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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
恒遠(yuǎn)生物|細(xì)胞凍存和復(fù)蘇你應(yīng)該知道的小細(xì)節(jié)2023/07/31
細(xì)胞凍存及復(fù)蘇的基本原則是慢凍快融,實(shí)驗(yàn)證明這樣可以大限度的保存細(xì)胞活力。目前細(xì)胞凍存多采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)能提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,加上緩慢冷凍可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而減少由于冰晶形成造成的細(xì)胞損傷。復(fù)蘇細(xì)胞應(yīng)采用快速融化的方法,這樣可以保證細(xì)胞外結(jié)晶在很短的時(shí)間內(nèi)即融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損傷。細(xì)胞復(fù)蘇是一個(gè)簡(jiǎn)單的試驗(yàn)操作,但操作中也有許多需要注意的事項(xiàng),在實(shí)驗(yàn)操作中注意細(xì)小的問題,才能使復(fù)蘇后的細(xì)胞保持
恒遠(yuǎn)生物|使用恒遠(yuǎn)ELISA試劑盒需要符合哪些要求呢?2023/07/24
為了保證elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定及順利完成,廣大科研者和經(jīng)銷商首先要考慮的就是產(chǎn)品的選擇,一定要選用質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,萬萬不能夠圖便宜,忽視質(zhì)量保證。其實(shí),我們?cè)谑褂肊LISA試劑盒時(shí),對(duì)自身以及對(duì)產(chǎn)品的要求都是很嚴(yán)格的;下面,我們一起來看看使用ELISA試劑盒需要符合哪些要求吧:●檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械,具有一定總結(jié)和分析問題的能力,對(duì)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決?!袷褂眯?duì)過的微量移液器,排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否
恒遠(yuǎn)生物|蛋白質(zhì)相互作用2023/07/19
蛋白質(zhì)相互作用是指兩個(gè)或兩個(gè)以上蛋白質(zhì)分子通過非共價(jià)鍵形成蛋白質(zhì)復(fù)合物的過程。如復(fù)制、轉(zhuǎn)錄、翻譯、細(xì)胞周期調(diào)控、物質(zhì)代謝等。常見的研究方法有:酵母雙雜交技術(shù)、免疫共沉淀、親和層析、細(xì)胞內(nèi)共定位分析。以下是對(duì)免疫共沉淀技術(shù)(co-immunoprecipitation,co-IP)進(jìn)行總結(jié),co-IP常用來檢測(cè)兩種蛋白質(zhì)在體內(nèi)是否結(jié)合?;驹恚涸诒WC兩種蛋白質(zhì)相互作用的條件下,收集并裂解細(xì)胞。在細(xì)胞裂解液中加入某一種已知蛋白的特異性抗體,孵育后再加入可與特異性抗體結(jié)合的蛋白A/G-瓊脂糖珠(或磁
恒遠(yuǎn)生物|菌種保存方法有哪些?2023/07/12
微生物為廣泛分布于自然界中的一群肉眼看不到的微小生物,包括細(xì)菌、螺旋體、立克次體、衣原體、支原體、放線菌、真菌、病毒等類,其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單,以單細(xì)胞、細(xì)胞群體或非細(xì)胞狀態(tài)存在,在提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和適宜環(huán)境的條件下,一般都能獨(dú)立生活,迅速生長(zhǎng)繁殖。為了避免微生物死亡、污染,保持其原有性狀基本穩(wěn)定,便于研究和使用,需要用到菌種保藏技術(shù)。菌種的保存主要是指通過降低細(xì)菌新陳代謝的速度,使細(xì)菌的生命活動(dòng)處于半yongjiu性休眠狀態(tài),以達(dá)到長(zhǎng)期保藏的目的以及減少菌種的更新需求來降低實(shí)驗(yàn)生產(chǎn)成本。微生物菌種的保存方法
細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法快來了解一下吧2023/07/05
隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展,轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)是現(xiàn)代生物學(xué)研究中的重要技術(shù)手段之一。通過將外源DNA、RNA、蛋白質(zhì)等引入目標(biāo)細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)技術(shù)之一,研究者們可以揭示細(xì)胞的基因功能、蛋白質(zhì)表達(dá)和相互作用,進(jìn)而深入理解細(xì)胞生理過程和疾病發(fā)生機(jī)制。接下來我來為大家介紹一下常見的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法吧細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法1.化學(xué)物質(zhì)介導(dǎo):磷酸鈣共沉淀法、陽(yáng)離子聚合物法和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法1)磷酸鈣共沉淀法:借助于形成一種DNA-磷酸鈣復(fù)合物沉淀黏附在細(xì)胞膜表面,通過細(xì)
血清樣本和血漿樣本的區(qū)別你知道嗎?2023/06/26
一、血清和血漿有以下三點(diǎn)區(qū)別:1.血清中沒有纖維蛋白原2.血清中無參與凝血中的血漿蛋白3.血漿無一些凝血進(jìn)程中血小板開釋的物質(zhì)二、在藥代研究中兩者各有優(yōu)缺點(diǎn):1.血漿中含有抗凝物質(zhì)(肝素或EDTA),可能會(huì)攪擾化合物的檢測(cè)(結(jié)合等),血清則無。2.血漿中蛋白稍多,可能會(huì)在SPE中發(fā)生比方堵柱子等狀況,攪擾樣本制備進(jìn)程(這一點(diǎn)其實(shí)不同不明顯)。3.血漿制備快速,直接低溫或常溫離心后即可別離,血清制備耗時(shí)較長(zhǎng)。這一點(diǎn)對(duì)藥代試驗(yàn)影響較大,因?yàn)榻o藥后4小時(shí)內(nèi)一般取血點(diǎn)都較為密布。4.血清的凝血進(jìn)程可能會(huì)
2023人B細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BCGF)ELISA試劑盒產(chǎn)品說明2023/06/16
檢測(cè)范圍:20ng/L-900ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中B細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BCGF)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人B細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BCGF)水平。用純化的人B細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BCGF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入B細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BCGF),再與HRP標(biāo)記的B細(xì)胞生長(zhǎng)因子(BCGF)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。
人CXC趨化因子配體1(CXCL1)ELISA實(shí)驗(yàn)操作手冊(cè)2023/06/14
趨化因子(C-X-C基序)配體1(CXCL1)是一個(gè)小分子量細(xì)胞因子,屬于CXC趨化因子家族,以前又被稱為GRO1致癌基因、GROα、KC和中性粒細(xì)胞激活蛋白3(NAP-3)。那么在ELISA實(shí)驗(yàn)中有哪些注意事項(xiàng)呢,恒遠(yuǎn)生物小編為大家總結(jié)ELISA實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng)。檢測(cè)范圍:12ng/L-420ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中CXC趨化因子配體1(CXCL1)含量。實(shí)驗(yàn)原理:本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人CXC趨化因子配體1(CXCL1)水平。用純化的人CXC
人白介素ELISA試劑盒標(biāo)本常見問題解答2023/06/05
人白介素ELISA試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗人IL-1α單克隆抗體預(yù)包被在高親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和檢測(cè)抗體,經(jīng)過孵育,樣本中存在的IL-1α與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后,加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素(streptavidin-HRP)。洗滌后,加入顯色底物TMB,避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與樣本中IL-1α的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng),在450nm波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng)570-630nm)測(cè)定吸光度值。人白介素ELISA試劑
