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硒性白內(nèi)障模型2018/03/09

(1)復(fù)制方法取體重為25g左右出生12d齡幼年大鼠，按0.26ml/kg體重的劑量經(jīng)大鼠腹腔注射0.1％亞丨硒丨酸丨鈉溶液，一次注射即可使大鼠發(fā)生白內(nèi)障。(2)模型特點動物造型后5d其晶狀體核即混濁，至30d時模型動物晶狀體核仍混濁。模型動物一次性腹腔注射0.1％亞丨硒丨酸丨鈉溶液3～5d，即可迅速造成嚴重的核性白內(nèi)障，采取本方法復(fù)制的模型比糖性白內(nèi)障動物模型形成的速度(1～2個月)要快得多，本模型復(fù)制方法簡單，耗費低廉，重復(fù)性好。(3)比較醫(yī)學(xué)長期缺硒的兔晶體和肝臟中谷胱甘肽過氧化物酶活性分

藥物安全藥理試驗設(shè)計要求2018/02/02

1.生物材料生物材料有以下幾種：整體動物，離體器官及組織，體外培養(yǎng)的細胞、細胞片段、細胞器、受體、離子通道和酶等。整體動物常用小鼠、大鼠、豚鼠、家兔、犬、非人靈長類等。動物選擇應(yīng)與試驗方法相匹配，同時還應(yīng)注意品系、性別及年齡等因素。生物材料選擇應(yīng)注意敏感性、重現(xiàn)性和可行性，以及與人的相關(guān)性等因素。體內(nèi)研究建議盡量采用清醒動物。如果使用麻醉動物，應(yīng)注意麻醉藥物的選擇和麻醉深度的控制。實驗動物應(yīng)符合對相應(yīng)等級動物的質(zhì)量規(guī)定要求，并具有實驗動物質(zhì)量合格證明。2.樣本量試驗組的組數(shù)及每組動物數(shù)的設(shè)定，應(yīng)

冰凍切片機使用步驟和注意事項2018/02/02

(1)按電源開關(guān)I/O側(cè)的I(開)側(cè)，接通儀器電源。待儀器進行短暫時間的初始化(屏幕上將顯示一個沙漏標志)后，請檢查上方顯示屏是否亮起，是否顯示語言選擇菜單。(2)請檢查速凍臺、冷凍箱及其切片厚度是否為實驗所需要的相74關(guān)數(shù)據(jù)，通常速凍臺為-35℃，冰凍箱為-20℃，切片厚度為6μm。如若不是，在屏幕上點擊要修改的事項，用或調(diào)節(jié)到需要的數(shù)據(jù)。調(diào)節(jié)好后，等待機器降到所調(diào)節(jié)的溫度。(3)將手輪手柄旋轉(zhuǎn)到12點鐘的位置，然后進行制動。將樣品利用冰凍膠固定在樣本托上，并放于速凍臺上降溫。10min后，將

小鼠生化位點檢測2018/02/02

小鼠生化位點檢測乙酸纖維薄膜電泳是生物化學(xué)的方法，該技術(shù)運用于實驗動物遺傳質(zhì)量控制只有二十余年的歷史。由于該方法能檢查近20對等位基因，涉及十幾條染色體，利于反映被檢品系的遺傳概貌，所以，目前認為此法靈敏度高，準確性強，檢出速度快，用樣量小，是遺傳檢測諸方法中較為理想的一種。一、實驗器材1．樣品(1)血清：用于Es-1和Trf兩位點檢查。(2)溶血清：用于檢查Hbb、Car-2和Ldr-1位點。(3)腎勻漿：用于檢查Es-2、Es-3、Idh-1、Mod-1、Akp-1、Pgm-1、Pep-1、

