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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
細(xì)胞色素P450:藥物代謝的核心酶系統(tǒng)2025/07/14
細(xì)胞色素P450(cytochromeP450或CYP450)是一類(lèi)重要的血紅蛋白偶聯(lián)單加氧酶超家族,在藥物代謝和多種生物轉(zhuǎn)化過(guò)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。細(xì)胞色素P450因其與一氧化碳結(jié)合后在450nm波長(zhǎng)處具有特征性吸收峰而得名。這類(lèi)酶以含亞鐵血紅素的球形蛋白結(jié)構(gòu)為基礎(chǔ),包含500余種同源異構(gòu)酶,構(gòu)成基因超家族,在物種間呈現(xiàn)高度保守性。自1987年推行統(tǒng)一命名方案以來(lái),該酶系統(tǒng)的分類(lèi)和命名已日趨完善。結(jié)構(gòu)與分布:CYP450主要分布在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體內(nèi)膜上,作為末端加氧酶參與多種生物過(guò)程。在人體中,這些
恒遠(yuǎn)生物| 免疫組化實(shí)驗(yàn)攻略2025/07/02
免疫組化(IHC)是一種利用抗體檢測(cè)組織切片中蛋白質(zhì)和其他抗原的技術(shù),通過(guò)定位、定性和相對(duì)定量來(lái)研究這些抗原。以下是恒遠(yuǎn)生物為大家總結(jié)的免疫組化實(shí)驗(yàn)的完整攻略。一、實(shí)驗(yàn)原理免疫組化基于抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理。組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先與一抗結(jié)合,然后通過(guò)二抗與一抗結(jié)合,最后通過(guò)顯色系統(tǒng)(如DAB)或熒光系統(tǒng)使目標(biāo)抗原可視化。二、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備材料準(zhǔn)備:組織切片、抗體、緩沖液等設(shè)備檢查:確保切片機(jī)、孵育箱等設(shè)備正常工作工作臺(tái)清潔:確保無(wú)細(xì)菌和異物污染實(shí)驗(yàn)計(jì)劃:制定標(biāo)準(zhǔn)化操作流程,合理安排實(shí)驗(yàn)時(shí)間
小鼠糖原合成酶(GS)ELISA試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明2025/06/17
檢測(cè)范圍:1nmol/L-42nmol/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中糖原合成酶(GS)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠糖原合成酶(GS)水平。用純化的小鼠糖原合成酶(GS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入糖原合成酶(GS),再與HRP標(biāo)記的糖原合成酶(GS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的糖原合成酶
如何確保ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性?2025/06/09
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))是生物醫(yī)學(xué)研究中常用的檢測(cè)技術(shù),其結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)論的可靠性。以下是保證ELISA測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性的關(guān)鍵措施:一、樣本處理與試劑管理1.標(biāo)準(zhǔn)化樣本處理:確保樣本采集方法一致,血液、組織或細(xì)胞裂解液等樣本需采用標(biāo)準(zhǔn)化的采集和保存方法。樣本應(yīng)在適當(dāng)條件下保存,避免反復(fù)凍融。2.選擇優(yōu)質(zhì)試劑盒:優(yōu)先選擇高靈敏度、高特異性的試劑盒,參考品牌口碑和性能驗(yàn)證數(shù)據(jù)。檢查所有試劑的有效期,確認(rèn)抗體和酶的活性正常。3.試劑預(yù)處理:實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱取出,使各種試劑恢復(fù)
免疫組化實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)2025/06/04
