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上海申知心生物科技有限公司
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NIH裸小鼠感染模型2019/09/27
NIH裸小鼠感染模型(1)復(fù)制方法取4周齡NIH裸小鼠,腹腔接種100TCID10的-4次方/0.5ml病毒0.2ml,毒株為EHFVLN-84L。病毒檢查:肺上皮細(xì)胞、毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞、大腦皮質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞、腎小管上皮細(xì)胞、心肌細(xì)胞和部分肝細(xì)胞胞漿內(nèi)均檢測到病毒抗原。病毒分布以肺、大腦、腎為主,心和肝臟次之,且病毒抗原主要分布于相應(yīng)組織細(xì)胞胞漿內(nèi)。電鏡檢查:腦、肺、腎等組織中發(fā)現(xiàn)大量的布尼亞樣病毒顆粒和病毒包涵體。(2)模型特點模型動物的腦、心、肝、脾、肺、腎均有特異抗原,腦內(nèi)抗原熒光亮。從該模型
腦缺血嚙齒類動物模型的制備方法2019/09/27
腦缺血嚙齒類動物模型的制備方法一、嚙齒類動物全腦缺血模型研究表明,人類約50%心跳驟停的幸存者會的運動或認(rèn)知功能障礙。嚙齒類動物急性全腦缺血模型可以模擬心跳驟停造成的選擇性腦損害。目前多采用沙鼠制備這種模型,沙鼠缺少完整的Willis動脈環(huán),結(jié)扎或者夾閉雙側(cè)頸內(nèi)動脈即可制作急性全腦缺血模型,移除動脈夾可以實現(xiàn)再灌注。沙鼠全腦缺血模型制作方法簡單,造模后沙鼠的海馬區(qū)神經(jīng)元改變與人類心跳驟停后海馬CA1區(qū)神經(jīng)元的改變具有相似性,24h后的病理生理過程也非常近似,現(xiàn)廣泛用于神經(jīng)元遲發(fā)性死亡研究和神經(jīng)保
乳小鼠HV感染模型2019/09/06
乳小鼠HV感染模型(I)復(fù)制方法出生后48~72h的昆明種乳鼠,經(jīng)其腦內(nèi)接種0.02ml已經(jīng)過乳鼠傳代適應(yīng)的漢坦病毒76/118株(LD5010的-6.5次方/0.02ml)。接種后乳鼠腦組織有典型的病毒性腦炎變化。光鏡下病理組織學(xué)觀察顯示,腦組織內(nèi)呈彌散性小靜脈、毛細(xì)血管擴張充血,小血管間隙增寬,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞小灶狀增生,部分神經(jīng)細(xì)胞變性;肺組織內(nèi)可見散在出血灶、肺泡間隔小血管充血、擴張;腎組織內(nèi)腎小管上皮細(xì)胞水樣變性,腎小管腔內(nèi)可見管型。腦組織病變早出現(xiàn)于病毒感染后的第2日,表現(xiàn)為皮層下廣泛性
帕金森病嚙齒類動物模型的制備方法2019/09/06
帕金森病嚙齒類動物模型的制備方法一、通過耗竭單胺類神經(jīng)遞質(zhì)制作PD模型(一)利血平模型利血平是一種生物堿。通過不可逆地封閉囊內(nèi)單胺運輸消耗中樞和外周單胺,從而影響細(xì)胞內(nèi)囊泡的單胺再循環(huán),于20世紀(jì)50年代被用于制作大鼠PD模型。當(dāng)嚙齒類動物注射利血平后,囊內(nèi)攝取的DA、5-羥色胺(5-HT)和去甲腎上腺素(NA)被封閉,在胞質(zhì)內(nèi)被降解,快速降低單胺水平,導(dǎo)致肌肉僵硬等PD的癥狀。制備方法:應(yīng)用雄性Wistar大鼠,腹腔內(nèi)注射一定劑量的利血平后即可使其出現(xiàn)骨骼肌僵硬、震顫、姿勢異常。該模型制作方法
高致病性禽流感(H5N1)病毒感染模型2019/08/30
