀方法是:?中性鹽沉淀(鹽析法):zui大的特點(diǎn)是環(huán)境溫和,不易造成蛋白質(zhì)變性。因此適用于各種蛋白質(zhì)和酶的分離純化。缺點(diǎn)是分辨率底,且后續(xù)處理時(shí)需要除鹽。?有機(jī)溶劑沉淀:分辨率高于鹽析法,但容易引起目的蛋白失活。所以多用于生物小分子的分離純化比如多肽、寡肽。?等電點(diǎn)沉淀:其局限是,須事先了解蛋白
人癌胚抗原(CEA/CD66)酶聯(lián)免疫分析2012/04/26
人癌胚抗原(CEA/CD66)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)本試劑盒僅供研究使用產(chǎn)品編號(hào):CSB-E04767h檢測(cè)范圍:0.156ng/ml-10ng/mlzui低檢測(cè)限:0.039ng/ml特異性:本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)天然或重組的人CEA,且與其他相關(guān)蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。有效期:6個(gè)月預(yù)期應(yīng)用:ELISA法定量測(cè)定人血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中CEA含量。說(shuō)明1.試劑盒保存:-20℃(較長(zhǎng)時(shí)間不用時(shí));2-8℃(頻繁使用時(shí))。2.濃洗滌液低溫保存會(huì)有鹽析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)2012/04/25
實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)實(shí)時(shí)熒光定量PCR原理所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,zui后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。1.Ct值的定義在熒光定量PCR技術(shù)中,有一個(gè)很重要的概念--Ct值。C代表Cycle,t代表threshold,Ct值的含義是:每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定的域值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)(如圖1所示)。2.熒光域值(threshold)的設(shè)定PCR反應(yīng)的前15個(gè)循環(huán)的熒光信號(hào)作為熒光本底信號(hào),熒光域值的缺
豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒2012/04/23
豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒采用間接ELISA方法檢測(cè)血清中豬流感病毒H1N1的抗體。本試劑盒敏感性達(dá)92%,比常規(guī)的血凝抑制試驗(yàn)敏感性高10倍;特異性為100%。具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán),是國(guó)家*的ELISA抗體檢測(cè)試劑盒價(jià)格遠(yuǎn)低于國(guó)外同類產(chǎn)品,具有較強(qiáng)的市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)性操作簡(jiǎn)單,2~3個(gè)小時(shí)即可得到結(jié)果,樣品處理量大豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒使用說(shuō)明書(shū)【獸用名稱】通用名:豬流感病毒H1亞型ELISA抗體檢測(cè)試劑盒商品名:無(wú)英文名:H1SubtypeSwineInfluenza
沙眼衣原體抗體IgG檢測(cè)試劑盒(膠體金法)2012/04/19
沙眼衣原體抗體IgG檢測(cè)試劑盒(膠體金法)說(shuō)明書(shū)【產(chǎn)品名稱】沙眼衣原體抗體IgG檢測(cè)試劑盒(膠體金法)【包裝規(guī)格】24人份/盒48人份/盒【預(yù)期用途】用于檢測(cè)試驗(yàn)血清中的沙眼衣原體抗體IgG?!緳z驗(yàn)原理】用沙眼衣原體抗原固相硝酸纖維素膜,應(yīng)用滲濾式間接法原理,檢測(cè)血清中沙眼衣原體抗體IgG?!局饕M成成份】1、反應(yīng)板24份或48份2、試劑Ⅰ1瓶0.02mol/LPH7.4PBS3、試劑Ⅱ1瓶膠體金標(biāo)記物【儲(chǔ)存條件及有效期】產(chǎn)品應(yīng)儲(chǔ)存在2℃~8℃條件中,不能冷凍;有效期24個(gè)月?!緲颖疽蟆?、血
大鼠中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶ELISA試劑盒2012/03/16
大鼠(Rat)中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:NE試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知NE濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將NE和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中NE的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48
大鼠(Rat)內(nèi)脂素(Visfatin)ELISA 檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)2012/03/15
大鼠(Rat)內(nèi)脂素(Visfatin)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:Visfatin試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知Visfatin濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將Visfatin和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中Visfatin的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2
大鼠(Rat)基質(zhì)金屬蛋白酶9 (MMP-9) ELISA 檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)2012/03/14
大鼠(Rat)基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA檢測(cè)試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:MMP-9試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知MMP-9濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將MMP-9和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中MMP-9的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配
大鼠(Rat) α防御素3(α-defensins-3) ELISA 檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)2012/03/07
本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:α-defensins-3試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知α-defensins-3濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將α-defensins-3和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中α-defensins-3的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配
