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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
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Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)之前請充分做好這些準(zhǔn)備2021/03/11
在一項(xiàng)完整的實(shí)驗(yàn)中,前期的準(zhǔn)備是萬不能馬虎的。上海恒遠(yuǎn)技術(shù)員根據(jù)自身經(jīng)驗(yàn)對實(shí)驗(yàn)操作技巧做出整理:1.各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等。2.上海恒遠(yuǎn)提醒您應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。3.應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。4.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1:19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液;5.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1:4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液。6.使用之前仔細(xì)閱讀說明書,按說明書確定所有試
如何驗(yàn)證ELISA酶標(biāo)板可靠性?2021/03/10
隨著科研事業(yè)的崛起,越來越多的人選擇ELISA檢測法來做實(shí)驗(yàn),雖說ELISA實(shí)驗(yàn)的原理及操作簡單,但是由于實(shí)驗(yàn)的特殊性,各個(gè)方法也都是影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素之一。有操作員反應(yīng):做了很多次ELISA實(shí)驗(yàn),每次都能夠得到線性比較好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,但是同樣濃度的標(biāo)準(zhǔn)品每次的OD值都不一致,猜可能是酶標(biāo)板的問題,有什么方法可以快速驗(yàn)證酶標(biāo)板的可靠性嗎?我公司實(shí)驗(yàn)技術(shù)專員解讀【ELISA酶標(biāo)板可靠性】的驗(yàn)證原理:ELISA本身靈敏性很高,每次做出來的值不一樣很正常,特別是od值比較大的時(shí)候更是差別很大,但是只要
恒遠(yuǎn)產(chǎn)品文獻(xiàn):大腸桿菌顯色培養(yǎng)基引用文獻(xiàn)2021/03/09
【文獻(xiàn)標(biāo)題】EffectsofLactococcuslactisMG1363producingfusionproteinsofbovinelactoferricin-lactoferrampinongrowth,intestinalmorphologyandimmunefunctioninweanedpiglet【作者】LiyingSong,XinyuanQiao,DongfangZhao,et.al【作者單位】東北農(nóng)業(yè)大學(xué)(NortheastAgriculturalUniversity)【文獻(xiàn)
細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)黑點(diǎn)是什么原因?2021/03/09
近日有一位實(shí)驗(yàn)新手提出疑問:細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)黑點(diǎn)是什么情況?是不是被污染了?此問題也是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的常見問題之一,我公司技術(shù)員針對此問題解析道:一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn),首先,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài),黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染,微生物則會大量繁殖,培養(yǎng)基就會迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。而如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,那么,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):1.細(xì)胞生長過老,破碎的細(xì)胞殘?。?
保存血清之一問一答2021/03/08
在保存血清的過程中,相信大家難免會想到一些問題,比如:溫度多少合適?為什么要熱滅活?等等。產(chǎn)品的保存方法與質(zhì)量有著莫大的關(guān)系,今天我公司技術(shù)員特別將常見問題整理出分享給大家:1.問:保存血清比較好的方法是怎樣的呢?答:我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃時(shí),請勿超過一個(gè)月。若您一次無法用完一瓶,建議您無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。2.問:如何解凍血清才不會使產(chǎn)品品質(zhì)受損?答:我們建議您將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融。但必須
恒遠(yuǎn)產(chǎn)品技術(shù)文獻(xiàn):試劑-氨基甲酸乙酯引用文獻(xiàn)2021/03/05
【文獻(xiàn)標(biāo)題】AstragaluspolysaccharidesaffectinsulinresistancebyregulatingthehepaticSIRT1-PGC-1α/PPARα-FGF21signalingpathwayinmaleSpragueDawleyratsundergoingcatch-upgrowth【作者】CHENGYINGGU,YIPENGZENG,ZHAOSHENGTANG,et.al【作者單位】ShanghaiPudongHospital(上海市浦東醫(yī)院)【文獻(xiàn)中
酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)常見問題解析2021/03/05
酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)常見問題因靈敏度高,特異性強(qiáng)在生物科研上得到了廣泛的認(rèn)可,但對初學(xué)者而言,如不注意實(shí)驗(yàn)操作過程中的各個(gè)環(huán)節(jié),可能會對終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生比較大的影響,比如實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)白板,顯色弱靈敏度低,花板無梯度背景高等現(xiàn)象。下面對以上實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象進(jìn)行一一解析。1.白板現(xiàn)象在完成所有實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行底物TMB溶液顯色后,酶標(biāo)板中所有孔的顏色均為無色,即無信號呈現(xiàn)。出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因:試劑已過保質(zhì)期,不同批次稀釋液交叉使用。錯(cuò)加漏加檢測A,檢測B或者底物溶液TMB。洗板或者加樣過程中,酶標(biāo)記物被污染失活,稀釋液中
上海恒遠(yuǎn)為您簡述繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的要點(diǎn)2021/03/05
標(biāo)準(zhǔn)曲線法也稱為外標(biāo)法或直接比較法,是一種簡便、快速的定量方法,在ELISA實(shí)驗(yàn)中比較常用的一種分析方法。一、做標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測時(shí)有幾個(gè)問題需要注意ELISA試劑盒1、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事,否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無從談起。2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實(shí)驗(yàn)樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),人ELISA試劑盒包括上限和下限。而對于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,盡量要使實(shí)驗(yàn)樣
ELISA實(shí)驗(yàn)之空白孔的設(shè)置2021/03/04
今天上海恒遠(yuǎn)為大家講解ELISA實(shí)驗(yàn)技巧中的空白孔對照。ELISA試劑盒ELISA空白對照有幾種:1.空氣空白水空白:一般是用于儀器調(diào)零的,所有孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值。2.底物空白:一般是用于防止底物弱顯色所造成的讀數(shù)偏高,同樣所有孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值(只加底物和終止液)3.酶空白:一般在2步法實(shí)驗(yàn)中使用,主要是看酶是否和板有非特異性結(jié)合的,一般不做這個(gè)。ELISA空白孔一般設(shè)一個(gè),這是為了減除顯色液的OD值。而陰性和陽性標(biāo)準(zhǔn)品比較好是設(shè)2個(gè)復(fù)孔,雖然有點(diǎn)浪費(fèi),但為了確保實(shí)驗(yàn)的可靠性,我認(rèn)為還是很有必
蛋白質(zhì)提純的五種方法你都知道嗎?2021/03/04
當(dāng)科研學(xué)者們?yōu)榱搜芯磕骋粋€(gè)蛋白質(zhì),必須首先將該蛋白質(zhì)從其他蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)分子中純化出來,下面就是上海恒遠(yuǎn)整理的關(guān)于蛋白質(zhì)的提純方法,只作較簡要介紹供廣大科研愛好者參閱。1、超速離心法此法分離和純化抗原的原理是利用各顆粒在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的顆粒處于不同密度梯度層內(nèi),達(dá)到彼此分離的目的。常用的密度梯度介質(zhì)有蔗糖、甘油、CsCl等。用超速離心或梯度密度離心分離和純化抗原時(shí),除個(gè)別成分外,極難將某一抗原成分分離出來,故只用于少數(shù)大分子抗原的分離,如IgM、C1q,甲狀腺球蛋白
關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)這幾點(diǎn)一定要注意了2021/03/02
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)又叫細(xì)胞克隆技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)指的是細(xì)胞在體外條件下的生長,在培養(yǎng)的過程中細(xì)胞不再形成組織(動(dòng)物),今天的文章中跟大家介紹一些關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識!一、細(xì)胞培養(yǎng)的基本概念體外培養(yǎng)(invitroculture)包括所有結(jié)構(gòu)層次的培養(yǎng),即:組織培養(yǎng)(tissueculture)、細(xì)胞培養(yǎng)(cellculture)和器官培養(yǎng)(organculture)。細(xì)胞培養(yǎng)(Cellculture)指從生物機(jī)體取出部分組織分散成單個(gè)細(xì)胞或直接從機(jī)體取出單個(gè)細(xì)胞,也可把體外培養(yǎng)細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞在體
ELISA常用的幾個(gè)方法優(yōu)缺點(diǎn)你都知道嗎?2021/03/02
ELISA是一種廣泛應(yīng)用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)程序,通常是把蛋白、抗體、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗體(captureAb)固定在固相載體上,再加入一級檢測抗體(primarydetectionAb),形成一個(gè)抗原抗體的復(fù)合物。如果該抗體已經(jīng)用酶(enzyme)標(biāo)記了,即可用來直接測定抗原的量,若無,則可利用另一個(gè)酶標(biāo)記的二級抗體來測定抗原的量。測定抗原量的方法是加入該酶的底質(zhì)(substrate),作用后產(chǎn)生出現(xiàn)的顏色深淺和樣本中的抗原
恒遠(yuǎn)產(chǎn)品文獻(xiàn):小鼠CRH,ACTH,CORT ELISA試劑盒引用文獻(xiàn)2021/03/02