禽流感(avianinfluenza,AI)是由A型流感病毒(avianinfluenzaviruses,AIV)引起的一種禽類的急性、高度接觸性、烈性傳染病,可引起禽類的感染或疾病綜合征。該病毒屬正黏病毒科、流感病毒屬,其含有神經(jīng)氨酸酶和血凝素,可凝集某些動物的紅細(xì)胞,對消化道、呼吸道系統(tǒng)具有致病性。雞、火雞、鴨和鵪鶉等家禽及野鳥、水禽、海鳥等均可感染,而家養(yǎng)的雞和火雞引起的危害為嚴(yán)重,國外報道,已發(fā)現(xiàn)帶毒鳥類達88種。根據(jù)其對易感雞致病性強弱,可將禽流感病毒分為高致病性AIV(如H5N1等)
阿爾茨海默病嚙齒類動物模型的制備方法2019/08/30
一、衰老動物模型AD多發(fā)于老年人。衰老是AD肯定的危險因素。隨著世界人口的老齡化,AD的患病率顯著上升,已成為成人的第4位死因,于是出現(xiàn)了以衰老作為AD發(fā)病基礎(chǔ)的動物模型。(一)自然衰老認(rèn)知障礙動物模型通過動物本身的自然衰老來獲得的AD動物模型,包括老齡大鼠、小鼠及猴等。這類模型的認(rèn)知障礙等神經(jīng)系統(tǒng)改變是自然發(fā)生的,更貼近AD的真實病理生理改變。Cummings等報道老齡犬腦中有Aβ沉淀斑塊,同時有相應(yīng)的選擇性的行為能力損害;Higgins等報道老齡鼠可出現(xiàn)Aβ沉積于前腦基底區(qū),并有記憶缺損。但
漢坦病毒感染動物模型2019/08/30
漢坦病毒(HantaVirus,HV),亦稱流行性出血熱病毒,分類學(xué)上屬于布尼亞病毒科,是有包膜分節(jié)段的負(fù)鏈RNA病毒。此屬病毒能引起人類兩種死亡率很高的疾病,即腎綜合征出血熱(HFRS)和漢坦病毒肺綜合征(HPS)。在亞洲流行的主要有HTNV株引起的重型HFRS及由SEOV株引起的輕型HFRS,分別由黑線姬鼠和褐家鼠攜帶傳播。自從國外研究者通過傳代適應(yīng)建立個感染性實驗動物模型以來,國內(nèi)外學(xué)者已分別建立了大鼠、長爪沙鼠、兔、金黃地鼠、乳小鼠和裸小鼠等HV感染動物模型
低溫冷凍腦損傷模型2019/08/16
低溫冷凍腦損傷模型低溫冷凍腦損傷模型是一種類似于人腦挫傷的動物模型,主要為血管源性腦水腫,是常用的顱腦損傷實驗?zāi)P?。該模型具體制作方法:手術(shù)前大鼠禁食l晚,不禁水。動物稱重后,麻醉成功后,動物頭部固定于江灣Ⅰ型C立體定向儀上,頭部備皮,安爾碘消毒后,于中線切開頭皮,剝離骨膜,在冠狀縫后、人字縫前、矢狀縫右側(cè)顯微手術(shù)電鉆顱骨鉆孔。骨窗直徑為5mm,用于致傷和行顱內(nèi)壓監(jiān)測。將自制冷凍杯置入液氮中1min預(yù)冷,盛入液氮后迅速從液氮罐中取出,立即蓋上杯蓋,用冷凍杯底部與硬腦膜充分接觸15s,冷凍處硬腦膜
腎扎性高血壓模型2019/08/16
腎扎性高血壓模型【操作步驟】常用動物為成年SD或Wistar大鼠,120~150g大鼠,麻醉,俯臥位固定,腹部下方墊一高約2~3cm的棉紗,腹部手術(shù)區(qū)備皮,消毒皮膚,從第10胸椎到第3腰椎處沿脊柱中線切開皮膚,在左側(cè)季肋下1.5~2cm和距脊柱1cm處用小血管鉗分開肌肉,用兩指從腹下部將腎臟自創(chuàng)口中擠出,小心地將腎臟與周圍組織剝離,將自制的雙層乳膠薄膜剪成“X’形,繞腎門將腎臟交叉包扎,然后在相對側(cè)切開,取出右腎,分離后切除,后分層縫合手術(shù)切口。皮下注射1萬~2萬單位青霉素G。手術(shù)后可加飲1%氯
腦血管病動物模型2019/08/16
