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上海申知心生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年
胰腺癌肝轉(zhuǎn)移新機(jī)制:巨噬細(xì)胞與成纖維細(xì)胞的 JAK/STAT 信號(hào) “串?dāng)_“2025/07/14
朋友們,今天要帶大家探索一篇雜志《Naturecommunications》影響因子:15.7期刊ISSN:2041-1723分區(qū):中科院1區(qū),且為TOP期刊。發(fā)文量:10926/年(2024年)自引率:3.40%審稿速度:平均審稿周期約1個(gè)月下面這篇文章就發(fā)表在《Naturecommunications》上:文章標(biāo)題:Macrophage-fibroblastJAK/STATdependentcrosstalkpromoteslivermetastaticoutgrowthinpancreat
小鼠頸外靜脈注射方法一2025/07/02
頸靜脈包括頸內(nèi)靜脈和頸外靜脈,頸外靜脈位置表淺,適合一次性采血和局部藥物注射,本文介紹頸外靜脈藥物注射方法。1.小鼠麻醉;2.頸部脫毛,消毒;3.暴露頸部外側(cè),確保注射部位清晰可見;4.右手持注射器,針頭斜面朝上,與皮膚呈30-45°角進(jìn)針;5.進(jìn)針后輕輕回抽,有血液回流,說明針頭已進(jìn)入靜脈;6.緩慢注入藥物,注射劑量5U;7.注射完畢后,迅速拔出針頭,用干棉球按壓注射部位止血。伊萊博生物擁有豐富的研究經(jīng)驗(yàn),具備完善的系統(tǒng)化管理能力和科研服務(wù)體系。目前已自建細(xì)胞、分子、病理等實(shí)驗(yàn)平臺(tái)近1000平
血液中的糖質(zhì)密碼——新型生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn)2025/06/26
糖質(zhì)(glycan)是生物體系中糖類分子的通稱,是構(gòu)成生命的基本生物分子。糖質(zhì)既可單獨(dú)存在,又能與蛋白、脂質(zhì)等形成結(jié)構(gòu)豐富的糖綴合物,在生命過程中發(fā)揮重要作用,與人類健康和疾病密切相關(guān)。解析“糖質(zhì)密碼(glycocode)”為重大疾病的診療與防治提供理論依據(jù),為生物醫(yī)藥發(fā)展奠定基礎(chǔ)。其中體液中的“糖質(zhì)密碼(glycocode)”可能潛藏著未知的疾病診斷的生物標(biāo)志物?;谫|(zhì)譜的糖蛋白質(zhì)組學(xué)方法為我們?cè)隗w液中篩選潛在糖肽和糖蛋白質(zhì)作為診斷標(biāo)志物。血液樣本是臨床最常見的檢測(cè)樣本,血液中包含了蛋白質(zhì)、代
FMO2 通過與 IP3R2-GRP75-VDAC1作用維持ER-線粒體結(jié)合來預(yù)防病理性心臟肥大2025/06/25
來來來,朋友們,今天給大家分享個(gè)厲害的雜志~先聽聽它的名頭:心血管領(lǐng)域的頂級(jí)期刊、創(chuàng)刊久且影響力持續(xù)在線,地位很高啊,它就是Circulation!影響因子:多年保持在較高水平,如2024年IF為35.5,一直穩(wěn)居心血管領(lǐng)域前列。SSN:0009-7322(P-ISSN)。分區(qū):中科院醫(yī)學(xué)1區(qū)TOP,小類“心臟和心血管系統(tǒng)”及“外周血管病”均為1區(qū),JCR分區(qū)為Q1,排名靠前。發(fā)文量:2024約245篇。發(fā)刊頻率:每周審稿速度:原創(chuàng)研究文章的交付時(shí)間:從投稿到第一次決定:17天;接受提前印刷出版
糖基化的新角色:如何在子宮內(nèi)膜中為胚胎著床鋪路?2025/06/10
