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2018
01-10

分子生物學(xué)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用
1.分子生物學(xué)的概述分子生物學(xué)（molecularbiology)是在分子水平研究生命現(xiàn)象、生命本質(zhì)、生命活動及其規(guī)律的一門生命學(xué)科，是生物學(xué)的一個(gè)分支。分子生物學(xué)技術(shù)問世于20世紀(jì)80年代中期。這種以核酸、蛋白質(zhì)等生物大分子為研究對象的新技術(shù)自發(fā)現(xiàn)以來，已經(jīng)逐步成為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域*的診療手段之一[1]。分子生物學(xué)的發(fā)展為人類認(rèn)識生命帶來了新的機(jī)會，也為人類利用和改造世界開創(chuàng)了廣闊前景。20世紀(jì)末數(shù)理科學(xué)在生物學(xué)領(lǐng)域廣泛滲透,在結(jié)構(gòu)基因組學(xué),功能基因組學(xué)和環(huán)境基因組學(xué)逢勃發(fā)展形勢下,分子診斷學(xué)技術(shù)將會
2018
01-10

納米生物學(xué)
納米這個(gè)名詞，對生物學(xué)家來說并不陌生。因?yàn)榇罅康纳锝Y(jié)構(gòu)，從核酸、蛋白質(zhì)、病毒到細(xì)胞，其線度在1nm到100nm。當(dāng)然，生物結(jié)構(gòu)雖然很小，但異常復(fù)雜，又格外活躍，表現(xiàn)出很多特定的生物學(xué)功能。如酶就是一種分子機(jī)器，它能打斷化學(xué)鍵而使分子重新結(jié)合；脫氧核糖核酸可作為儲存系統(tǒng)，能把命令轉(zhuǎn)移到核糖體中，而核糖體這種分子機(jī)器可以制造蛋白質(zhì)分子。納米生物學(xué)的目的就是開辟類似的方法，利用由程序化的分子機(jī)器組成的裝配機(jī)器去構(gòu)建物質(zhì)。裝配機(jī)器將像微小的工業(yè)機(jī)器人那樣工作，通過排布分子附件、引導(dǎo)和利用化學(xué)反應(yīng)，把原
2018
01-10

親和色譜法及其在我國的研究發(fā)展?fàn)顩r
親和色譜也稱為親和層析，是一種利用固定相的結(jié)合特性來分離分子的色譜方法。技術(shù)蓬勃發(fā)展，中國色譜專家同時(shí)也非常注重間色譜技術(shù)的交流。隨著間交流加深，中國的色譜技術(shù)已經(jīng)跟上了世界的步伐。色譜與生命科學(xué)的交叉研究、色譜與其它分析技術(shù)的聯(lián)用表現(xiàn)得異?；钴S。1．親和色譜1.1色譜概述20世紀(jì)初，俄植物學(xué)家茨維特提出色譜法。他把碳酸鈣粉末裝到玻璃管中，將植物葉子的石油醚萃取液作為樣品倒入管內(nèi)，然后再用石油醚自上而下洗脫。隨著洗脫的進(jìn)行，植物葉子中的各種色素向下移動逐漸形成一圈圈的色帶，茨維特將這種色帶分離過
2018
01-09

廢水中懸浮物（SS）的測定
一、懸浮固體的測定原理：懸浮固體系指剩留在濾料上并于103-105℃烘至恒重的固體。測定的方法是將水樣通過濾料后，烘干固體殘留物及濾料，將所稱重量減去濾料重量，即為懸浮固體（非過濾性殘?jiān)?。二、儀器1、烘箱2、分析天平3、干燥器4、孔徑為0.45μm濾膜及相應(yīng)的濾器或中速濾紙。5、玻璃漏斗6、內(nèi)徑為30-50㎜稱量瓶三、測定步驟1、將濾膜放在稱量瓶中，打開瓶蓋，在103-105℃烘干2h，取出冷卻后蓋好瓶蓋稱重，直至恒重（兩次稱量相差不超過0.0005g）2、去除懸浮物后震蕩水樣，量取均勻適量水
2018
01-09

幾種COD測定方法的比較
化學(xué)需氧量(COD)測定方法已有多種,從經(jīng)典的重鉻酸鹽法(GB11914-89),到各種快速法和比色法,均得到較廣泛的應(yīng)用。現(xiàn)將各種測定方法作一比較。
2018
01-09