【文獻(xiàn)標(biāo)題】Reducedgrowthcapacityofpreimplantationmouseembryosinchronicunpredictablestressmodel【作者】XiaoliZhao,RuihongMa,XiaoyuZhang,et.al【作者單位】天津中醫(yī)藥大學(xué)第yi附屬醫(yī)院(FirstTeachingHospitalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine)【文獻(xiàn)中引用產(chǎn)品】小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)E
ELISA常用檢測法—雙抗體夾心法原理介紹2021/03/01
做ELISA實(shí)驗(yàn),有幾種常見的實(shí)驗(yàn)方法,他們分別是競爭法、捕獲法、間接法、夾心法、而夾心法又可以分為雙抗體夾心法和雙抗原夾心法!在今天的文章中,將詳細(xì)得跟大家講述雙抗體夾心法!雙抗體夾心法,其基本原理是將一定量的包被抗體以物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面,加入無關(guān)蛋白載體封閉未結(jié)合位點(diǎn),然后加入待檢標(biāo)本,通過加入檢測抗體,酶標(biāo)記第二抗體后用TMB底物顯色,微孔板中顏色的深淺與待測物的濃度呈正相關(guān)。該方法的適用條件是:含有多個(gè)抗原表位的大分子物質(zhì)。因?yàn)檫@種檢測方法需要兩種抗體,所以就涉及抗體
常見細(xì)胞因子開專場啦!2021/03/01
細(xì)胞因子檢測試劑盒種類比較多,如白介素、選擇素、集落刺激因子,腫瘤壞死因子,干擾素,轉(zhuǎn)化生長因子,趨化因子,細(xì)胞因子受體,粘附分子,生長因子,凋亡因子等等!今天的文章中,上海恒遠(yuǎn)將為大家詳細(xì)的介紹幾種常見的細(xì)胞因子!一、白介素1、IL-2(CIK:24h后1000u/ml添加)(1)誘導(dǎo)細(xì)胞毒作用,接受預(yù)刺激信號的CD8+T細(xì)胞可以接受IL-2的作用活化為CTL,發(fā)揮細(xì)胞毒作用;在一定條件下,CD4+T細(xì)胞可以接受IL-2的誘導(dǎo)而具有殺傷作用。(2)NK細(xì)胞是唯yi正常情況下表達(dá)IL-2R的淋巴
學(xué)會以下7步,讓你做出完美ELISA實(shí)驗(yàn)2021/02/26
每一位科研人員都希望自己做的實(shí)驗(yàn)?zāi)艿玫揭粋€(gè)完美的結(jié)果,但是在操作過程中難免出現(xiàn)一些或大或小的問題。ELISA檢測可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研生產(chǎn)中廣泛靈敏的技術(shù)手段,但是也免不了出現(xiàn)花板,假陽性,全顯色,全部顯色,顯色比空白還低等等的問題。今天上海恒遠(yuǎn)為您總結(jié)7步ELISA檢測實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn),希望對ELISA新手們有所幫助。1、包被原的性質(zhì)很重要,蛋白濃度,是否降解,這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識別,所以保存抗原很重要,我做重組蛋白時(shí),師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理。還有有的包被
上海恒遠(yuǎn)為您分享:細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇2021/02/26
適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。今天的技術(shù)文章中就為大家講解一下細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇操作方法!操作步驟(一)細(xì)胞凍存1.配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;2.取對數(shù)生長期的細(xì)胞,用胰蛋白酶把單層生長的細(xì)胞消化下來,懸浮生長的細(xì)胞則直接將細(xì)胞移至15ml離心管中;3.離心1000rpm,5min;4.去除胰蛋白酶及舊的培養(yǎng)液,加入適量配
如何減少ELISA實(shí)驗(yàn)誤差,我有妙招!2021/02/25
細(xì)節(jié)決定成敗,在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中,誤差分有系統(tǒng)誤差、偶然誤差、過失誤差,而一個(gè)小小的誤差主意能夠影響到實(shí)驗(yàn),很多人往往因?yàn)橐粋€(gè)小細(xì)節(jié),一個(gè)誤差沒能讓實(shí)驗(yàn)成功。那么實(shí)驗(yàn)誤差概率如何縮?。拷裉焐虾:氵h(yuǎn)生物公司教您一些妙招優(yōu)化ELISA,減少誤差:①:檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。②:使用校對過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對定量檢測尤為重要。③:仔細(xì)閱讀說明書,嚴(yán)格
植物葉綠素(Chlorophyll)ELISA試劑盒引用文獻(xiàn)2021/02/25
【文獻(xiàn)標(biāo)題】Cytological,physiological,andtranscriptomicanalysesofgoldenleafcolorationinGinkgobilobaL【作者】Wei-xingLi,Shun-boYang,ZhaogengLu,et.al【作者單位】揚(yáng)州大學(xué)(YangzhouUniversity)【文獻(xiàn)中引用產(chǎn)品】植物葉綠素(Chlorophyll)ELISA試劑盒【DOI】doi.org/10.1038/s41438-018-0015-4【影響因子(IF)】
細(xì)胞培養(yǎng)室的操作環(huán)境很重要2021/02/24
細(xì)胞培養(yǎng)室和設(shè)計(jì)原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔,空氣清新,干燥和無煙塵。細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)計(jì)原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動(dòng)的內(nèi)側(cè),常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室。一、常用設(shè)施及設(shè)備1.超凈工作臺:也稱凈化工作臺,分為側(cè)流式,直流式和外流式三大類。2.無菌操作間:一般由更衣間,緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱,離心機(jī),倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱,冷藏器及消毒好的無菌物品等。3.操作間:普通培養(yǎng)箱,離心機(jī),水浴鍋,定時(shí)鐘,普通
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