【研究背景】胚胎植入是懷孕的關(guān)鍵步驟,發(fā)生在子宮內(nèi)膜處于“植入窗口期”時(shí),此時(shí)子宮內(nèi)膜對(duì)胚胎具有最高的接受性。這一過程受卵巢類固醇激素(雌二醇和孕酮)的調(diào)控。然而,不孕問題影響了眾多夫婦,盡管體外受精-胚胎移植技術(shù)已經(jīng)發(fā)展,但成功率仍然只有大約30%,失敗的原因主要與胚胎植入有關(guān)。因此,深入理解胚胎植入的分子機(jī)制對(duì)于提高不孕治療的成功率至關(guān)重要。糖基化作為蛋白質(zhì)的一種重要翻譯后修飾,其在細(xì)胞間相互作用中發(fā)揮關(guān)鍵作用,尤其是在胚胎植入過程中,特定的糖鏈結(jié)構(gòu)可能與胚胎與子宮內(nèi)膜的相互識(shí)別和附著密切相
蛋白酶體可通過切割宿主蛋白生成AMPs直接對(duì)抗細(xì)菌感染2025/06/03
研究背景蛋白酶體是細(xì)胞內(nèi)負(fù)責(zé)降解泛素化蛋白質(zhì)的關(guān)鍵復(fù)合體,傳統(tǒng)認(rèn)知集中于其維持蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)的功能。然而,Goldberg等人的研究揭示了蛋白酶體在抗細(xì)菌天然免疫中的全新角色:通過切割宿主蛋白生成抗菌肽(AntimicrobialPeptides,AMPs),直接參與宿主防御。這一發(fā)現(xiàn)突破了蛋白酶體功能的傳統(tǒng)邊界,為理解天然免疫機(jī)制提供了新視角,并為開發(fā)新型抗生素(尤其是針對(duì)多重耐藥菌)提供了潛在策略。研究內(nèi)容1.蛋白酶體生成AMPs的假設(shè)驗(yàn)證:生物信息學(xué)預(yù)測(cè):通過模擬蛋白酶體切割位點(diǎn),發(fā)現(xiàn)15%-
大鼠腸系膜淋巴結(jié)取材2025/05/30
1.麻醉大鼠;2.打開腹腔,找到盲腸;3.從回盲角延伸至腸系膜根部的位置,找淋巴結(jié);4.在腸系膜的起點(diǎn)處,有一個(gè)較大的淋巴結(jié)群,由5~6個(gè)淋巴濾泡融合而成;5.淋巴結(jié)形狀橢圓形;6.淋巴結(jié)PAS染色;7.T細(xì)胞標(biāo)記物的免疫組化染色;8.巨噬細(xì)胞標(biāo)記物的免疫組化染色。上海申知心生物科技有限公司(簡稱“申知心生物”),是一家“提供全面、系統(tǒng)、高質(zhì)量的心血管相關(guān)疾病研究服務(wù)平臺(tái)”的創(chuàng)新型企業(yè),致力于搭建基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床轉(zhuǎn)化服務(wù)體系并開展基于藥效學(xué)評(píng)價(jià)的臨床前CRO服務(wù),提供各種成熟的心血管疾病模式動(dòng)物。
人外周血PBMC的CD4+ T細(xì)胞磁珠分選2025/05/30
一、人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)的分離1.3ml抗凝血加入3ml1×PBS進(jìn)行稀釋。2.在15ml離心管內(nèi)加入3ml淋巴細(xì)胞分離液,再在液面上方平鋪3ml稀釋過的抗凝血,常溫下,水平離心機(jī)600g,離心30min。3.吸取中間白膜層細(xì)胞,加入15ml離心管中,再加入10ml1×PBS混勻,常溫下,1000rpm,離心10min,棄上清,每管加入2mlMACS緩沖液重懸細(xì)胞并計(jì)數(shù),調(diào)整細(xì)胞數(shù)量,每個(gè)樣本不超過107個(gè)細(xì)胞。4.2000rpm,離心3min,棄上清。二、磁珠分選1.每管加入40ul
小鼠鼻粘膜取材2025/05/20