恒遠(yuǎn)生物|人羊膜細(xì)胞(WISH)培養(yǎng)建議2023/05/24
品牌:恒遠(yuǎn)生物貨號(hào):HYCC10347中文名稱:人羊膜細(xì)胞;WISH規(guī)格:T25形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)特征特性:最初以為這株細(xì)胞的起源是正常羊膜,但隨后通過同工酶分析、HeLa標(biāo)記染色體和DNA指紋法分析,證實(shí)該細(xì)胞是HeLa細(xì)胞污染的;角蛋白陽(yáng)性。培養(yǎng)條件:DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS傳代方法:1:2~1:4傳代,每周2~3次。凍存條件:無血清細(xì)胞凍存液一、細(xì)胞培養(yǎng)常
大鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒說明書新版2023/05/16
檢測(cè)范圍:0.7IU/L-24IU/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中促卵泡素(FSH)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠促卵泡素(FSH)水平。用純化的大鼠促卵泡素(FSH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入促卵泡素(FSH),再與HRP標(biāo)記的促卵泡素(FSH)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的促卵泡素(FS
實(shí)驗(yàn)時(shí)ELISA競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)抗-HBe2023/05/09
ELISA方法學(xué)在實(shí)驗(yàn)中運(yùn)用的很廣泛,5個(gè)實(shí)驗(yàn)3個(gè)實(shí)驗(yàn)都是用ELISA法檢測(cè)的,對(duì)于ELISA實(shí)驗(yàn)中也是有多種方法學(xué)可以選擇的,今天我們著重的講解下ELISA實(shí)驗(yàn)中競(jìng)爭(zhēng)法檢測(cè)抗-HBe,先來了解一下實(shí)驗(yàn)原理吧!一、實(shí)驗(yàn)原理用抗-HBe包被固相載體后,同時(shí)加被檢血清和合適滴度中和試劑HBeAg,若被檢血清中含有抗-HBe,則與包被抗-HBe競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合HBeAg,被檢標(biāo)本中抗-HBe越多,HBeAg被結(jié)合越多,而與包被抗-HBe結(jié)合就越少,加底物后顯色就越淺;反之越深。二、主要試劑與器材ELISA試劑
恒遠(yuǎn)小課堂:您了解結(jié)合物嗎?2023/05/06
結(jié)合物即酶標(biāo)記的抗體(或抗原),是ELISA中至關(guān)重要的關(guān)鍵的試劑。良好的結(jié)合物應(yīng)該是既保有酶的催化活性,也保持了抗體(或抗原)的免疫活性。結(jié)合物中酶與抗體(或抗原)之間有恰當(dāng)?shù)姆肿颖壤诮Y(jié)合試劑中應(yīng)盡量不含有或少含有游離的(未結(jié)合的)酶或游離的抗體(或抗原),此外,結(jié)合物尚要有良好的穩(wěn)定性。用于ELISA的酶應(yīng)符合以下要求:①純度高②催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高③專一性強(qiáng)④性質(zhì)穩(wěn)定⑤來源豐富⑥價(jià)格不貴⑦制備成酶結(jié)合物后仍繼續(xù)保存它的活性部分和催化能力⑧在受檢標(biāo)本中不存在相同的酶⑨相應(yīng)底物易于制備和保存
胎牛血清與新生牛血清的區(qū)別你知道嗎?2023/04/23
胎牛血清與新生牛血清有哪些區(qū)別呢?恒遠(yuǎn)小編整理了相關(guān)資料,告訴您它們其中的差異,文章所訴內(nèi)容,僅供參考,如您有疑問的地方,歡迎前來咨詢我司技術(shù)專員!一、總蛋白含量胎牛血清總蛋白含量(g/dl)約為2%-4%,新生牛血清約為3.0%-5.0%,成牛血清則高達(dá)8%-10%。從蛋白含量上也可以初步判斷一個(gè)血清是否為胎?;蛐律Q澹鞍缀吭礁哒f明牛齡越大。二、胎牛血清采血方式1.挑選出大約8月齡以上的健康ren娠母牛,經(jīng)剖腹獲取小牛。2.將小牛清洗干凈后,側(cè)放在萬級(jí)潔凈房間內(nèi)的采血臺(tái)上,固定四肢及頭
技術(shù)干貨:被冷凍后的試劑盒質(zhì)量會(huì)受損嗎?2023/04/11
我們知道,完整的ELISA試劑盒包含:①酶的底物;②已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);③酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);④結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;⑤洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;⑥陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);⑦酶反應(yīng)終止液,常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸,其濃度按加量及比色液的體積而異,在板式ELISA中一般采用2mol/L。那么被冷凍后的試劑盒質(zhì)量會(huì)受損嗎?恒遠(yuǎn)生物為您解答:為其保存后可以使用,但不能
