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結腸炎(UC)動物造模解決方案和文獻指南2024/07/15

結腸炎(UC)動物造模解決方案和文獻指南DSS造模發(fā)展歷程目前有多種動物模型被廣泛用于研究炎癥性腸（inflammatoryboweldisease，IBD）的病因、發(fā)病機制及測試新開發(fā)藥物藥效等，尤其以葡聚糖硫酸鈉鹽（DextranSulfateSodiumSalt，DSS，MW:36000~50000）結腸炎（ulcerativecolitis，UC）模型應用最為廣泛。現(xiàn)行研究中常用的UC建模類型大約分為：自發(fā)模型、誘導模型（化學藥物誘導：TNBS三硝基苯磺酸，DSS葡聚糖硫酸鈉等、免疫學方

DSS誘導果蠅潰瘍性結腸炎模型的建立2024/07/15

葡聚糖硫酸鈉(DextranSulfateSodium，DSS)是葡聚糖的聚陰離子衍生物，喂食果蠅會破壞腸上皮中腸道表皮細胞之間的連接從而造成腸道損傷，引起多條通路應答調控干細胞的自我更新及分化，補充受損細胞，維持腸道穩(wěn)態(tài)。圖1.果蠅腸道干細胞分裂分化示意圖實驗動物5-10日齡果蠅，雌性實驗材料DSS（yeasenDSS60316ES,MW36000-50000）實驗步驟1.用5%的蔗糖溶液配制喂食培養(yǎng)基；2.對照組：5%蔗糖培養(yǎng)基（SC），實驗組：3%DSS（培養(yǎng)基配制）；3.預先用500μL

DSS誘導豬潰瘍性結腸炎模型的建立2024/07/15

背景概述腸道通透性增加和相關體重減輕是DSS結腸炎動物模型的常?特征。D-甘露醇是?種惰性小碳水化合物分?，可沿整個隱窩-絨毛軸吸收，?于評估體內(nèi)腸道通透性。圖源實驗動物4-5天大，約克郡小豬實驗材料DSS（yeasenDSS60316ES,MW36000-50000）實驗步驟1.以商業(yè)代乳粉配?飲?，每天喂食三次，直到實驗結束；2.將動物分為陽性對照組（Pos），陰性對照組（Neg），實驗組（Trp）;3.陽性對照組（Pos）：灌注DSS;陰性對照組（Neg）：灌注生理鹽水;實驗組（Trp）:

DSS誘導斑馬魚潰瘍性結腸炎模型的建立2024/07/15

斑馬魚作為腸道損傷模型的應用已得到充分證實，葡聚糖硫酸鈉（DextranSulfateSodiumSalt，DSS）誘導的斑馬魚IBD模型模擬了哺乳動物IBD表型的不同特征，包括腸道中性粒細胞炎癥、過多粘液生成、腸淋巴管生成增加以及前炎性細胞因子上調。圖片來源：包圖網(wǎng)實驗動物3dpf（dayspostfertilization)斑馬魚實驗材料DSS（Yeasen60316ES，MW:36000~50000）實驗步驟1.將斑馬魚胚胎培養(yǎng)在含甲基藍的E3胚胎培養(yǎng)基中，28.5℃，培養(yǎng)至1dpf；2.

DSS誘導大鼠潰瘍性結腸炎模型方案2024/07/15

葡聚糖硫酸鈉鹽（DextranSulfateSodiumSalt,DSS）是一種聚陰離子衍生物，其誘導結腸炎模型的機制雖仍未十分明確，但通常認為與巨噬細胞功能失調、腸道菌群失調、DSS對結腸上皮的毒性作用、細胞因子在DSS結腸炎模型的發(fā)病中起重要作用等機制有關。實驗案例1實驗動物：大鼠，1周齡，100g；實驗步驟：5%的DSS，3.5mL/100g每日灌胃，灌胃2周，HE染色；實驗結果：UC大鼠的結腸長度低于健康大鼠；結腸黏膜異常，存在大量炎癥細胞。圖1.(a)健康大鼠和UC大鼠的腸道長度;(b