免疫學(xué)檢測方法與免疫技術(shù)2018/02/02

免疫學(xué)檢測方法與免疫技術(shù)免疫學(xué)檢驗方法和免疫化學(xué)技術(shù)主要包括：抗原抗體的制備、純化和鑒定，免疫擴散、免疫電泳、免疫凝集試驗、補體結(jié)合試驗，免疫細胞分離、純化和鑒定，免疫功能檢測，細胞因子檢測，放射免疫檢測，免疫酶標檢測，熒光和發(fā)光免疫技術(shù)，免疫組化實驗方法，原位雜交免疫組化，免疫PCR技術(shù)，免疫微球的應(yīng)用，免疫電鏡技術(shù)，細胞凋亡的檢測方法，膜受體分析，胞內(nèi)鈣鎂濃度的測定和細胞間通訊，流氏細胞儀技術(shù)及應(yīng)用等。從上述內(nèi)容可以看出，免疫技術(shù)是免疫學(xué)和物理、化學(xué)及電子信息和分子生物學(xué)理論和技術(shù)的結(jié)合產(chǎn)物

構(gòu)建基于熒光多重cPCR的小鼠基因拷貝數(shù)檢測方法2018/02/02

構(gòu)建基于熒光多重cPCR的小鼠基因拷貝數(shù)檢測方法目的：建立基于競爭性聚合酶鏈式反應(yīng)(competitivepolymerasechainreaction,cPCR)小鼠基因拷貝數(shù)變異(copynumbervariations,CNVs)的檢測方法,用于檢測野生小家鼠來源一號染色體替換系群體(populationofspecificchromosome1substitutionstrains,PCSSs)的CNVs。方法：選取小鼠一號染色體上11個CNVs位點,及7、9和X染色體上各1個內(nèi)對照位點

ELISA：用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法2018/02/02

ELISA：用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。2.加樣：加稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗

ELASA：用于檢測未知抗體的間接法2018/02/02

ELASA：用于檢測未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。5.終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸

藥物安全藥理主要研究內(nèi)容2018/01/25

1.核心組合試驗安全藥理學(xué)的核心組合試驗的目的是研究受試物對重要生命功能的影響。中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)通常作為重要器官系統(tǒng)考慮，也就是核心組合試驗要研究的內(nèi)容。根據(jù)科學(xué)合理的原則，在某些情況下，可增加或減少部分試驗內(nèi)容，但應(yīng)說明理由。1.1中樞神經(jīng)系統(tǒng)定性和定量評價給藥后動物的運動功能、行為改變、協(xié)調(diào)功能、感覺/運動反射和體溫的變化等，以確定藥物對中樞神經(jīng)系統(tǒng)的影響?？蛇M行動物的功能組合試驗。1.2心血管系統(tǒng)測定給藥前后血壓（包括收縮壓、舒張壓和平均壓等）、心電圖（包括QT間期、PR

離心機的使用和管理2018/01/25

離心機是實驗室常用的基礎(chǔ)設(shè)備之一，主要用于各種生物樣品的分離。按轉(zhuǎn)速可分為低速、高速和超速離心機；按溫度可分為冷凍和常溫離心機。離心機轉(zhuǎn)動速度快，要注意安全，特別要防止在離心機運轉(zhuǎn)期間，因不平衡或試管墊老化，而使離心機邊工作邊移動，以致從實驗臺上掉下來，或因蓋子未蓋，離心管因振動而破裂后，玻璃碎片旋轉(zhuǎn)飛出，造成事故。因此使用離心機時，注意以下操作：(1)離心機的安裝：根據(jù)離心機的性能選擇合適的地點放置，對一般低速離心機和小型高速離心機(臺式)可放在平穩(wěn)、堅固的臺面上(它的底座應(yīng)裝有橡皮吸角)，水

用GEO腦補出來的外泌體2018/01/17

閑得沒事時候，我就比較喜歡隨便吹吹牛。嗯，比如編一個外泌體的看看。嗯，是這樣的：外泌體加LncRNA應(yīng)該能算是有點意思了吧，反正我手上屁都沒有，所以我就用GEO挖挖看，看能挖出什么來：嗯，搜搜看LncRNA和外泌體的芯片，果然還是可以有點內(nèi)容的：這是個前列腺癌的外泌體芯片，就是它了。隨便分下組：可以挑一些外泌體中表達量高那種LncRNA：但是光靠這些，就能腦補出一篇點的么？應(yīng)該能吧，因為我們現(xiàn)在只有既然是外泌體里高表達的LncRNA，那會有靶細胞，這些LncRNA進入靶細胞后起到作用，而常見的L