免疫組化實(shí)驗(yàn)是一項(xiàng)精密的技術(shù)操作,需要嚴(yán)格把控各個(gè)環(huán)節(jié)以確保結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。以下是免疫組化實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵注意事項(xiàng):一、血清封閉血清封閉的目的是為了一抗與組織的非特異性結(jié)合,造成假陽(yáng)性,一般會(huì)采用BSA、羊血清等封閉這些位點(diǎn),封閉血清一般是和二抗同一來(lái)源的,室溫封閉10-30min。二、一抗和二抗?jié)舛群头跤龝r(shí)間不同的一抗?jié)舛?,孵育時(shí)間和溫度等對(duì)染色結(jié)果往往有較大的影響。在4℃下,反應(yīng)緩慢,背景較淺;而37℃反應(yīng)較快,時(shí)間較短;室溫介于兩者之間,二抗一般室溫孵育30min。三、DAB顯色檢測(cè)背景的
冷凍細(xì)胞活化詳細(xì)步驟2025/05/27
冷凍原則:冷凍細(xì)胞之活化原則為快速解凍,以避免冰晶重新結(jié)晶而對(duì)細(xì)胞造成傷害,導(dǎo)致細(xì)胞之死亡。細(xì)胞活化后,約需數(shù)日,或繼代一至二代。其細(xì)胞生長(zhǎng)或特性表現(xiàn)才會(huì)恢復(fù)正常(例如產(chǎn)生單株抗體或是其它蛋白質(zhì))。一、材料:①37oC恒溫水槽②新鮮培養(yǎng)基③無(wú)菌吸管/離心管/培養(yǎng)瓶④液氮或干冰容器二、操作步驟:①操作人員應(yīng)戴防護(hù)面罩及手套,防止冷凍管可能爆裂之傷害。②自液氮或干冰容器中取出冷凍管,檢查蓋子是否旋緊,由于熱脹冷縮過(guò)程,此時(shí)蓋子易松掉。③將新鮮培養(yǎng)基置于37°C水槽中回溫,回溫后噴以70%酒精并擦拭之
檢測(cè)細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的方法2025/05/19
檢測(cè)細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率是評(píng)估基因轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵步驟,以下是幾種常用的檢測(cè)方法:一、實(shí)時(shí)熒光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR)實(shí)時(shí)熒光定量PCR是一種在DNA擴(kuò)增過(guò)程中,通過(guò)熒光信號(hào)實(shí)時(shí)檢測(cè)PCR進(jìn)程的方法。它利用內(nèi)參或外參法,對(duì)待測(cè)樣品中的特定DNA序列進(jìn)行定量分析。在PCR擴(kuò)增的指數(shù)時(shí)期,模板的Ct值(循環(huán)閾值)與起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系,因此可以作為定量的依據(jù)。然而,這種方法只能檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中待測(cè)基因的mRNA表達(dá)水平,無(wú)法直接檢測(cè)蛋白表達(dá)水平。二、Wester
血清出現(xiàn)沉淀的原因及影響2025/05/14
血清中出現(xiàn)沉淀物是一個(gè)相對(duì)常見(jiàn)的現(xiàn)象,這些沉淀物可能由多種物質(zhì)構(gòu)成,包括但不限于纖維蛋白、膽固醇、脂肪酸酯、蛋白質(zhì)以及磷酸鈣等。以下是對(duì)血清中出現(xiàn)沉淀問(wèn)題的詳細(xì)分析:一、血清沉淀物的類(lèi)型及成因1.纖維蛋白:纖維蛋白是血清中常見(jiàn)的沉淀物之一,尤其是當(dāng)血清在低溫下收集和快速處理時(shí),一些纖維蛋白原(可溶性的形成絮狀纖維蛋白的前體)在處理過(guò)程中仍處于溶解狀態(tài)。然而,當(dāng)血清經(jīng)過(guò)過(guò)濾分裝后,這些纖維蛋白原會(huì)在瓶中凝結(jié),形成肉眼可見(jiàn)的纖維蛋白沉淀。2.膽固醇、脂肪酸酯及蛋白質(zhì):這些物質(zhì)在血清中也可能形成沉淀,
微生物活性氧(ROS)ELISA試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明2025/05/08
檢測(cè)范圍:80pg/mL-2600pg/mL使用目的:本試劑盒用于測(cè)定微生物樣本中活性氧(ROS)含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中活性氧(ROS)水平。用純化的活性氧(ROS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入活性氧(ROS),再與HRP標(biāo)記的活性氧(ROS)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的活性氧(ROS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450
一種有機(jī)化合物:丙二醛(MDA)2025/04/15
一、基本信息化學(xué)式:C3H4O2分子量:72.063CAS登錄號(hào):542-78-9英文名稱(chēng):Malondialdehyde(簡(jiǎn)稱(chēng)MDA)二、理化性質(zhì)物理狀態(tài):丙二醛呈無(wú)色針形晶體狀,一般含兩個(gè)結(jié)晶水,60℃下真空干燥可得無(wú)水物,易潮解。熔點(diǎn):72~74℃沸點(diǎn):存在不同的沸點(diǎn)數(shù)據(jù),如108.3℃或粗略估計(jì)為66.43℃,這可能與實(shí)驗(yàn)條件或丙二醛的純度有關(guān)。密度:0.991g/cm3(或粗略估計(jì)為0.9843)閃點(diǎn):28.9℃折射率:1.366(或估計(jì)為1.3670)溶解性:易溶于乙醇、甲醇、水,可