DSS誘導小鼠潰瘍性結腸炎模型方案2024/07/15

小鼠模型是結腸炎造模常見模型，自從1985年采用葡聚糖硫酸鈉(dextransulphatesodium,DSS)制備出倉鼠潰瘍性結腸炎模型后，已有大量數(shù)據(jù)證明DSS結腸炎模型的病因、臨床癥狀、病理改變及治療應答均與人類潰瘍性結腸炎(ulcerativecolitis，UC)相似。現(xiàn)行研究中常用的UC建模類型大約分為：自發(fā)模型、誘導模型（化學藥物誘導：TNBS三硝基苯磺酸，DSS葡聚糖硫酸鈉等、免疫學方法誘導、細胞移植誘導）以及基因修飾模型等。DSS造模優(yōu)勢葡聚糖硫酸鈉鹽（DextranSulf

如何評價DSS誘導結腸炎模型是否成功2024/07/12

一、DSS構建的UC模型特點通過給予動物自由飲用不同濃度的DSS（MW:36000~50000）水溶液，根據(jù)用藥時間及用藥周期可制成急性和慢性兩種結腸炎模型。該模型癥狀表現(xiàn)與人類UC極為相似，主要表現(xiàn)為腹瀉、黏液樣便、糞便潛血、肉眼血便、重量減輕、活動度減少，毛色變差等。表1DSS結腸炎模型組織學特征DSS結腸炎模型類別急性期結腸炎模型慢性期結腸炎模型組織學改變結腸充血、水腫、變短、變脆、重量長度比增加結腸明顯縮短出現(xiàn)不同程度的結腸潰瘍粘膜增厚、淋巴結腫大黏膜水腫、杯狀細胞缺失、隱窩腫脹破壞杯狀

新品預告 | 突破技術壁壘，DNA甲基化MGI平臺文庫構建試劑盒閃亮登場！2024/07/09

背景介紹隨著生物醫(yī)學的發(fā)展，DNA甲基化（DNAmethylation）標志物在癌癥診斷、治療選擇及預后評估中的重要性日益凸顯。在現(xiàn)代腫瘤治療領域，腫瘤DNA甲基化標志物作為一種重要的生物標志物，在癌癥的早期診斷、治療選擇及預后評估中扮演著越來越關鍵的角色。圖1.正常細胞與腫瘤細胞DNA甲基化的狀態(tài)DNA甲基化是一種DNA的共價修飾，具體是指DNA甲基轉移酶（DNAmethyltransferases，DNMTs）將甲基加到DNACpG序列中胞嘧啶的5'碳位，形成5?甲基胞嘧啶的過程。成簇的Cp

CD分子流式抗體選購指南2024/07/09

CD分子，即白細胞分化抗原，也稱分化簇（ClusterofDifferentiation），廣泛分布于各種免疫細胞表面，如B細胞、T細胞、樹突狀細胞和NK細胞等，是不同譜系的白細胞在正常分化成熟的不同階段及活化過程中，出現(xiàn)或消失的細胞表面標記。監(jiān)測不同CD抗原的表達譜使得基于細胞在不同免疫過程中的功能的細胞類型鑒定、分離和表型分型成為可能。表1.免疫分型的重要CD標志物常見CD分子生物學功能CD3是一種20-26kDa的分子，表達于所有成熟的T淋巴細胞（約占正常人外周血淋巴細胞的60-80%）、

Sf9和桿狀病毒（AcNPV）殘留DNA檢測試劑盒，監(jiān)督表達系統(tǒng)雜質殘留！2024/07/03

背景介紹已知，生物技術藥物是指采用DNA重組技術或其他現(xiàn)代生物技術研制的蛋白質或核酸類藥物。而蛋白質藥物又包含多肽、單克隆抗體、基因工程抗體和重組疫苗等。因此，如何表達生產(chǎn)穩(wěn)定性高、純度好、質量均一的蛋白質是這些蛋白藥物的關鍵。蛋白表達系統(tǒng)的選擇對于研發(fā)和生產(chǎn)高效蛋白質產(chǎn)品就變得尤為重要了，不同的表達系統(tǒng)提供了多種途徑，以滿足對于表達水平、折疊狀態(tài)、純度和可溶性等方面的不同需求。目前常用的表達系統(tǒng)主要有：原核表達系統(tǒng)和真核表達系統(tǒng)兩大類，而原核表達系統(tǒng)中較常用的是大腸桿菌表達系統(tǒng)和枯草芽孢桿菌表