免疫組化分析簡單介紹2017/12/07

你想要免疫組化的片子能更快更準確地識別么？你想要瞬間就把組畫里的陽性評級都算好么？下面簡單介紹下免疫組化簡單分析。是有這么個小插件能用一下的，這個插件是在ImageJ里的一個小插件。這個插件叫IHCProfiler，下載完有這么倆文件，全部復(fù)制粘貼到ImageJ的Plugin文件夾里:先通過ImageJ打開免疫組化的圖片：然后，從上面的Plugins的菜單里找到IHCProfiler：接著選擇細胞質(zhì)中的表達：然后選擇DAB染色：于是，顏色就直接分開了：當然，這不能做為直接的評分，接著就要用IHC

細胞增殖到底用MTT還是CCK8呢？2017/11/30

MTT增殖曲線，基本上就是基礎(chǔ)的功能實驗了，養(yǎng)過細胞的你應(yīng)該都會做。但是，要怎么樣才能省時省力呢？你也知道，如果用MTT的話，加入10ul的MTT后要等四個小時，在活細胞的線粒體中形成甲囋，然后在把培養(yǎng)基吸掉，再加上DMSO溶解，進行檢測。這個方法是常用的MTT方法，但是會有三個問題，*個是有的甲囋不容易溶解。還有一個問題就是，由于要讓DMSO充分溶解甲囋，所以會要混勻，就會產(chǎn)生泡沫，影響酶標儀讀值：第三個問題，就是在吸去培養(yǎng)基的時候，容易把甲囋也吸走，導(dǎo)致終讀值不準。當然也不是沒有辦法的，這篇

你真以為做ceRNA就這么簡單么？2017/11/23

大家一直都覺得ceRNA的研究，就是研究LncRNA的簡便機制了是吧。因為都不用來論證啥，就直接證明LncRNA和對應(yīng)的mRNA能同時結(jié)合miRNA就行了，不是么？其實，也不全是，當然，要是把ceRNA作為低分的LncRNA研究機制的話，那簡單的就是做一個Luciferase實驗：也就是利用Luciferase的3'UTR結(jié)合miRNA，來驗證一下lncRNA和mRNA是不是分別能和miRNA結(jié)合。這個都是研究miRNA的基本套路。但LncRNA并不會表達蛋白，所以用Luciferase的方法，

發(fā)CNS文章，都用了哪些試劑盒？2017/11/23

你要知道哪個抗體好用么？哪個qPCR試劑盒用了以后發(fā)了高分蚊帳？我是不知道，但我知道要怎么樣才能知道。是不是很拗口？挖掘文獻，除了挖數(shù)據(jù)還能挖出點啥？能挖出試劑盒和試劑好不好用，嗯，沒錯，有很多文獻的MaterialsａndMethods里面會標明試劑盒的生產(chǎn)供應(yīng)商。就是有這么一個文獻挖掘工具，可以幫你挖出文獻中的試劑盒：我們隨便輸入一個GFP的抗體查查看哈，就出現(xiàn)了這樣的結(jié)果：當然這樣的結(jié)果，你并不會看得很懂。我們拆解一下哈,左側(cè)那一欄，是挖掘出來的，與這個抗體相關(guān)的供應(yīng)商以及相關(guān)實驗：接著，

