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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
恒遠(yuǎn)提醒:ELISA實(shí)驗(yàn)Z后一次洗滌*很重要2015/11/25
我們常說(shuō)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的洗滌非常重要,這一過(guò)程不是是反應(yīng)聚,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵!在ELISA測(cè)定的反應(yīng)過(guò)程中應(yīng)盡量避免非特異性吸附,應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)。上海恒遠(yuǎn)生物提醒您重點(diǎn)注意:洗滌如不*,特別在zui后一次,如有酶結(jié)合物的非特異性吸附,將使空白值升高。另外,在間接法中如血清標(biāo)本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈,也將與酶標(biāo)抗體作用而產(chǎn)生干擾。上海恒遠(yuǎn)為您整理分享,ELISA洗滌一般可采用的方法有:1.吸干孔內(nèi)反應(yīng)液;2.將洗滌液注滿板孔;3.放置2mi
上海恒遠(yuǎn)解析造成ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品溢值的原因2015/11/18
ELISA實(shí)驗(yàn)步驟繁瑣,操作者們所犯的問(wèn)題也各有不同。近日,南京大學(xué)周老師到我司何咨詢(xún)問(wèn)道:為什么ELISA標(biāo)準(zhǔn)品會(huì)出現(xiàn)“溢值”的現(xiàn)象呢?看到問(wèn)題后,何立即轉(zhuǎn)到技術(shù)部,隨后上海恒遠(yuǎn)公司技術(shù)部給周老師去,解析造成ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品溢值的原因:①樣品/標(biāo)準(zhǔn)品不正確稀釋。②孵育時(shí)間/溫度不正確。③在孵育時(shí)為蓋上酶聯(lián)板覆蓋物:在孵育時(shí)需蓋上酶聯(lián)板覆蓋物,以防止液體蒸發(fā)或孵育期間的污染。每個(gè)試劑盒內(nèi)均有足夠數(shù)量的酶聯(lián)板覆蓋物。④檢測(cè)波長(zhǎng)不正確:要保證分光光度劑的檢測(cè)波長(zhǎng)是正確的。⑤TMB底物的顯色時(shí)間
恒遠(yuǎn)技術(shù)分析:elisa實(shí)驗(yàn)陰性對(duì)照需要做梯度稀釋嗎2015/11/11
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司主要ELISA試劑盒,主要合作對(duì)象是學(xué)校,醫(yī)院、研究所等科研單位。學(xué)??蛻?hù)以新手為主。所以常有客戶(hù)咨詢(xún)未處理陰性對(duì)照需要做梯度稀釋嗎:以小鼠血清為例,小鼠的血清是直接拿來(lái)作為陰性對(duì)照,還是要進(jìn)行稀釋?zhuān)咳绻♂專(zhuān)撛趺聪♂尣趴茖W(xué)?從理論上說(shuō),陰性對(duì)照的血清,不論稀釋多少倍,OD值都不應(yīng)該有明顯變化。有兩種可能:1.正常小鼠本身含有該抗原的抗體;2.ELISA過(guò)程中非特異性反應(yīng)去除不干凈,如洗板、孵育溫度時(shí)間、抗原抗體濃度等,這樣稀釋倍數(shù)越高的樣本其對(duì)結(jié)果的影響就越小,就呈
上海恒遠(yuǎn)生物血清載脂蛋白A1試劑盒性能評(píng)價(jià)2015/11/05
上海恒遠(yuǎn)生物血清載脂蛋白A1試劑盒性能評(píng)價(jià)載脂蛋白A1(apolipoproteinA1,ApoA1)是高密度脂蛋白(HDL)的主要結(jié)構(gòu)蛋白。其含量基本可反應(yīng)HDL顆多少。血清/血漿樣品ApoA1減少提示心血管(冠心病),腦血管(腦血栓)疾病的危險(xiǎn)性增加,常被作為心腦血管疾病的危險(xiǎn)性評(píng)價(jià)的靈敏指標(biāo)之一,ApoA1含量的測(cè)定,對(duì)預(yù)防和評(píng)價(jià)心腦血管疾病比其它脂類(lèi)和脂蛋白更有效。目前zui為常用測(cè)定ApoA1的方法為免疫比濁法,主要是利用抗原與相應(yīng)的抗體發(fā)生特異性反應(yīng),形成抗原-抗體復(fù)合物,并形成一定
技術(shù)講解:為何Elisa試劑盒OD值不正常2015/11/03
由于Elisa的操作步驟中影響反應(yīng)因素較多,在實(shí)驗(yàn)問(wèn)題中出現(xiàn)了一些大大小小的問(wèn)題。然而這些問(wèn)題也都是可以避免的,熟練掌握ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技巧,實(shí)驗(yàn)輕松完成。近日,南京大學(xué)李同學(xué)實(shí)驗(yàn)之后分析OD不正常并提出問(wèn)題:OD值不正常是什么情況?有哪些原因?應(yīng)如何解決?為此我司技術(shù)為Elisa試劑盒OD值不正常找原因:1.試劑盒未回溫(對(duì)應(yīng)解決方法:試劑盒回溫到25℃);2.溫度控制不好(對(duì)應(yīng)解決方法:控制正確溫度);3.孵育時(shí)間不準(zhǔn)確(對(duì)應(yīng)解決方法:控制孵育時(shí)間);4.洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因及解決辦法2015/10/28
ELISA試劑盒試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的應(yīng)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)效果影響較大,如不注意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。上海恒遠(yuǎn)將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的原因及解決辦法總結(jié)于下。ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因及解決辦法分析:1選擇試劑選擇質(zhì)量?jī)?yōu)良的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。2加樣可能原因:1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣;2)手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特
Gibco胎牛血清使用時(shí)需注意哪些2015/10/21