為什么非要檢測rcAAV，rcAAV到底有什么風險？2024/07/03

腺相關病毒AAV簡介早期基因治療曾嘗試腺病毒載體，但因其免疫原性過強和導入的環(huán)狀DNA可能在細胞分裂中丟失而被AAV取代。AAV是一種無包膜單鏈DNA病毒，屬于細小病毒家族。AAV作為最早通過歐盟FDA認證的基因治療載體，因其具有宿主范圍廣、非致病性、低免疫原性、長期穩(wěn)定表達外源基因、良好的擴散性能和物理性質穩(wěn)定等優(yōu)點，已被廣泛地應用于基礎研究和臨床試驗中。目前已發(fā)現(xiàn)AAV有12種亞型及120多種變型，并逐步用于基因藥物研發(fā)。rAAV攜帶的蛋白衣殼與野生型AAV幾乎相同，然而衣殼內(nèi)的基因組中編碼

新技術分享：PIP-seq，無需配套儀器的單細胞實驗！2024/06/26

如火如荼的單細胞技術目前被大家廣為接受，而且單細胞技術除了在科研研究領域遍地開花，也廣泛應用于抗體發(fā)現(xiàn)、藥物評價、用藥靶向指導等領域?，F(xiàn)階段，單細胞測序方法普遍需要依賴于微孔板裝置、微流體裝置或流體處理。而且微流控、微孔板等裝置價格不菲，成為單細胞技術研究的一大壁壘。2023年3月6日，NatureBiotechnology上發(fā)表了一篇關于PIP-seq（Particle-templatedinstantpartitionsequencing）的文章——ClarkIC,FontanezKM,Me

PCR數(shù)據(jù)處理秘籍：干貨滿滿，看完還想再來一篇！2024/06/26

通常我們做完熒光定量PCR后，會通過下機數(shù)據(jù)來分析基因表達情況。這篇干貨將會給大家詳細分享熒光定量PCR數(shù)據(jù)處理方法，希望能給小伙伴們一定的幫助。相對定量法中常見的是比較Ct法，其中主要包括△△Ct法，Pfaffl法和△CT法，目前諸多科研人員采用最多的是△△Ct法。雖然該方法應用廣泛，但是很多人卻不了解其中的原理。知其然，知其所以然。小翌接下來給小伙伴們講一下△△Ct法的原理?！鳌鰿t法原理Ct值：每個反應管中熒光信號達到設定的熒光閾值時所需要的循環(huán)數(shù)。起始模板拷貝數(shù)越多，Ct值則越小。理論條

扒一扒！無血清培養(yǎng)添加物-常見細胞因子2024/06/26

01無血清培養(yǎng)細胞體外培養(yǎng)時需要在培養(yǎng)基中加入血清，以維持細胞的生長和存活。而血清，尤其是牛血清，成分復雜、批間差大和存在病原體污染的可能性，不確定的動物源性對細胞培養(yǎng)會帶來顯著的外源物質污染風險，因此科研人員對無血清培養(yǎng)基的需求日益增加，目前無血清培養(yǎng)基廣泛應用于疫苗生產(chǎn)、單抗、活性蛋白等生物制品和細胞治療等的領域中。無血清培養(yǎng)基中不含血清，為能夠實現(xiàn)與含血清培養(yǎng)基相似的維持和促進細胞生長的功能，其中必須添加白蛋白(Albumin)、胰島素(Insulin)和轉鐵蛋白(Transferrin)

干貨 | 基因編輯探秘系列之在細胞與基因治療領域的應用2024/06/26

2023年11月16日，VertexPharmaceuticals和CRISPRTherapeutics共同宣布基因編輯療法產(chǎn)品CASGEVY™（Exagaglogeneautotemcel）獲英國藥品監(jiān)管機構MHRA有條件批準上市，用于治療治療鐮狀細胞?。⊿CD）和輸血依賴性β-地中海貧血（TDT），是獲批上市的CRISPR基因編輯藥物，12月8日，美國食品和藥物管理局（FDA）也批準了該基因編輯治療藥物。這是基因編輯治療里程碑事件，代表著一項重大的科學進步可以讓數(shù)以萬計的患者受益。圖1.CA