COD標(biāo)準(zhǔn)測定方法:國標(biāo)GB11914-89化學(xué)需氧量的測定
1應(yīng)用范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了水中化學(xué)需氧量的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于各種類型的含COD值大于30mg/L的水樣，對未經(jīng)稀釋的水樣的測定上限為700mg/L。超過水樣稀釋測定。本標(biāo)準(zhǔn)不適用于含氯化物濃度大于1000mg/L（稀釋后）的含鹽水。2定義在一定條件下，經(jīng)重鉻酸鉀氧化處理時(shí)，水樣中的溶解性物質(zhì)和懸浮物所消耗的重鉻酸鉀鹽相對應(yīng)的氧的質(zhì)量濃度。3原理在水樣中加入已知量的重鉻酸鉀溶液，并在強(qiáng)酸介質(zhì)下以銀鹽作催化劑，經(jīng)沸騰回流后，以試亞鐵靈為指示劑，用硫酸亞鐵銨滴定水樣中未被還原的重鉻酸鉀有西歐愛好的硫酸
2018
01-08

生物制品穩(wěn)定性研究技術(shù)指導(dǎo)原則
一、前言穩(wěn)定性研究是貫穿于整個(gè)藥品研發(fā)階段和支持藥品上市及上市后研究的重要內(nèi)容,是產(chǎn)品有效期設(shè)定的依據(jù)，可以用于對產(chǎn)品生產(chǎn)工藝、制劑處方、包裝材料選擇合理性的判斷，同時(shí)也是產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制訂的基礎(chǔ)。為規(guī)范生物制品穩(wěn)定性研究，制定本技術(shù)指導(dǎo)原則。本技術(shù)指導(dǎo)原則適用于生物制品的原液、成品或中間產(chǎn)物等的穩(wěn)定性研究設(shè)計(jì)、結(jié)果的分析等。對于一些特殊品種，如基因治療和細(xì)胞治療類產(chǎn)品等，還應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的特點(diǎn)開展相應(yīng)的研究。生物制品穩(wěn)定性研究與評價(jià)應(yīng)當(dāng)遵循本指導(dǎo)原則，并應(yīng)符合國家藥品管理相關(guān)規(guī)定的要求。二、研究內(nèi)容
2018
01-08

外源性DNA殘留量測定法
*法DNA探針雜交法供試品中的外源性DNA經(jīng)變性為單鏈后吸附于固相膜上，在一定溫度下可與相匹配的單鏈DNA復(fù)性而重新結(jié)合成為雙鏈DNA，稱為雜交。將特異性單鏈DNA探針標(biāo)記后，與吸附在固相膜上的供試品單鏈DNA雜交，并使用與標(biāo)記物相應(yīng)的顯示系統(tǒng)顯示雜交結(jié)果，與已知含量的陽性DNA對照比對后，可測定供試品中外源性DNA的含量。試劑（1）DNA標(biāo)記和檢測試劑盒（2）DNA雜交膜尼龍膜或硝酸纖維素膜。（3）2%蛋白酶K溶液稱取蛋白酶K0.20g，溶于滅菌水10ml中，分裝后儲藏于-20℃?zhèn)溆谩＃?）3
2018
01-08

農(nóng)藥殘留的危害及相關(guān)檢測方法和檢測項(xiàng)目
農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)化的發(fā)展使農(nóng)產(chǎn)品的生產(chǎn)越來越依賴于農(nóng)藥、抗生素和激素等外源物質(zhì)。我國農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品的用量居高不下，而這些物質(zhì)的不合理使用必將導(dǎo)致農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留超標(biāo)，影響消費(fèi)者食用安全，嚴(yán)重時(shí)會造成消費(fèi)者致病、發(fā)育不正常，甚至直接導(dǎo)致中毒死亡。農(nóng)藥殘留超標(biāo)也會影響農(nóng)產(chǎn)品的貿(mào)易，世界各國對農(nóng)藥殘留問題高度重視，對各種農(nóng)副產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留都規(guī)定了越來越嚴(yán)格的*，使中國農(nóng)產(chǎn)品出口面臨嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。目前農(nóng)藥殘留快速檢測方法種類繁多，究其原理來說主要分為兩大類：生化測定法和色譜檢測法。其中生化測定法中的酶抑制率法由于
2018
01-08