Gibco胎牛血清現(xiàn)在在生物行業(yè)中使用率非常高,而且使用的時(shí)候強(qiáng)度高,為了讓更多的人了解Gibco胎牛血清,下面就和大家介紹一下Gibco胎牛血清的使用注意事項(xiàng):1、解凍血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-2O。C至4。C至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20。C至37。C),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2、解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生.3、請(qǐng)勿將血清置于37。C太久。若在37。C放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,
技術(shù)講壇:ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制要點(diǎn)2015/10/14
許多試劑檢測(cè)都涉及到標(biāo)準(zhǔn)曲線的問(wèn)題,ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會(huì)直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗,那么究竟如何繪制或制作標(biāo)準(zhǔn)曲線呢?一、做標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測(cè)時(shí)有幾個(gè)問(wèn)題需要注意1、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來(lái)的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事,否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)從談起。2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),人ELISA試劑盒包括上限和下限。而對(duì)于呈
今日關(guān)注:細(xì)胞培養(yǎng)的天然培養(yǎng)基是什么2015/10/10
什么是細(xì)胞培養(yǎng)的天然培養(yǎng)基呢,今天上海恒遠(yuǎn)告訴您。牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,具有極為重要的功能,具體功能如下:1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3.有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。4.是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來(lái)源。5.起酸堿度緩沖液作用6.提供蛋白酶抑制劑
浙江大學(xué)點(diǎn)贊我司ELISA技術(shù)服務(wù)2015/09/28
上周五,浙江大學(xué)李老師在我司成功訂購(gòu)R&D品牌進(jìn)口分裝ELISA試劑盒后,致電何說(shuō)道:“有關(guān)Elisa孵育、洗板、顯色的常見(jiàn)問(wèn)題和解決方案能發(fā)我一份嗎?避免實(shí)驗(yàn)出錯(cuò)。"聽(tīng)到李老師的問(wèn)題反饋,何當(dāng)即了技術(shù)部,根據(jù)上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)員的分析,總結(jié)出以下內(nèi)容:一、孵育常見(jiàn)問(wèn)題:1.孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā),吸附于孔壁,難于清洗*;2.孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?,難以清洗*。解決方案:1.貼封片或加蓋;2.按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間。二、洗板常見(jiàn)問(wèn)題:1.采用手工洗
豚鼠血清主要成份及注意事項(xiàng)2015/09/21
血清,指血液凝固后,在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞的起到某些保護(hù)作用。豚鼠血清的主要成份和注意事項(xiàng)有哪些?上海恒遠(yuǎn)與您一起看看!豚鼠血清主要成份:血清是由血漿去除纖維蛋白原而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營(yíng)養(yǎng)條件不同而異。血清是血漿中不含
培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢的原因分析2015/09/15
培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢的原因分析可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷氨眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷氨酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無(wú)抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃;培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清*培養(yǎng)液在2-8℃保存,
前列腺特異抗原(PSA)檢測(cè)意義與方法2015/09/07
前列腺特異抗原(PSA)檢測(cè)意義與方法PSA是一種有237個(gè)氨基酸和4個(gè)碳水化合物側(cè)鏈的單鏈糖蛋白。在正常情況下,PSA產(chǎn)生于前列腺管的上皮細(xì)胞,主要存在于正?;蚍蚀蟮那傲邢俸颓傲邢侔≒CA)的組織;它是由雄激素通過(guò)雄激素受體的調(diào)節(jié)直接分泌到前列腺導(dǎo)管系統(tǒng)內(nèi)。PSA為一種中性絲氨酸蛋白激酶,有酶的活性,但活性的水平較低,它能夠溶解精液中的蛋白質(zhì),在精囊包的分裂和精液的液化上發(fā)揮生理作用。正常人血清中有較低含量的PSA,它是由正常前列腺導(dǎo)管系統(tǒng)的周?chē)h(huán)境的屏障作用在維持[1]。我們測(cè)定了部分前列
如何降低ELISA實(shí)驗(yàn)的背景,恒遠(yuǎn)教你方法2015/09/06