告別黑膠蟲污染——黑膠蟲清除劑2024/06/26

在細胞培養(yǎng)過程中，“黑膠蟲”污染常常成為一大難題，“黑膠蟲”及其分解的復合物是一種細胞體外培養(yǎng)時常見的細胞污染物。它在普通倒置顯微鏡的低倍鏡下呈現(xiàn)點狀或碎片狀的黑色顆粒，在高倍鏡下可看到這些黑色顆粒進行原地振動（類似布朗運動）。想要告別黑膠蟲污染，首先需要準確識別污染類型。一旦確認為黑膠蟲污染，便可以采取相應的措施，使用黑膠蟲清除劑（60725ES）來解決問題。01判斷黑膠蟲污染的方法01培養(yǎng)基不渾濁，但在顯微鏡下觀察細胞時，細胞周圍和培養(yǎng)液中有很多小黑點，且隨著培養(yǎng)時間的延長小黑點逐漸增多，更

干貨 | TadA脫氨酶：開啟m6A檢測的新篇章2024/06/14

N6-甲基腺苷（m6A）是高等真核生物信使RNA（mRNA）內(nèi)部豐富的修飾，與人類的發(fā)育，免疫，腫瘤生成和轉移，干細胞更新，脂肪分化等過程息息相關，目前m6A甲基化修飾已成為科研中一個重要且熱門的研究方向，因此，開發(fā)m6A甲基化的檢測方法也尤為重要。甲基化RNA免疫共沉淀高通量測序(MeRIP-seq/m6A-seq)是目前研究m6A甲基化修飾使用廣泛的技術之一。該技術利用特異性識別m6A甲基化修飾的抗體，對細胞內(nèi)具有m6A甲基化修飾的RNA片段進行免疫共沉淀。然后，對沉淀下來的RNA片段進行高

革新之作！高效多功能，新一代無血清添加劑（NSC-27/N-2）來了！2024/06/14

B27和N-2都屬于無血清添加劑，其中B27(以下稱NSC-27)是由南伊利諾伊大學醫(yī)學院GregoryBrewer博士等人【1】于1993年優(yōu)化其早期無血清培養(yǎng)基配方而得【2】，NSC-27是一種專門用于神經(jīng)細胞培養(yǎng)的補充添加劑，常與Neurobasal培養(yǎng)基或Neurobasal-A培養(yǎng)基配合使用，以便在無血清條件下支持神經(jīng)細胞的培養(yǎng)。NSC-27添加劑包含了細胞生長所必需的各種生長因子、激素、神經(jīng)營養(yǎng)因子、維生素和礦物質等成分，這些成分有助于模擬體內(nèi)環(huán)境，促進神經(jīng)細胞的存活、分化和功能表達

上新 | 想要動物組織/細胞RNA提取又快又好？看這里！2024/06/13

表1.RNA的結構和功能時間樣本類型濃度（ng/µl）濃度均值（ng/µl）260/280260/230對照（常溫）鼠肝301.26307.392.011.97313.522.011.97鼠腎284.60294.542.012.14304.472.012.0950℃熱加速14天鼠肝346.60328.712.011.95310.812.011.97鼠腎293.46294.302.002.09295.132.001.99RNA研究的第一步為RNA提取，高質量的RNA是進行轉錄組測序、RT-PCR等

上新 | 操作簡單、快速準確！腺相關病毒(AAV)定量檢測試劑盒強勢登場！2024/06/12

基因治療作為一種新興療法，是向靶細胞引入正常有功能的基因，以糾正或補償致病基因所產(chǎn)生的缺陷，從而達到治療疾病的目的。目前大多數(shù)基因治療應用的仍是病毒載體，這些病毒載體經(jīng)過改造后，已經(jīng)不具有致病性。廣泛應用的病毒載體包括腺病毒載體（ADV）、慢病毒載體（LV）、單純皰疹病毒載體（HSV）、痘病毒載體（PV）及腺相關病毒載體（AAV）。作為遞送基因療法的有力工具，AAV是目前在研基因療法項目中應用最為廣泛的病毒載體。以AAV載體為代表的基因治療藥物能修正遺傳病患者的基因缺陷，給一些遺傳性罕見病、神經(jīng)