1.8周齡的BALB/c小鼠;2.頸椎脫臼處死小鼠,去掉頭部皮膚;3.將剪刀伸進(jìn)口腔,沿一側(cè)下頜剪開小鼠臉頰部;4.分離暴露小鼠上顎;5.用剪刀剪開上顎骨,用鑷子往左右兩側(cè)撬開;6.可見覆蓋在左右上頜骨的鼻粘膜及鼻骨中隔兩側(cè)的鼻粘膜;7.用眼科鑷夾下鼻粘膜。8.取下的鼻粘膜可用于鼻粘膜蛋白與RNA的提取等實(shí)驗(yàn)。組織學(xué)研究小鼠鼻腔黏膜組織分為呼吸區(qū)黏膜和嗅區(qū)黏膜,結(jié)構(gòu)和功能差異大,疾病模型下病理表現(xiàn)不同。人類和小鼠嗅區(qū)黏膜分布差異大。制作小鼠鼻部組織染色不建議直接提取鼻黏膜,分離小鼠頭部后4%多聚
小鼠腦缺血再灌注損傷模型2024/03/05
1.體重22-28g的雄性C57Bl/6小鼠,用5%異氟醚深度麻醉小鼠,然后2.5%異氟醚維持麻醉。2.在頸部中線切開一個(gè)切口。3.分離右側(cè)的頸總動(dòng)脈和迷走神經(jīng)。4.右側(cè)的頸總動(dòng)脈暫時(shí)結(jié)扎。5.分離右側(cè)的頸外動(dòng)脈和頸內(nèi)動(dòng)脈,右側(cè)的頸內(nèi)動(dòng)脈暫時(shí)結(jié)扎;右側(cè)的頸外動(dòng)脈頭端結(jié)扎,近心端掛線備用。6.隨后,用無菌的1ml注射器針頭在右側(cè)頸外動(dòng)脈上做一個(gè)小洞,然后插入線栓,近心端掛線適度的系牢插入右側(cè)頸外動(dòng)脈的線栓,以防止血從小洞中流出;松開右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈暫時(shí)的結(jié)扎線,輕輕送入線栓到大腦中動(dòng)脈,當(dāng)感覺到阻力時(shí)
心肌細(xì)胞的原代培養(yǎng)2024/03/05
1.準(zhǔn)備0-1天內(nèi)的SD大鼠新生鼠。2.用溫的無菌去離子水,輕輕擦拭每只新生鼠。3.用70%的乙醇去除新生鼠身體上的污染物。4.斷頭,取心臟,心臟置于冰的PBSG溶液中。5.除去血液和非心臟組織。6.剪碎心臟組織。7.加入胰酶-膠原酶消化液,每只新生鼠75ul。8.在37°C的搖床培養(yǎng)箱中,以250rpm/5min,消化心肌組織。9.輕輕渦旋,然后離心10秒,丟棄第一次消化的上清液。10.開始第二次消化,250rpm/5min后,輕輕渦旋,然后離心10秒,收集含心肌細(xì)胞的上清液到2倍體積的馬血清
腦積水大鼠模型的建立2024/01/09
腦積水大鼠模型的建立腦積水大鼠模型的建立方法:1.雄性SD大鼠、8周齡,戊ba比妥鈉麻醉。2.大鼠頭頸部皮膚去毛后,固定在立體定位上,常規(guī)消毒。3.在頸部后面的皮膚上做一個(gè)中線切口,鈍性分離肌肉,暴露寰枕膜。4.微量注射器進(jìn)入寰枕膜失去阻力后停針,注入0.02mL無菌高嶺土懸浮液。5.注射速度6ul/s,注射后停針10min。6.拔針后,用醫(yī)用耳腦膠封閉針眼,縫合切口,術(shù)后抗感染治療。7.術(shù)后每天給大鼠稱重并監(jiān)測(cè)其神經(jīng)功能缺陷。8.大鼠術(shù)后3周,經(jīng)MRI檢查確認(rèn)模型成功后,取其腦組織,4%多聚甲
自體血液輸注建立小鼠腦出血模型2024/01/09
自體血液輸注建立小鼠腦出血模型自體血液輸注建立小鼠腦出血模型的模型建立:1.C57BL/6J雄性小鼠,25–30g。2.稱重、麻醉,確認(rèn)麻醉深度。3.當(dāng)小鼠失去意識(shí)時(shí),在立體定位儀上固定小鼠頭部,用鑷子檢查小鼠頭部的固定情況。4.用兩個(gè)耳棒和鼻夾固定小鼠頭部,顱平面水平。5.切開頭皮,確認(rèn)bregma點(diǎn),記下坐標(biāo)。6.在右側(cè)頭骨上標(biāo)記點(diǎn)處鉆一個(gè)孔,bregma前0.2mm,深3.5mm,側(cè)2.2mm。7.切尾法取小鼠自體血30ul。8.用微量注射器連接抽吸肝素的細(xì)管,抽吸血液,以2ul/min的
高血脂癥動(dòng)物模型可用于研究高血脂癥的發(fā)病機(jī)制和藥物治療2023/09/08