ELISA實(shí)驗(yàn)的原理似乎很簡(jiǎn)單,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗滌和封閉。然而,即使是平淡無(wú)奇的洗滌和封閉,如果做得不太好,也有可能毀了整個(gè)實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),我們是否能獲得有意義的信息,ELISA試劑盒這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。ELISA試劑盒背景噪音會(huì)影響您對(duì)結(jié)果的判斷。如何降低ELISA的背景,恒遠(yuǎn)教你方法。洗滌很重要洗滌步驟看似很無(wú)聊,其實(shí)很重要,因?yàn)槿绻唇Y(jié)合的材料(如非特異結(jié)合的抗體或檢測(cè)試劑)殘留在微孔板中,那么它會(huì)增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的
ELISA實(shí)驗(yàn)中加樣可能碰到的問(wèn)題及解決方法2015/08/26
在ELISA實(shí)驗(yàn)中一般有3次加樣步驟,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強(qiáng)烈振蕩。在加樣的過(guò)程中會(huì)碰到什么問(wèn)題呢?讓我們一起看一下實(shí)驗(yàn)過(guò)程中加樣可能碰到的問(wèn)題:1、過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));2、手工操作中,加樣板過(guò)多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間;3、加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。.血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣。相應(yīng)解決辦法:1、標(biāo)本為血清:將血液先自然存放1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心
恒遠(yuǎn)淺析單克隆抗體的優(yōu)勢(shì)2015/08/17
由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原表位的抗體,稱(chēng)為單克隆抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來(lái)制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為B細(xì)胞雜交瘤。用具備這種特性的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群,可制備針對(duì)一種抗原表位的特異性抗體即單克隆抗體。單克隆抗體的優(yōu)勢(shì)有哪些呢,讓我們一起關(guān)注以下內(nèi)容單克隆抗體由于純度高、特異性強(qiáng)、可以提高各種血清學(xué)方法檢測(cè)抗原的敏感性及特異性,但單克隆抗體多為雙價(jià)抗體,與
尿微量白蛋白檢測(cè)及臨床應(yīng)用2015/08/11
尿微量白蛋白檢測(cè)及臨床應(yīng)用尿微量白蛋白指高于正常,但常規(guī)方法無(wú)法檢出的白蛋白尿,他的檢測(cè)作為早期腎損害診斷的重要指標(biāo)已受到廣泛重視,測(cè)定方法包括放射免疫法、ELASA法等。應(yīng)用較多的是免疫透射比濁法,但報(bào)告方式不一,有的以每升尿中白蛋白量表示,有的以24小時(shí)排泄量表示,常用的報(bào)告方式是以白蛋白/肌酐比值報(bào)告。我們以不同表示方法對(duì)正常人尿白蛋白的正常值進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)分析,并對(duì)部分高血壓、糖尿病患者進(jìn)行測(cè)定,現(xiàn)報(bào)告如下。一、材料與方法1.儀器與方法:尿微量白蛋白測(cè)定試劑盒,肌酐測(cè)定試劑盒均購(gòu)于中生公司。
了解人血清在實(shí)驗(yàn)中的作用2015/08/04
人血清提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類(lèi)物質(zhì)、核酸衍生物等,是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。提供激素和各種生長(zhǎng)因子:胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素(氫化可松、地塞米松)、類(lèi)固醇激素(雌二醇、睪酮、孕酮)等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。提供結(jié)合蛋白:結(jié)合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質(zhì),如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等,轉(zhuǎn)鐵蛋白攜帶鐵。結(jié)合蛋白在細(xì)胞代謝過(guò)程中起重要作用。提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷。人血清對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用:有一些細(xì)胞,如
赤蘚紅B鈉鹽用途與說(shuō)明2015/07/29
赤蘚紅B鈉鹽用途與說(shuō)明赤蘚紅B鈉鹽用途:生物染色劑ProductName:ErythrosinBsodiumsalt別名:酸性紅51;赤蘚紅CAS號(hào):568-63-8分子式:C20H6I4Na2O5分子量:879.86MDL號(hào):MFCD00144257介紹:ErythrosinBsodiumsaltiscertifiedforuseintheJacksonstainforplantanatomy,Kreyberg'smethodforkeratinandmucus,andasacounterst
進(jìn)口科研血清當(dāng)選上海恒遠(yuǎn)的幾大原因2015/07/23
近些年來(lái),越來(lái)越多的實(shí)驗(yàn)室在需要購(gòu)買(mǎi)血清產(chǎn)品時(shí),點(diǎn)名購(gòu)買(mǎi)上海恒遠(yuǎn)生物公司產(chǎn)品。我公司的血清產(chǎn)品品牌主要包括了HyClone、GIBCO、NQBB、Sigma等,廣泛用于各種細(xì)胞培養(yǎng),包含任何干細(xì)胞系的培養(yǎng)。下面是進(jìn)口科研血清當(dāng)選上海恒遠(yuǎn)的幾大原因:一、血請(qǐng)采集后未經(jīng)過(guò)陳化(Pre-Aged),充分保留大分子蛋白,指標(biāo)好,內(nèi)毒素低,利于細(xì)胞的生長(zhǎng),不會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞過(guò)早的凋亡,其他重要指標(biāo)都處于*水平,檢測(cè)方法*符合標(biāo)準(zhǔn)或美國(guó)藥典。二、血清種類(lèi)齊全,可以滿足所有血清用戶(hù)的需求。三、多種血清都提供了熱滅活
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