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上海極威生物科技有限公司
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細胞傳代具體操作細節(jié)2015/09/24
通常情況下，我們一般將細胞分為兩類，一類是貼壁細胞，一類是懸浮細胞，很多客戶在給細胞傳代的時候，往往因為有些細節(jié)沒有注意好，導(dǎo)致細胞存活率低、狀態(tài)差、活性不好，今天我們來具體講下這兩類細胞傳代時的具體細節(jié)：一、貼壁細胞傳代1.提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)。2.吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞。3.加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入
細胞復(fù)蘇的具體操作步驟2015/09/24
上一節(jié)我們講到細胞凍存的具體操作步驟，這一節(jié)我們來詳細了解下細胞的復(fù)蘇的操作步驟及要點：細胞復(fù)蘇操作要點：1、將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。2、將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，避免引起污染。3、用75%酒精擦
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