微生物發(fā)酵中藥
中藥發(fā)酵制藥技術(shù)是在繼承中藥炮制學(xué)發(fā)酵法的基礎(chǔ)上,吸取了微生態(tài)學(xué)研究成果,結(jié)合現(xiàn)代生物工程的發(fā)酵技術(shù)而形成的高科技中藥制藥新技術(shù),是從中藥(天然藥物)制藥方面尋找藥物的新療效。傳統(tǒng)的中藥發(fā)酵多是在天然的條件下進(jìn)行的,而現(xiàn)在的中藥發(fā)酵制藥技術(shù)是在充分吸收了近代微生態(tài)學(xué)、生物工程學(xué)的研究成果而逐漸形成的。其先進(jìn)發(fā)酵工藝特點(diǎn)是:以優(yōu)選的有益菌群中的一種或幾種、一株或幾株益生菌作為菌種,加入中藥提取液中,再按照現(xiàn)代發(fā)酵工藝制成產(chǎn)品,它是一種含有中藥活性成分、菌體及其代謝產(chǎn)物的全組分發(fā)酵液的新型中藥發(fā)酵加
2018
01-05

miRNA靶基因預(yù)測與驗(yàn)證相關(guān)問題解答
miRNA主要通過與靶mRNA的結(jié)合，或促使mRNA降解，或阻礙其翻譯，從而抑制目的基因的表達(dá)。用生物信息學(xué)方法準(zhǔn)確快速地預(yù)測miRNA的靶基因，可以為研究miRNA功能提供線索。下面總結(jié)一些熒光素酶實(shí)驗(yàn)中常見的問題。1轉(zhuǎn)染成功如何判斷？共轉(zhuǎn)染的幾個(gè)質(zhì)粒中，3'UTR質(zhì)粒及Renilla質(zhì)粒可通過zui終的luc讀值判斷是否轉(zhuǎn)染成功，而miRNA質(zhì)?；騧imic的轉(zhuǎn)染情況無法從zui終的luc讀值做出判斷，因而針對miRNA，轉(zhuǎn)染是否成功可用以下方法進(jìn)行：i.如轉(zhuǎn)入的miRNA帶熒光標(biāo)記如GFP
2018
01-04

染色體制備
一、人外周血染色體制備1.實(shí)驗(yàn)原理人的外周血淋巴細(xì)胞培養(yǎng)方法是1960年由Moorhead提出來的。正常情況下，人外周血小淋巴細(xì)胞都處在G1期（或G0期），但在體外給予一定的條件，進(jìn)行培養(yǎng)，經(jīng)72h就可獲得大量的有絲分裂細(xì)胞。這種取材簡易、用血量少的培養(yǎng)方法已被廣泛采用。在培養(yǎng)液中加入植物血凝素（PHA），淋巴細(xì)胞受到刺激可轉(zhuǎn)化為淋巴母細(xì)胞，進(jìn)入有絲分裂。短期培養(yǎng)后，經(jīng)秋水仙素處理，可抑制細(xì)胞分裂時(shí)紡錘絲的形成，使細(xì)胞分裂停止在中期，同時(shí)它可改變細(xì)胞質(zhì)的黏度，引起染色體在細(xì)胞質(zhì)中分散。經(jīng)低滲和固
2018
01-04

ELISA 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本采集、處理和保存
一、ELISA實(shí)驗(yàn)中血清的采集、處理和保存1、真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無菌試管中2、采血后室溫靜置1小時(shí)3、將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?-8℃下，可放置保存24-48小時(shí)；-20℃下，可放置保存1個(gè)月；-70℃下，可放置保存6個(gè)月5、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測定。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會釋放出具有過氧化物酶
2018
01-03

丁香中揮發(fā)油的提取分離
丁香別名：公丁香（花蕾）、母丁香（果實(shí)）。為桃金娘科植物丁香EugeniacaryophyllataThunb.的干燥花蕾及果實(shí)。原產(chǎn)于非洲摩洛哥，現(xiàn)我國廣東亦有種植。丁香花蕾含揮發(fā)油（即丁香油）14％～20％，油中主要成分丁香酚，約78％～95％，乙酰丁香酚約3％及少量的丁香烯、甲基正戊酮、甲基正庚酮、香莢蘭醛等。另尚含齊墩果酸、鞣質(zhì)、脂肪油及蠟。果實(shí)含丁香油2％～9％。丁香酚(eugenol)分子式C10H12O2，分子量164.20。無色或蒼黃色液體，bp.225℃。幾不溶于水，與乙醇、乙
2018
01-03

溶菌酶的分離純化
1.蛋清樣品的準(zhǔn)備市售新鮮雞蛋5個(gè)，破蛋殼取出蛋清，加入1.5倍體積的0.1mol/L磷酸鹽緩沖液，pH7.0，攪拌均勻，并調(diào)pH7.0，然后用八層紗布過濾，留取上清液，量取體積并記錄，留0.4mL上清液，并加入0.4mL甘油－20℃凍存?zhèn)溆谩?.陽離子交換層析（1）陽離子交換樹脂的再生：20gAmberlite-CG-50陽離子交換樹脂用0.5mol/LNaOH浸泡30min，水洗至中性，再用0.5mol/LHCl浸泡30min，水洗至中性。（2）平衡：在燒杯中將再生好的陽離子交換樹脂中用0.
2018
01-03

