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科研專家對(duì)Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)講談2015/07/20: 根據(jù)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，大家都或多或少掌握了一些小技巧。zui終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是受整個(gè)操作過程及試劑本身影響的，所系還要多學(xué)習(xí)，多參考，讓實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加。Elisa檢測(cè)系統(tǒng)是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研生產(chǎn)中zui為靈敏的技術(shù)手段，有著十分重要的作用。下面是上海恒遠(yuǎn)生物科研專家對(duì)Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的經(jīng)驗(yàn)講談：一、包被原的性質(zhì)很重要蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時(shí)，師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理。還有有的包被原可能不是蛋白，對(duì)于生物素

上海恒遠(yuǎn)為您解說二抗的主要應(yīng)用2015/07/13: 如今的科研事業(yè)越為廣泛，實(shí)驗(yàn)室抗體試劑的應(yīng)用發(fā)展也越來(lái)越好。今天上海恒遠(yuǎn)為您解說二抗的主要應(yīng)用，還包括了了二抗的選擇，一起來(lái)看下：1.二抗的主要應(yīng)用可以應(yīng)用到幾乎所有類型的免疫檢測(cè)中，尤其是Westernblot、免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)。事實(shí)上，二抗在Elisa及流式細(xì)胞術(shù)中應(yīng)用也很廣泛，不僅用于科學(xué)研究，而且廣泛的應(yīng)用于臨床分析和疾病診斷。比較而言，二抗在免疫沉淀中的應(yīng)用相對(duì)較少。以下內(nèi)容是基于對(duì)所收集的二抗信息進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析后得出的一些結(jié)論，對(duì)于您在具體的實(shí)驗(yàn)中如何選擇的抗體具有借鑒作用。

技術(shù)小組對(duì)Elisa檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn)評(píng)價(jià)2015/07/09: 在上一期的技術(shù)分享內(nèi)容中，講的是Elisa試劑盒被冷凍后是否可以繼續(xù)使用。雖然Elisa方法操作簡(jiǎn)單可靠性強(qiáng)，但在實(shí)際操作過程中還是要多加注意。今天我們一起來(lái)看看技術(shù)小組對(duì)Elisa檢測(cè)方法的優(yōu)缺點(diǎn)評(píng)價(jià)：它具有許多優(yōu)良特性。盡管有些處理需要*化條件，但只要按要求去做，就十分簡(jiǎn)單明了，并容易掌握。尤其是該方法不需要花費(fèi)大量的時(shí)間作野外觀察，供試所采集的材料可收集起來(lái)并存一段時(shí)間，特別適用于一些只取食汁液而不取食獵物硬殼的捕食者胃內(nèi)含物分析，因?yàn)楂C物的堅(jiān)硬部分沒有留在捕食者消化道或排泄物內(nèi)。同時(shí)，高

Elisa試劑盒冷凍后直接使用有影響2015/07/01: 科研試劑的保存存在一定的特殊性，很多客戶將Elisa試劑盒冷凍保存后擔(dān)心會(huì)有影響。上海恒遠(yuǎn)生物公司建議大家將試劑盒解凍后一次用完。我們知道，一般來(lái)的試劑盒保質(zhì)期在半年到一年，切不可反復(fù)凍融。Elisa試劑盒冷凍后直接使用有影響，對(duì)一些弱陽(yáng)性標(biāo)本的檢測(cè)出現(xiàn)假陰性。正確的操作方法是：先從冰箱中拿出來(lái)，在室溫下放置20分鐘以上后，再進(jìn)行測(cè)定，以使試劑盒在ELISA檢測(cè)試劑盒使用前與室溫平衡。這樣做的目的，主要是為了在后面的溫育反應(yīng)步驟中，能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度能較快地達(dá)到所要求的高度，以滿足測(cè)定要求。上

ELISA試驗(yàn)中為什么要避免產(chǎn)生氣泡2015/06/24: ELISA試驗(yàn)中為什么要避免產(chǎn)生氣泡通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍，導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使孔內(nèi)反應(yīng)不均一。包被時(shí)有氣泡的話，將導(dǎo)致包被不*實(shí)際包被量下降--弱陽(yáng)性甚至假陰性。封閉時(shí)有氣泡的話，將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在，引起非特異性結(jié)合--本底增高，假陽(yáng)性。加樣時(shí)有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽(yáng)性甚至假陰性。加二抗時(shí)有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結(jié)合--弱陽(yáng)性甚至假陰性（競(jìng)爭(zhēng)法相反----假陽(yáng)性）。加顯色液時(shí)有氣泡的話--－顯色不*。加終止液時(shí)有氣泡的話，1。不能*終止反