1自發(fā)性腦梗死模型高血壓動物可形成自發(fā)性腦梗死。常用的有原發(fā)性高血壓和繼發(fā)性高血壓兩大類。前者以日本種的自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)及其易卒中亞型(SHRsp)為常用,后者為各種腎性高血壓動物。這種腦梗死與人類的腦梗死發(fā)病情況為接近,是目前較為理想的動物模型之一,國內(nèi)主要的實驗動物研究機構(gòu)都有供應(yīng)。2沙鼠大腦中動脈缺血模型【操作步驟】成年沙鼠,10%水合氯醛(4ml/kg)腹腔麻醉,沿腹部中線于頸部切開。剝離出一側(cè)頸動脈,用銀制鉗夾夾閉。考慮實驗需要可實行長期夾閉或可再灌注。【結(jié)果分析】由于沙鼠后
打擊損傷法2019/08/09
打擊損傷法基本方法是利用外力如下落的單擺撞擊、金屬球打擊動物的頭部。形成閉合性腦損傷,多用于復(fù)制腦震蕩模型和局灶性腦挫傷模型。打擊損傷法有較多優(yōu)點,如保持頭部皮膚和顱骨的完整,因而與人類閉合性腦損傷情況相似。但也有以下幾個缺點:(1)由于動物頭顱自由活動,很難保持恒定,因而較難控制打擊顱腔外力的方向,使每次打擊頭顱吸收的能量不同,影響實驗的重復(fù)性。(2)不能排除動物顱骨發(fā)育和形態(tài)差異的影響。(3)不能復(fù)制分級腦損傷模型。
去氧皮質(zhì)酮鹽性高血壓模型2019/08/09
去氧皮質(zhì)酮鹽性高血壓模型【操作步驟】雄性SD大鼠100~150g,腹腔注射麻醉,腹部正中切口進行左腎切除。術(shù)后大鼠用醋酸去氧皮質(zhì)酮(D()CA)50mg/kg皮下注射,每天一次,每周給藥5d,共5周,同時飲1%NaCl溶液,停止給藥后改飲普通水。給藥1周后約50%大鼠血壓升高,給藥5周停藥后70%大鼠形成持久性高血壓,收縮壓>160mmHg(21.3kPa)者用作實驗?!咀⒁馐马棥科は伦⑸洳课辉诒巢?,應(yīng)經(jīng)常更換,注射針宜用乙醇擦拭消毒以免注射局部感染。也可采用DOCA片劑皮下包埋來造成模型。大鼠
腦牽拉傷模型2019/08/09
腦牽拉傷模型具體制作方法:大鼠行腹腔注射麻醉后,俯臥位固定于恒溫手術(shù)臺上,在偏離中線的頂骨上鉆一小孔,并擴大骨窗,側(cè)方盡可能到顱中窩底,小心剪開硬膜。用自制的帶應(yīng)變計的腦壓板作為牽開器,將顳葉向上矢狀竇方向牽拉。該模型利用特制的牽拉裝置,在19~22ms內(nèi)對視神經(jīng)施以150~180gf(1gf=9.8×10的-3次方N)牽拉力,在此范圍內(nèi),視神經(jīng)及其供應(yīng)血管均不會被拉斷,既控制了損傷程度,又避免了缺血性因素的干擾。本模型的優(yōu)點是可以對受損軸索進行逆向和順向追蹤,有利于更全面地了解軸索損傷的病理變
清醒腦損傷模型2019/08/09
清醒腦損傷模型近年清醒動物腦損傷模型研究取得了很大的進展,常采用徒手固定清醒動物來滿足定位的要求,因而所用動物多為小鼠、青蛙等溫順無攻擊力的動物。該模型定位準(zhǔn)確,致傷可靠??芍瞥煞旨壞X損傷。缺點是受力后頭顱處于靜止?fàn)顟B(tài),大腦未受到加速運動時的剪切力和張力等作用。具體制作方法:以100g砝碼為例。撞擊時,砝碼下緣距動物頭部撞擊部位為1m。木板固定大鼠四肢,清醒狀態(tài)下放置于底座上,以鑷子輕輕固定其頭部,調(diào)節(jié)升降螺絲的位置,使砝碼位于大鼠頭部雙耳前緣與眼后緣的正中連線,垂直自由落下,即可對大鼠頭部造成
瞬間旋轉(zhuǎn)腦損傷模型2019/07/25
瞬間旋轉(zhuǎn)腦損傷模型Gennarelli(1982)設(shè)計出經(jīng)典的急性彌漫性軸索損傷(diffuseaxonalinjury,DAI)瞬間旋轉(zhuǎn)模型,其實驗成功證明了DAI是一種原發(fā)性腦損傷,并由此闡述了DAI的致傷機制。具體模型制作方法:大鼠行腹腔注射麻醉后,固定于角加速度、剪應(yīng)力旋轉(zhuǎn)裝置上,使其頭顱在2ms內(nèi)旋轉(zhuǎn)90°,在慣性驅(qū)動下做非線性角加速度運動,腦冠狀面產(chǎn)生與長軸垂直的剪應(yīng)力,導(dǎo)致DAI。該模型優(yōu)點在于重復(fù)性好,頭部運動方向和距離可控性強,是DAI研究中應(yīng)用廣泛、代表性強的模型。