實(shí)用哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)手冊（下）
細(xì)胞培養(yǎng)所用玻璃及塑料制品的清洗與消毒清洗在組織細(xì)胞培養(yǎng)中，體外細(xì)胞對任何有害物質(zhì)都非常敏感。微生物產(chǎn)品附帶雜物，上次細(xì)胞殘留物及非營養(yǎng)成分的化學(xué)物質(zhì)，均能影響培養(yǎng)細(xì)胞的生長。因此對新使用玻璃器皿和重新使用的培養(yǎng)器皿都要嚴(yán)格*的清洗，且要根據(jù)器皿的組成材料不同，選擇不同的清洗方法。玻璃器皿的清洗組織細(xì)胞培養(yǎng)中，使用量zui大的是玻璃器皿，故工作zuizui大的是玻璃器皿的清洗。一般玻璃器皿的清洗包括浸泡、刷洗、浸酸和沖洗四個(gè)步驟。清洗后的玻璃器皿不僅要求干凈透明無油跡，而且不能殘liu任何物質(zhì)。
2018
01-03

實(shí)用哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)手冊（中）
細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境1、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)細(xì)胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù)，要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室和設(shè)計(jì)原則是防止微生物污染和有害因素影響，要求工作環(huán)境清潔、空氣清新，干燥和無煙塵。細(xì)胞培養(yǎng)室的設(shè)計(jì)原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè)，常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室，而洗刷消毒在另一室。2、常用設(shè)施及設(shè)備（1）超凈工作臺：也稱凈化工作臺，分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類。（2）無菌操作間：一般由更衣間、緩沖間和操作間三部分組成。操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、
2018
01-03

實(shí)用哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)手冊（上）
細(xì)胞培養(yǎng)基本概念細(xì)胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)組織取出細(xì)胞在體外模擬體內(nèi)環(huán)境下，使其生長繁殖，并維持其結(jié)構(gòu)和功能的一種培養(yǎng)技術(shù)。細(xì)胞培養(yǎng)的培養(yǎng)物可以是單個(gè)細(xì)胞，也可以是細(xì)胞群。細(xì)胞培養(yǎng)目的與用途1、科學(xué)研究：藥物研究開發(fā)與基礎(chǔ)研究藥物研究與開發(fā)(1)新藥篩選：如化學(xué)合成藥物藥效研究、中藥有效成分篩選與鑒定等。(2)疫苗研究與開發(fā)：如病毒性疫苗的研究與開發(fā)（肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等）、腫瘤疫苗(多肽疫苗)等。(3)基因工程藥物研究與開發(fā)：如干擾素研究與開發(fā)，細(xì)胞生長因子研究與開發(fā)等。(4)細(xì)胞工程藥物研究與
2018
01-02

細(xì)胞培養(yǎng)常見問題解答
1.如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基？培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長?？傊?，MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開始。2.何時(shí)須更換培養(yǎng)基？視細(xì)胞生長密度而定，或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時(shí)間，按時(shí)更換培養(yǎng)基即可3.可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基，若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基，細(xì)胞大都無法立即適應(yīng)，造成細(xì)胞無法存活。4.可否使用與原先培養(yǎng)
2018
01-02

果蠅的飼養(yǎng)準(zhǔn)備
1、Introduction飼養(yǎng)果蠅的準(zhǔn)備1.準(zhǔn)備平底培養(yǎng)管每組8個(gè)，加入少量清潔劑，加入清水，用試管刷來回清洗，然后用自來水洗凈，zui后用純凈水潤洗3次，倒扣在濾紙上晾干。每組另取2個(gè)平底培養(yǎng)管用作麻醉瓶使用。2.準(zhǔn)備2個(gè)廣口瓶、1000mL燒杯、250mL燒杯各一個(gè)，同樣洗凈晾干。3.準(zhǔn)備2把鑷子、2根玻璃棒，洗凈。4.每組準(zhǔn)備16個(gè)濾紙圓錐，大小適宜，頂端開口大小適宜，放入鋁盒中一同滅菌。高壓滅菌鍋原理、注意事項(xiàng)和應(yīng)用1.原理：常規(guī)的加壓滅菌原理：以加熱密閉鍋體內(nèi)部的水和水蒸氣的壓力來提

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