化學(xué)試劑存放說(shuō)明2025/04/07
化學(xué)試劑的存放是實(shí)驗(yàn)室安全管理的重要環(huán)節(jié),正確的存放不僅能保證試劑的質(zhì)量和性能,還能有效防止事故發(fā)生。以下是一些關(guān)于化學(xué)試劑存放的說(shuō)明:一、存放原則1.分類(lèi)存放:根據(jù)化學(xué)試劑的性質(zhì)進(jìn)行分類(lèi),如易燃易爆試劑、有毒有害試劑、腐蝕性試劑等,應(yīng)分別存放在安全柜或儲(chǔ)存室內(nèi)。2.標(biāo)識(shí)清晰:每種試劑瓶上應(yīng)貼有清晰的標(biāo)簽,標(biāo)明試劑的名稱(chēng)、濃度、危險(xiǎn)等級(jí)、生產(chǎn)日期和有效期等信息,便于管理和使用。3.密封保存:大部分化學(xué)試劑都應(yīng)密封保存,以防止空氣、水分或其他雜質(zhì)進(jìn)入,影響試劑的純度。4.避光保存:對(duì)光敏感的試劑應(yīng)
人內(nèi)皮素(END)ELISA試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明更新2025/04/01
檢測(cè)范圍:10pg/ml-480pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中內(nèi)皮素(END)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人內(nèi)皮素(END)水平。用純化的人內(nèi)皮素(END)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)皮素(END),再與HRP標(biāo)記的內(nèi)皮素(END)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的內(nèi)皮素(END)呈正相關(guān)。
抑制植物生長(zhǎng)激素——脫落酸2025/03/24
脫落酸是一種有機(jī)物,化學(xué)式為C15H20O4,是一種抑制生長(zhǎng)的植物激素,因能促使葉子脫落而得名。可能廣泛分布于高等植物。除促使葉子脫落外尚有其他作用,如使芽進(jìn)入休眠狀態(tài)、促使馬鈴薯形成塊莖等。對(duì)細(xì)胞的延長(zhǎng)也有抑制作用。1965年證實(shí),脫落素II和休眠素為同一種物質(zhì),統(tǒng)一命名為脫落酸。中文名:脫落酸外文名:AbscisicAcid(ABA)別名:脫落素、休眠素化學(xué)式:C15H20O4分子量:264.32CAS登錄號(hào):21293-29-8熔點(diǎn):163℃沸點(diǎn):458.7℃水溶性:3-5g/L發(fā)現(xiàn):1.
ELISA空白孔的設(shè)置2025/03/17
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn))空白孔的設(shè)置是ELISA實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)重要環(huán)節(jié),旨在通過(guò)設(shè)立空白對(duì)照來(lái)減少實(shí)驗(yàn)誤差,提高數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。以下是關(guān)于ELISA空白孔設(shè)置的詳細(xì)分析。一、空白孔的種類(lèi)及設(shè)置目的1.空氣空白/水空白:主要用于儀器調(diào)零。在實(shí)驗(yàn)中,所有孔的數(shù)值都會(huì)減去這個(gè)空白孔的數(shù)值,以消除儀器背景噪聲的影響。2.底物空白:用于防止底物弱顯色所造成的讀數(shù)偏高。這種空白孔只加入底物和終止液,不加入其他任何試劑。在數(shù)據(jù)處理時(shí),同樣需要將所有孔的數(shù)值減去這個(gè)空白孔的數(shù)值。3.酶空白:一般在兩步法實(shí)驗(yàn)中
恒遠(yuǎn)生物|小鼠T淋巴細(xì)胞 CTLL-2 培養(yǎng)攻略2025/03/12
一、細(xì)胞基本信息品牌名稱(chēng):恒遠(yuǎn)生物產(chǎn)品貨號(hào):HYCC20033細(xì)胞名稱(chēng):CTLL-2中文名稱(chēng):小鼠T淋巴細(xì)胞種屬來(lái)源:小鼠組織來(lái)源:T細(xì)胞細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)二、培養(yǎng)條件氣相:95%空氣,5%二氧化碳溫度:37℃三、培養(yǎng)基與添加物基礎(chǔ)培養(yǎng)基:RPMI-1640添加物:10%特級(jí)胎牛血清(FBS)、100U/ml(或100IU/ml)IL-2、1%青霉素/鏈霉素(P/S)注意,有些培養(yǎng)體系可能略有不同,但核心成分通常包括RPMI-1640、FBS和IL-2。四、細(xì)胞培養(yǎng)步驟1.