恒遠(yuǎn)Sigma胎牛血清對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的要求2015/06/18: 我公司代理高品質(zhì)Sigma胎牛血清，品牌保證，質(zhì)量過硬。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和生活水平的不斷提高對(duì)生物醫(yī)藥產(chǎn)品的質(zhì)量要求也越來(lái)越高，所以對(duì)制備工藝中所涉及到的各種原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求也越來(lái)越高，特別是對(duì)用于細(xì)胞培養(yǎng)基中的主要天然成份――牛血清的質(zhì)量要求也不斷提高。上海恒遠(yuǎn)Sigma胎牛血清對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的要求極為嚴(yán)格，從血清來(lái)源到產(chǎn)品質(zhì)量都有明確規(guī)定。一、血清來(lái)源：可從世界各國(guó)收集胎牛血清，但是必須符合他的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和美國(guó)農(nóng)業(yè)部進(jìn)口要求。地方當(dāng)局還不清楚本地是否有牛海綿狀病毒流行的血清不收集，有說明血清

我司Elisa技術(shù)服務(wù)被福建醫(yī)科大學(xué)點(diǎn)贊2015/06/15: 上周，福建醫(yī)科大學(xué)郭老師在通過多家Elisa試劑盒供應(yīng)商的層層對(duì)比下，選擇上海恒遠(yuǎn)生物公司“人SM試劑盒”。合作成功后，我公司業(yè)務(wù)員去給郭老師問有沒有什么產(chǎn)品疑問或?qū)嶒?yàn)問題，郭老師說想要了解一下Elisa的比色結(jié)果。聽到郭老師的問題反饋后，業(yè)務(wù)員*時(shí)間內(nèi)至公司技術(shù)部，根據(jù)上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)員的分析，總結(jié)出以下內(nèi)容：比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體，然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗(yàn)，需先將板置于標(biāo)準(zhǔn)96孔的座架中，才可進(jìn)行比色。在加底物液顯色前，先將軟板邊緣剪凈，這

Elisa標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測(cè)要點(diǎn)分享2015/06/08: Elisa中，標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算是整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程的必要步驟，也是關(guān)鍵步驟之一。今天上海恒遠(yuǎn)生物為大家?guī)?lái)了Elisa標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測(cè)要點(diǎn)分享，一起來(lái)看下吧：1.樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來(lái)的，所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事，否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)從談起。2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度，即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對(duì)于呈s型的標(biāo)準(zhǔn)曲線，盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中間坡度zui陡

羥脯氨酸（Hyp）檢測(cè)原理說明2015/06/03: 羥脯氨酸(Hyp)檢測(cè)原理說明（測(cè)培養(yǎng)細(xì)胞，培養(yǎng)液）一、原理羥脯氨酸在氧化劑的作用下所產(chǎn)生的氧化產(chǎn)物與二甲氨基苯甲醛作用呈現(xiàn)紫紅色，根據(jù)其呈色的深淺可推算出其含量。二、試劑盒組成與配制：1、試劑一：粉劑×2瓶，甲液10ml×2瓶，乙液20ml×2瓶，臨用時(shí)取粉劑一瓶，先加甲液混勻10ml充分溶解（從瓶口向內(nèi)看，*溶解完）。然后再加乙液20ml充分混勻。配好后的試劑4℃~8℃冰箱保存。注意點(diǎn)：粉劑加甲液10ml后一定一定要*溶解后才能加乙液。2、試劑二：液體60ml×1瓶，4℃冰箱避光保存。3、試

恒遠(yuǎn)技術(shù)員據(jù)自身經(jīng)驗(yàn)分析Elisa洗滌2015/05/27: 近日，我司技術(shù)部反應(yīng)，有不少客戶在Elisa試劑盒洗滌步驟中容易出錯(cuò)，從而導(dǎo)致對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響。上海恒遠(yuǎn)技術(shù)員根據(jù)自身多年經(jīng)驗(yàn)分析Elisa洗滌，在這里分享給各位朋友們！希望能夠給您的實(shí)驗(yàn)帶來(lái)幫助。洗滌步驟可降低未結(jié)合抗體所引起的背景信號(hào)，從而增加分析的信噪比。每一步之間的洗滌確保只有特異的結(jié)合事件被保留，在zui后一步產(chǎn)生信號(hào)。而不充分的洗滌會(huì)導(dǎo)致差異和高背景，從而帶來(lái)不理想的結(jié)果。本文將為你介紹一些利用自動(dòng)洗板機(jī)來(lái)洗滌Elisa平板的技巧。第二個(gè)影響洗滌效果的主要參數(shù)是洗滌循環(huán)的量。當(dāng)然，洗