腦血管病2019/07/25
腦血管病1自發(fā)性腦梗死模型高血壓動物可形成自發(fā)性腦梗死。常用的有原發(fā)性高血壓和繼發(fā)性高血壓兩大類。前者以日本種的自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)及其易卒中亞型(SHRsp)為常用,后者為各種腎性高血壓動物。這種腦梗死與人類的腦梗死發(fā)病情況為接近,是目前較為理想的動物模型之一,國內(nèi)主要的實驗動物研究機構(gòu)都有供應(yīng)。2沙鼠大腦中動脈缺血模型【操作步驟】成年沙鼠,10%水合氯醛(4ml/kg)腹腔麻醉,沿腹部中線于頸部切開。剝離出一側(cè)頸動脈,用銀制鉗夾夾閉。考慮實驗需要可實行長期夾閉或可再灌注。【結(jié)果分析】由
震顫素致顫模型2019/07/05
震顫素和氧化震顫素致顫模型(1)復(fù)制方法選用雄性小鼠,體重為18~22g。按0.5mg/kg體重的劑量經(jīng)皮下注射氧化震顫素可引起震顫,潛伏期約5min,持續(xù)時間2~3h。標(biāo)準(zhǔn)對照藥可選用阿托品或東莨菪堿。在給氧化震顫紊前、給藥后1,2和3h各測定肛溫一次。(2)評分標(biāo)準(zhǔn)震顫程度:給予氧化震顫素后15,30,60min和2h對震顫進行評分。0級:無震顫;1級:輕度;2級:中度;3級:重度。流涎和流淚:給予氧化震顫素后15和30min對流涎和流淚進行評分。0級:無涎流淚;1級:輕度;2級:中度;3級
魚滕酮致帕金森病模型2019/07/05
魚滕酮致帕金森病模型(1)復(fù)制方法選Lewis大鼠,體重為300~350g,用水合氯醛(按350~400mg/kg體重的劑量)經(jīng)腹腔注射麻醉。動物俯臥位,剃除背部毛發(fā),局部皮膚消毒。將滲透微泵埋入背部皮下,從下頜角靜脈插管并將插管與微泵相連接,每日按2~3mg/kg體重的劑量灌注魚滕酮(溶于1:1的二甲亞砜/聚乙二醇溶液中),每月更換1次微泵,連用5周??蛇x擇性引起黑質(zhì)-紋狀體DA系統(tǒng)變性,在黑質(zhì)細(xì)胞內(nèi)有類似Lewy小體的α-syntrclein陽性包涵體形成。行為方面有屈曲體姿、運動減少,有時
小動物感染模型2019/07/05
小動物感染模型(1)復(fù)制方法取豚鼠、白化倉鼠、黑線倉鼠、大鼠、布氏田鼠和雛雞5個種屬的小動物,經(jīng)滴鼻分別感染10的5.7次方TCID50/mlSARS-CoVBJ201株,感染劑量分別為:豚鼠0.5ml,白化倉鼠0.2ml,黑線倉鼠0.2ml,大鼠0.3ml和雛雞0.2ml,布氏田鼠(成年和幼年)用鼻腔噴霧法。感染后每天詳細(xì)觀察并記錄感染動物的臨床表現(xiàn)。感染后第14日無痛處死模型動物,解剖后進行肉眼大體觀察,并取模型動物肺、脾、淋巴結(jié)和咽等組織進行組織病理學(xué)觀察和病毒核酸的檢測。接種感染后豚鼠出
閉合性硬膜外球囊擴張腦損傷模型2019/07/05
閉合性硬膜外球囊擴張腦損傷模型動物采用俯臥位。于矢狀縫右側(cè)靠后處旁開1mm、人字縫右側(cè)往前1mm鉆開骨窗,向前置5F漂浮導(dǎo)管,使球囊全部插入顱內(nèi)右側(cè)大腦前部腦硬膜外。分別注入0.05ml和0.1ml生理鹽水使球囊擴張產(chǎn)生不同大小的占位。球囊注水后保持1~3h,飼養(yǎng)2~3d。利用測肺嵌壓球囊模擬占位。從測肺動脈壓管口處接感受器測顱內(nèi)壓的變化值。以離子黏固劑封閉骨窗,外接壓力傳感裝置測心電圖(ECG)、血壓,記錄心率、呼吸、血壓和顱內(nèi)壓的變化。術(shù)后飼養(yǎng)中進行神經(jīng)功能評分。
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