高血脂癥動(dòng)物模型是一種重要的實(shí)驗(yàn)工具,用于研究高血脂癥的發(fā)病機(jī)制和藥物治療。通過利用這些模型,我們可以更好地理解高血脂癥對(duì)心血管健康的影響,并為預(yù)防和治療高血脂癥提供新的思路和方法。然而,進(jìn)一步的研究仍然需要結(jié)合臨床觀察和其他研究手段,以全面而準(zhǔn)確地理解高血脂癥及其相關(guān)疾病。常用的高血脂癥動(dòng)物模型包括小鼠、大鼠、兔子等。這些動(dòng)物模型可以通過不同的方法誘導(dǎo)高血脂癥,如高脂飲食、基因突變或遺傳改良等。通過建立這些模型,研究人員可以模擬人類高血脂癥的特征,并觀察其對(duì)心血管系統(tǒng)的影響。利用高血脂癥動(dòng)物模
胎鼠海馬神經(jīng)元的原代培養(yǎng)2023/02/28
一、背景海馬是大腦顳葉內(nèi)側(cè)的一個(gè)解剖結(jié)構(gòu),因?yàn)樾螤铑愃坪qR稱為海馬體。海馬體的主要組成基本單位是神經(jīng)元,海馬神經(jīng)元的生理功能與人的記憶密切相關(guān)。一些疾病會(huì)使海馬神經(jīng)元出現(xiàn)損傷,比如常見的阿爾茲海默病、單純皰疹病毒性腦炎、自身免疫性腦炎等等,如果這些疾病出現(xiàn),就會(huì)導(dǎo)致記憶障礙,甚至癡呆的表現(xiàn)。神經(jīng)細(xì)胞是近代神經(jīng)學(xué)科中研究重點(diǎn)之一,神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)是指在體外模擬建立體內(nèi)生長條件,使神經(jīng)細(xì)胞或神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞在其生存和生長并維持其形態(tài)和功能的方法。神經(jīng)細(xì)胞體外培養(yǎng)技術(shù)已成為當(dāng)今神經(jīng)科學(xué)研究中的主要方法之一
胎鼠皮層神經(jīng)元的原代培養(yǎng)2023/02/28
一、背景大腦皮層是調(diào)節(jié)軀體運(yùn)動(dòng)的高級(jí)中樞。它由初級(jí)感覺區(qū)、初級(jí)運(yùn)動(dòng)區(qū)和聯(lián)合區(qū)三部分構(gòu)成。人類大腦皮層的神經(jīng)細(xì)胞約有140億個(gè),面積約2200平方厘米,主要含有錐體形細(xì)胞、梭形細(xì)胞和星形細(xì)胞(顆粒細(xì)胞)及神經(jīng)纖維。體外原代培養(yǎng)神經(jīng)元作為神經(jīng)科學(xué)研究的有力手段,越來越受到廣大科研工作者的重視。由于神經(jīng)元是一種高度分化的細(xì)胞,動(dòng)物出生后很少分裂,相對(duì)于其它細(xì)胞而言,神經(jīng)元在體外更難以存活和生長。因此,體外培養(yǎng)神經(jīng)元要求的培養(yǎng)方法和營養(yǎng)條件均較為特殊。二、實(shí)驗(yàn)步驟1.無菌條件下,從懷孕18天的SD大鼠腹
煙霧吸入誘發(fā)急性呼吸窘迫綜合征大動(dòng)物模型2021/11/25
背景:急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)是多因素的,可由膿毒癥、創(chuàng)傷或肺炎等原發(fā)性疾病引起。它是危重病人死亡的主要原因之一,據(jù)報(bào)道死亡率高達(dá)45%。本研究的重點(diǎn)是建立煙霧吸入誘導(dǎo)ARDS的大型動(dòng)物模型,以期為科學(xué)界提供可靠、可重復(fù)的孤立性毒性吸入損傷誘導(dǎo)的ARDS大型動(dòng)物模型。方法:全身麻醉下在超聲引導(dǎo)下放置頸動(dòng)脈、肺動(dòng)脈和股動(dòng)脈導(dǎo)管后,動(dòng)物(n=21)暴露于煙霧中1至2小時(shí)。在整個(gè)過程中監(jiān)測(cè)外周血氧飽和度(SpO2)、生命體征和呼吸參數(shù)。在煙霧暴露之前、期間和之后采集胸部x光片、頸動(dòng)脈、股動(dòng)脈和肺