各種Elisa常用方法的優(yōu)勢(shì)劣勢(shì)對(duì)比2015/05/20: 我們知道，Elisa可分為多種類型測(cè)定，是一種廣泛應(yīng)用在測(cè)定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。我公司技術(shù)部將各種Elisa常用方法的優(yōu)勢(shì)劣勢(shì)進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果如下：一、直接法(directElisa)將抗原直接固定在固相載體上，加入酶標(biāo)記的一級(jí)抗體，即可測(cè)定抗原總量，此一級(jí)抗體的特異性非常重要。1.優(yōu)勢(shì)：操作手續(xù)簡(jiǎn)短，因無(wú)須使用二抗可避免交互反應(yīng)。2.劣勢(shì)：試驗(yàn)中的一抗都得用酶標(biāo)記，但不是每種抗體都適合做標(biāo)記，費(fèi)用相對(duì)提高。二、間接法(indirectElisa)此測(cè)定方法與直接法類似，

細(xì)胞內(nèi)成分檢測(cè)樣本收集方法2015/05/19: 細(xì)胞內(nèi)成分檢測(cè)樣本收集方法細(xì)胞：檢測(cè)細(xì)胞的成份時(shí)，對(duì)于貼壁細(xì)胞，去除培養(yǎng)液，用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。加入適量裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞10秒后，細(xì)胞就會(huì)被裂解。對(duì)于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞，用PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍.加入適量裂解液,用槍吹打把細(xì)胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝然后再裂解。充分裂解后，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進(jìn)行后續(xù)操作。可用作EL

如何避免血清產(chǎn)生沉淀2015/05/11: 血清如何避免沉淀物的產(chǎn)生？我們建議您在使用血清的時(shí)候，注意下列的操作:(1)解凍血清時(shí)，請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫)，若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃)，實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。(2)解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。(3)請(qǐng)勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。(4)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以無(wú)須做此步驟。(5)若

原代細(xì)胞凍存實(shí)驗(yàn)操作步驟2015/05/06: 原代細(xì)胞凍存實(shí)驗(yàn)操作步驟1、選用生長(zhǎng)情況好，數(shù)量較多的原代細(xì)胞，凍存前一天換液一次。2、貼壁細(xì)胞需用0.25%胰酶常規(guī)消化將細(xì)胞消化下來(lái)，將細(xì)胞懸液收集至離心管中。3、1000rpm離心5分鐘，棄上清液。4、沉淀加含DMSO的培養(yǎng)液，計(jì)數(shù)，調(diào)整至(1-10)×106/ml。5、將懸液分至凍存管中，每管1ml。6、密封凍存管，封口一定要嚴(yán)，否則復(fù)蘇時(shí)易出現(xiàn)爆裂。7、用記號(hào)筆標(biāo)明細(xì)胞種類，凍存日期。8、按下列順序降溫：室溫→4℃(20分鐘〕→冰箱冷凍室(30分鐘)→超低溫冰箱(-80℃guoye)→

客戶咨詢Elisa試劑盒問題總結(jié)2015/04/27: 客戶咨詢ELISA常見問題1.產(chǎn)品有哪幾種規(guī)格？可檢測(cè)多少個(gè)樣本？產(chǎn)品分為48T和96T兩種規(guī)格。每次實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線一般設(shè)5個(gè)不同濃度，加上空白孔，標(biāo)準(zhǔn)曲線一共需要11個(gè)孔。因此，一個(gè)48T試劑盒zui多可以測(cè)定37個(gè)樣本（不做重復(fù)且一次用完），一個(gè)96T試劑盒zui多可以測(cè)定85個(gè)樣本（不做重復(fù)且一次用完）。可以根據(jù)實(shí)際樣本數(shù)量和實(shí)驗(yàn)計(jì)劃選擇合適的產(chǎn)品規(guī)格。2.48T和96T的試劑盒有哪些不同？48T和96T的試劑盒，每個(gè)孔的反應(yīng)體系都是*一樣的。不同的是試劑盒中各組分的規(guī)格，詳見說明書。3.