細(xì)胞鋪板怎樣才能鋪得均勻?2025/03/05
做cellbiology實(shí)驗(yàn),細(xì)胞鋪板大概是很常見(jiàn)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)了。但是有很多人不是很得要領(lǐng),鋪得不是均勻:要么中間密周?chē)?,要么周?chē)苤虚g禿頂。在這里分享一些一些技巧:1、一般96孔板每孔是加100微升細(xì)胞懸液,從孔的左邊靠近底部加入,加完半邊板后,將未加的細(xì)胞懸液混一下再,繼續(xù)加剩余的半邊板子,都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(一般輕巧敲三下),太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)(逆時(shí)針效果不好),依次敲擊剩余三個(gè)邊,靜置約5分鐘,放入3
人生長(zhǎng)分化因子-15(GDF-15)ELISA試劑盒產(chǎn)品說(shuō)明2025/02/26
檢測(cè)范圍:3ng/L-80ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中生長(zhǎng)分化因子-15(GDF-15)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人生長(zhǎng)分化因子-15(GDF-15)水平。用純化的人生長(zhǎng)分化因子-15(GDF-15)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入生長(zhǎng)分化因子-15(GDF-15),再與HRP標(biāo)記的生長(zhǎng)分化因子-15(GDF-15)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)
恒遠(yuǎn)生物丨ELISA實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)——溫育2025/02/18
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)實(shí)驗(yàn)中的溫育是一個(gè)至關(guān)重要的步驟,它直接影響到抗原與抗體在固相表面的結(jié)合效率,進(jìn)而影響整個(gè)實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性。以下是關(guān)于ELISA實(shí)驗(yàn)中溫育的詳細(xì)要點(diǎn),一起來(lái)看看吧!一、溫育的定義與重要性溫育是ELISA測(cè)定中抗原與抗體在固相表面結(jié)合反應(yīng)的過(guò)程,這一過(guò)程需要在一定的溫度條件下進(jìn)行一定的時(shí)間,以確保抗原與抗體能夠充分結(jié)合。溫育是ELISA測(cè)定中影響測(cè)定成敗最為關(guān)鍵的一個(gè)因素。二、常用溫育溫度1、43℃:為加速反應(yīng),有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行,但不宜采用更高的溫度,以免影響
進(jìn)口ELISA試劑盒空白和樣品空白的差異2025/02/12
ELISA試劑盒在科研實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用廣泛,對(duì)于ELISA試劑盒,有進(jìn)口與國(guó)產(chǎn)之分,相對(duì)于國(guó)產(chǎn)ELISA試劑盒來(lái)說(shuō),價(jià)格上有一定的優(yōu)勢(shì),現(xiàn)在國(guó)內(nèi)也有很多做的比較好的ELISA試劑盒廠家,ELISA試劑盒的產(chǎn)品質(zhì)量也是很有保障。如果您實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)充足,選擇進(jìn)口的ELISA試劑盒也是可以的哦!對(duì)于進(jìn)口ELISA檢測(cè)試劑盒空白和樣品空白的差異,您知道嗎?小編就帶您一起來(lái)看看!進(jìn)口ELISA檢測(cè)試劑盒空白是指因?yàn)闄z驗(yàn)試劑自身而帶來(lái)的檢驗(yàn)效果的細(xì)微的正過(guò)失。研究人員正在不斷盡力使其出產(chǎn)的檢驗(yàn)試劑的空白值為負(fù),特別指
胎牛血清培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞的方法有哪些?2025/01/17
胎牛血清培養(yǎng)血管平滑肌細(xì)胞常用的方法有貼塊法(explant)和酶解離法(enzymedisperse)。下面一起來(lái)看下這兩種方法。1.貼塊法方法:動(dòng)物經(jīng)頸動(dòng)脈放血后,在無(wú)菌操作下迅速取出胸腹主動(dòng)脈段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,將凝塊洗干凈后剝除外膜的纖維脂肪層,然后縱行切開(kāi)血管,刮除內(nèi)膜即內(nèi)皮細(xì)胞迅速撕下中膜內(nèi)、中層,切成約1mm寬的小條,浸泡在含血清的Hank's液中,并將撕下小組織塊種植于培養(yǎng)瓶壁。置于37℃恒溫箱,2h左右,取出培養(yǎng)瓶加入20%HyClone胎牛血清的培養(yǎng)液,
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