二甲雙胍、白藜蘆醇和雷帕霉素抑制小鼠肝臟蛋白質(zhì)組的營養(yǎng)性重編程2021/11/25
澳大利亞悉尼大學(xué)StephenJ.Simpson、DavidG.LeCouteur等研究人員合作發(fā)現(xiàn),二甲雙胍、白藜蘆醇和雷帕霉素抑制小鼠肝臟蛋白質(zhì)組的營養(yǎng)性重編程。該項(xiàng)研究成果于2021年11月11日在線發(fā)表在《細(xì)胞—代謝》雜志上。研究人類通過使用營養(yǎng)幾何框架來揭示了飲食和藥物對(duì)小鼠肝臟蛋白質(zhì)組的互動(dòng)和比較效應(yīng),這些飲食處理在宏量營養(yǎng)素比例、能量密度和藥物處理(二甲雙胍、雷帕霉素、白藜蘆醇)方面有所不同。飲食能量和剪接體之間有強(qiáng)烈的負(fù)相關(guān),飲食蛋白質(zhì)和線粒體之間有強(qiáng)烈的正相關(guān),在高蛋白質(zhì)攝入時(shí)
倫理審查與科學(xué)無關(guān)嗎2021/11/10
在本號(hào)前文《動(dòng)物實(shí)驗(yàn)為何要開展倫理審查》中曾提到“在科學(xué)界,部分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的計(jì)劃制定者和實(shí)施者也存在著否定、不接受或不關(guān)注科學(xué)研究與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理之間存在關(guān)聯(lián)的事實(shí)”。那么動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的倫理審查與科學(xué)或者科學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果真的不相干嗎?答案顯然是否定的。我們都知道實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域內(nèi)除了設(shè)備、信息和試劑外的另一個(gè)基本要素。隨著現(xiàn)代科技的發(fā)展,科學(xué)家們很容易獲得高精尖的儀器設(shè)備、高精純的化學(xué)試劑和相關(guān)研究領(lǐng)域的情報(bào)信息。遺憾的是,科學(xué)家們?cè)趯?shí)際工作中,往往非常重視設(shè)備、信息和試劑這三個(gè)要素,也舍得
冬凌草甲素通過調(diào)控UBC9表達(dá)對(duì)肝星狀細(xì)胞增殖、凋亡的影響2021/11/10
目的探討冬凌草甲素對(duì)肝星狀細(xì)胞增殖、凋亡的影響和分子機(jī)制。方法采用不同濃度的冬凌草甲素干預(yù)肝星狀細(xì)胞(HSC-T6)48h。分別采用噻唑藍(lán)(MTT)實(shí)驗(yàn)、流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)HSC-T6細(xì)胞增殖和凋亡變化。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白質(zhì)印記(Westemblot)檢測(cè)泛素結(jié)合酶9(UBC9)表達(dá)變化。轉(zhuǎn)染UBC9小干擾RNA(si-UBC9)下調(diào)HSC-T6細(xì)胞中UBC9表達(dá)水平,采用上述方法檢測(cè)細(xì)胞增殖、凋亡變化。結(jié)果冬凌草甲素干預(yù)后,HSC-T6細(xì)胞增殖抑制率、凋亡率顯著升高,U
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