大鼠 (Rat) 五-羥色胺 (5-HT) ELISA 檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)2012/03/06
本試劑僅供研究使用標(biāo)本:組織勻漿試驗(yàn)原理:5-HT試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知5-HT濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將5-HT和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中5-HT的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型
大鼠 (Rat) 血管活性腸肽(VIP)ELISA 檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)2012/03/05
本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:VIP試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知VIP濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將VIP和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中VIP的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜
牛(Cattle)抑制素B (Inhibin B) ELISA 檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)2012/02/28
本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:InhibinB試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知InhibinB濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將InhibinB和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中InhibinB的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊
牛(Cattle)去甲腎上腺素(NOR) ELISA 檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)2012/02/27
本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:NOR試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知NOR濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將NOR和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中NOR的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜
雞(Chicken) 甲狀腺素(T4) ELISA 檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)2012/02/22
本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:T4試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知T4濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將T4和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中T4的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用型塑料膜板蓋1塊
雞 (Chicken) 3-羥甲基戊二酰輔酶A還原酶 (HmgR) ELISA 檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)2012/02/21
本試劑僅供研究使用標(biāo)本:細(xì)胞上清液試驗(yàn)原理:HmgR試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知HmgR濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將HmgR和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HmgR的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用
猴(Monkey)白細(xì)胞介素-1 (IL-1) ELISA 檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)2012/02/20
本試劑僅供研究使用標(biāo)本:血清或血漿試驗(yàn)原理:IL-1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知IL-1濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將IL-1和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過(guò)的HRP。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中IL-1的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板(96T)半塊板(48T)即用
免疫球蛋白提?。哼B續(xù)提取免疫球蛋白2012/02/16
(一)試劑及配制1.飽和硫酸銨液2.各種磷酸鹽緩沖液⑴0.2mol/L原液A液:0.20Mol/LNaH2PO4液NaH2PO4·H2O31.20gH2O1000mlB液:0.20Mol/LNa2HPO4液Na2HPO4·12H2O71.7gH2O1000ml⑵0.10Mol/LpH8.0PB液A液:53mlB液:947mlH2O加至2000ml⑶0.005Mol/LpH8.0PB液取0.10Mol/LpH8.0PB液100ml,加H2O至2000ml⑷0.025Mol/LpH8.0PB液取0.
抗酶抗體及酶-抗酶復(fù)合物的制備2012/02/15
抗酶抗體的優(yōu)點(diǎn),在于酶和抗體結(jié)合時(shí),不需要通過(guò)化學(xué)交聯(lián)劑交聯(lián),抗體的失活少。在酶復(fù)合物形成后,同時(shí)就具有酶的活性,遇到相應(yīng)的底物即呈現(xiàn)催化顯色作用。必須注意,抗酶抗體必須用與*抗體同種來(lái)源的動(dòng)物制備。(一)抗酶抗體的制備于家兔的兩個(gè)后足掌內(nèi)各注入弗氏*佐劑(含活卡介苗12mg/ml)和過(guò)氧化物(5mg/ml)的等量混合乳化液0.5ml,兩星期后,于兩側(cè)腘淋巴結(jié)內(nèi)注入同樣液體。一周后靜脈注射0.2ml~0.4ml,過(guò)氧化物酶液(同樣濃度),并同樣強(qiáng)化2-3次,末次注射后一周驗(yàn)血、分離血清即為過(guò)氧化
豚鼠T淋巴細(xì)胞的測(cè)定2012/02/14
玫瑰花環(huán)試驗(yàn),又稱為花結(jié)試驗(yàn)。是測(cè)定淋巴細(xì)胞數(shù)量和功能的一種方法。人類T和B淋巴細(xì)胞表面具有不同的受體。由于人類T淋巴細(xì)胞表面具有與綿羊紅細(xì)胞結(jié)合的受體,能與綿羊紅細(xì)胞非特異性結(jié)合,形成E花環(huán),因此,T細(xì)胞也成為紅細(xì)胞花瓣形成細(xì)胞。根據(jù)E—玫瑰花環(huán)形成率,可以間接判斷機(jī)體細(xì)胞免疫力。目前,已廣泛應(yīng)用于臨床,作為測(cè)定人群免疫狀態(tài)的一個(gè)指標(biāo)。材料:1.肝素(100單位/毫升)2.0.5%兔紅細(xì)胞懸液(用Hanks液配制)3.吸收過(guò)的胎牛血清:取經(jīng)56℃30分鐘加熱滅活后的胎牛血清加半量壓積兔紅細(xì)胞混
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