大鼠谷胱甘肽(GSH)ELISA說明書解析20232023/04/06
檢測(cè)范圍:30ng/L-800ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中谷胱甘肽(GSH)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠谷胱甘肽(GSH)水平。用純化的大鼠谷胱甘肽(GSH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入谷胱甘肽(GSH),再與HRP標(biāo)記的谷胱甘肽(GSH)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的谷胱甘肽(GS
2023新版:ELISA實(shí)驗(yàn)的一些原理總結(jié)2023/03/29
ELISA即酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定,是一類常用的免疫酶技術(shù)。主要方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,然后利用酶標(biāo)記(偶聯(lián))的抗體或抗原與之孵育,加入顯色劑顯色,通過酶標(biāo)儀測(cè)定待測(cè)物顏色與標(biāo)準(zhǔn)物顏色的差異,繪制出酶活曲線得出待測(cè)物濃度。一、四種常見ELISA方法:1.直接ELISA將抗原固定于ELISA板上,然后用酶標(biāo)抗體直檢測(cè)抗原。相較于其它類型的ELISA實(shí)驗(yàn),直接ELISA實(shí)驗(yàn)步驟少,檢測(cè)速度快,不需要用到二抗,避免了交叉反應(yīng),測(cè)定結(jié)果不容易出錯(cuò)。但是由于直接ELISA的抗原不是特異性固定
胎牛血清如何正確存放與解凍?2023/03/21
胎牛血清在科研市場(chǎng)上應(yīng)用廣泛相信大家都知道。但對(duì)于胎牛血清的使用及保存,并不是所有人都那么清楚,恒遠(yuǎn)小編就以胎牛血清的儲(chǔ)存、常見問題及處理方法進(jìn)行分析,建議收藏!一、如何儲(chǔ)存和解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?未拆封的血清,一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃,在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi),再放回冷凍。將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均
ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果OD值為何偏低?2023/03/06
ELISA實(shí)驗(yàn)是一個(gè)非常嚴(yán)謹(jǐn)、極其考驗(yàn)操作者技巧和經(jīng)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn),檢測(cè)結(jié)果數(shù)值低、標(biāo)準(zhǔn)曲線梯度差、背景值高、變異系數(shù)大等諸多問題也是兵家常事。有很多客戶向我們咨詢,ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)總是偏低,不知道是什么問題。恒遠(yuǎn)生物就為大家總結(jié)一下具體原因,一起來看看吧!一、整體OD值偏低或無信號(hào):1.試劑盒組分失活相應(yīng)對(duì)策:使用新的試劑盒,按照說明書要求保存試劑盒2.試劑盒組分未平衡相應(yīng)對(duì)策:試劑盒每個(gè)組分都需要平衡至室溫后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)3.試劑混用或混合不充分相應(yīng)對(duì)策:保證使用試劑盒內(nèi)完整一套試劑進(jìn)行實(shí)驗(yàn),保證
2023犬多巴胺(DA)ELISA產(chǎn)品說明書新版2023/02/21
檢測(cè)范圍:5ng/L-180ng/L使用目的:本試劑盒用于測(cè)定犬血清、血漿及相關(guān)液體樣本中多巴胺(DA)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中犬多巴胺(DA)水平。用純化的犬多巴胺(DA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入多巴胺(DA),再與HRP標(biāo)記的多巴胺(DA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的多巴胺(DA)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm
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