如何快速找出miRNA相關(guān)的信號通路？2017/11/16

那天突然有人問我，miRNA是不是能做出那種network的網(wǎng)絡(luò)圖，就跟那種文章里一樣？其實我自己也忘了到底應(yīng)該怎么整了，簡單點的話，就自己去搜搜看miRNA怎么樣對應(yīng)基因做成列表就行了吧。但是負責(zé)任的我，還是搜到了一些miRNA分析的工具。對，就是上面這個工具，可以分析單個基因或者多個基因?qū)蝹€miRNA和多個miRNA，實際上跟形成network圖沒什么關(guān)系。只是覺得這個做出來的東西，還蠻有意思的。我們可以搜多個miRNA與多個基因間的關(guān)系：然后，它就會生成這么一個特別草率的二型網(wǎng)絡(luò)圖……點

突破！科學(xué)家有望利用干細胞來開發(fā)出*糖尿病的新型療法2017/11/16

日前，一項在雜志NatureCellBiology上的研究報告中，來自哥本哈根大學(xué)的研究人員通過進行一項新型的干細胞研究，闡明了如何有效增加糖尿病患者機體中胰島素的產(chǎn)生，這項研究發(fā)現(xiàn)或能幫助研究者更加有效地以低成本通過人類干細胞來制造產(chǎn)生胰島素的β細胞，同時也能開發(fā)出治療糖尿病的有效療法，對于開發(fā)治療其它疾病的新型療法也具有重要的意義。目前有4.15億糖尿病患者，而且這一數(shù)字仍在繼續(xù)上升中，糖尿病患者的共同點就是機體中缺乏制造足夠胰島素的能力，進而誘發(fā)患者出現(xiàn)一系列并發(fā)癥和致死性疾病等；胰島素能

肥胖癥疾病研究中動物模型2017/11/10

肥胖癥是一組常見的代謝癥群。當人體進食熱量多于消耗熱量時，多余熱量以脂肪形式儲存于體內(nèi)，其量超過正常生理需要量，且達值時遂演變?yōu)榉逝职Y。正常男性成人脂肪組織重量占體重的15%～18%，女性占20%～25%。隨年齡增長，體脂所占比例相應(yīng)增加。關(guān)于肥胖的評估方法，包括人體測量學(xué)、雙能X線吸收法、超聲、CT、紅外線感應(yīng)法等多種。如無明顯病因者稱單純性肥胖癥，有明確病因者稱為繼發(fā)性肥胖癥。外因以飲食過多而活動過少為主。熱量攝入多于熱量消耗，使脂肪合成增加是肥胖的物質(zhì)基礎(chǔ)。內(nèi)因為脂肪代謝紊亂而致肥胖。1.

低血糖疾病動物模型2017/11/10

低血糖是指成年人空腹血糖濃度低于2.8mmol/L。糖尿病患者血糖值≤3.9mmol/L即可診斷低血糖。低血糖癥是一組多種病因引起的以靜脈血漿葡萄糖（簡稱血糖）濃度過低，臨床上以交感神經(jīng)興奮和腦細胞缺氧為主要特點的綜合征。低血糖的癥狀通常表現(xiàn)為出汗、饑餓、心慌、顫抖、面色蒼白等，嚴重者還可出現(xiàn)精神不集中、躁動、易怒甚至昏迷等。臨床上反復(fù)發(fā)生空腹低血糖癥提示有器質(zhì)性疾病；餐后引起的反應(yīng)性低血糖癥，多見于功能性疾病。1.空腹低血糖癥（1）內(nèi)源性胰島素分泌過多：常見的有胰島素瘤、自身免疫性低血糖等。（

SCTM：發(fā)現(xiàn)一種新的干細胞來源---骨膜組織2017/11/03

在一項新的研究中，研究人員發(fā)現(xiàn)在常規(guī)的髖關(guān)節(jié)置換術(shù)(hipreplacementsurgery)期間通常丟棄的骨膜組織富含成體干細胞，有望提供一種用于再生醫(yī)學(xué)的干細胞新來源。相關(guān)研究結(jié)果近期在StemCellsTranslationalMedicine期刊上，標題為“Arthriticperiostealtissuefromjointreplacementsurgery:anovel,autologoussourceofstemcells”。鑒于每年有上萬人接受髖關(guān)節(jié)置換術(shù)治療，這種組織可能在臨