Elisa試劑盒抗原包被選擇2015/04/20: Elisa試劑盒抗原包被選擇獸藥殘留檢測(cè)大部分藥物因分子量小，難于直接吸附于固相載體上，因此需要將小分子藥物經(jīng)過改造成合適的半抗原，再將半抗原與大分子的載體蛋白偶聯(lián)（通常是利用半抗原分子中含有一定數(shù)量的游離基團(tuán)，如巰基、氨基、醛基、羧基、酮基、苯酚基、咪唑基等，這些基團(tuán)可與蛋白質(zhì)分了中的對(duì)應(yīng)基團(tuán)在偶聯(lián)劑的作用下發(fā)生偶聯(lián)反應(yīng)），從而形成半抗原-載體蛋白復(fù)合物，半抗原-載體蛋白復(fù)合物通過載體蛋白吸附到固相載體上，實(shí)現(xiàn)小分子藥物的包被過程。常用的載體蛋白有：牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白（HSA

何經(jīng)理與客戶交流ELISA的交叉反應(yīng)2015/04/15: 昨天下午15時(shí)，貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院杜老師致電我司何咨詢ELISA相關(guān)技術(shù)。還記得上月中旬，杜老師在我公司購(gòu)買了大鼠白介素6試劑盒，售后反應(yīng)非常好，這次來(lái)電向我公司何主要咨詢的是ELISA檢測(cè)交叉反應(yīng)。如果抗體間發(fā)生沖突或交叉反應(yīng)就會(huì)影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)的特異性，其中抗體來(lái)源所帶來(lái)的兼容性就是交叉反應(yīng)的一個(gè)因素。在何與客戶交流ELISA交叉反應(yīng)的過程中，何說道：“盡管現(xiàn)在購(gòu)買源自動(dòng)物的抗體越來(lái)越容易，我們?nèi)杂斜匾_認(rèn)一下是否會(huì)產(chǎn)生交叉反應(yīng)的問題。在用雙抗夾心法進(jìn)行ELISA檢測(cè)時(shí)，檢測(cè)用的二抗必須特異性針對(duì)檢測(cè)一

恒遠(yuǎn)教您*優(yōu)化ELISA 讓誤差概率為零2015/04/09: 在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中，誤差分有系統(tǒng)誤差、偶然誤差、過失誤差，而一個(gè)小小的誤差主意能夠影響到實(shí)驗(yàn)，那么實(shí)驗(yàn)誤差概率如何縮小？除了需要細(xì)心之外，還有一些需要重點(diǎn)注意的地方。今天上海恒遠(yuǎn)生物公司教您*優(yōu)化ELISA，讓誤差概率為零！①：檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械，具有一定總結(jié)和分析問題的能力，對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。②：使用校對(duì)過的微量移液器，排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。③：仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行

如何完善ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的過失？2015/04/02: ELISA操作步驟多，新手操作難免會(huì)有過失。而這些過失很多是由細(xì)節(jié)不夠好造成的，減少過失的方法有很多，比如做實(shí)驗(yàn)時(shí)少說話，防止唾液掉進(jìn)酶標(biāo)條中。當(dāng)然，大家還要學(xué)會(huì)自己發(fā)掘問題，找出原因。那么我們要如何完善ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的過失？①：評(píng)估試劑的實(shí)用性，試劑的穩(wěn)定與否，對(duì)準(zhǔn)確率的高低到頭重要。在試劑啟用前，應(yīng)進(jìn)行陰、陽(yáng)對(duì)照及樣品反復(fù)比照試驗(yàn)，判定試劑符合要求后方可使用。②：操作前仔細(xì)閱讀說明書，嚴(yán)格按照說明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方，反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn)

論實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求達(dá)標(biāo)的重要性2015/03/25: 實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境與操作結(jié)果及安全性有著不可分割的密切關(guān)系，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新、干燥燥和無(wú)煙塵，今天我們就以細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)為例，論實(shí)驗(yàn)室環(huán)境要求達(dá)標(biāo)的重要性。一、常用設(shè)備1.超凈工作臺(tái)：也稱凈化工作臺(tái)，分為側(cè)流式，直流式和外流式三大類。2.無(wú)菌操作間：一般由更衣間，緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺(tái)及二氧化碳培養(yǎng)箱，離心機(jī)，倒置顯微鏡等。緩沖間可放置電冰箱，冷藏器及消毒好的無(wú)菌物品等。3.操作間：普通培養(yǎng)箱，離心機(jī)，水浴鍋，定時(shí)鐘，普通天平及日常分析處理物。4.洗刷消毒間：烤箱，消毒

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