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芽胞懸液獲取的兩種方法介紹2023/05/31: 目前中國(guó)藥典、消毒技術(shù)規(guī)范中用于各種化學(xué)消毒劑、干熱、環(huán)氧乙烷、高壓蒸汽等滅菌效果的驗(yàn)證和評(píng)價(jià)的芽胞懸液的獲得主要通過(guò)自制和商品化兩種途徑。一、自制芽胞懸液(1)菌種處理：取凍干菌種管，在無(wú)菌操作下打開(kāi)，以毛細(xì)吸管吸加適量營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，輕柔吹吸數(shù)次，使菌種融化分散。取含5～10ml營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基試管，滴入少許菌種懸液，置37℃培養(yǎng)18～24小時(shí)。用接種環(huán)取第1代培養(yǎng)的菌懸液，劃線(xiàn)接種于營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平板上，于37℃培養(yǎng)18～24小時(shí)。挑取上述第2代培養(yǎng)物中典型菌落，接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，于37

質(zhì)控菌株復(fù)蘇保存相關(guān)問(wèn)題解答2023/05/31: 微生物實(shí)驗(yàn)室如果從事致病菌檢測(cè)、培養(yǎng)基質(zhì)控驗(yàn)收、方法驗(yàn)證等相關(guān)工作，就應(yīng)該備有質(zhì)控菌株。實(shí)驗(yàn)室需對(duì)使用的質(zhì)控菌株進(jìn)行規(guī)范性管理，以便有效地、安全地使用，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，今天遠(yuǎn)慕生物為大家總結(jié)了實(shí)驗(yàn)室質(zhì)控菌株復(fù)蘇保存過(guò)程中常見(jiàn)的問(wèn)題。1.菌株保存的是第三代，-80℃保存，再取出來(lái)活化的話(huà)屬于第幾代？答：保存的是第三代復(fù)活出來(lái)后，如果采用平板或肉湯活化相當(dāng)于轉(zhuǎn)接了一代，就是第四代了，如果還在瓷珠里的話(huà)就還是原來(lái)的代數(shù)。如果是保存在斜面上，這一支斜面一直就是第三代，如果轉(zhuǎn)接到另一支斜面就是第四代

熒光定量PCR標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)有幾個(gè)梯度?2023/05/31: 相對(duì)定量相對(duì)定量得到的結(jié)果為特定樣本中目的基因相對(duì)于另一參照樣本的量的變化。在某些不需要對(duì)基因進(jìn)行絕對(duì)定量，只需要確定基因相對(duì)表達(dá)差異的情況下，如某樣品在經(jīng)過(guò)某種處理后目的基因表達(dá)量是增加了還是減少了，用相對(duì)定量的方法就可以得到結(jié)果，相對(duì)定量是一種更普遍、更簡(jiǎn)單的方法。內(nèi)參基因?qū)嶒?yàn)操作中，由于選取樣品時(shí)，其細(xì)胞個(gè)數(shù)不可能wan全相同、RNA提取的得率不同、RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA的效率不同等客觀(guān)因素，用于定量分析的初始樣品濃度不同，這就造成了比較上的混亂，因此在進(jìn)行基因表達(dá)調(diào)控研究中需要使用內(nèi)參基

有關(guān)營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株的應(yīng)用介紹2023/05/31: 在理論研究中，營(yíng)養(yǎng)缺陷型不僅被廣泛應(yīng)用于闡明微生物代謝途徑上，而且在遺傳學(xué)的研究中具有特殊的地位。在轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、原生質(zhì)體融合、質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座因子等遺傳學(xué)研究中，營(yíng)養(yǎng)缺陷型是常用的標(biāo)菌種。此外，營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株還是研究基因的結(jié)構(gòu)與功能常用的材料。在生產(chǎn)實(shí)踐中，營(yíng)養(yǎng)缺陷型可以用來(lái)切斷代謝途徑，以積累中間代謝產(chǎn)物；也可以阻斷某一分支代謝途徑，從而積累具有共同前體的另一分支代謝產(chǎn)物；營(yíng)養(yǎng)缺陷型還能解除代謝的反饋調(diào)節(jié)機(jī)制，以積累合成代謝中某一末端產(chǎn)物或者中間產(chǎn)物；也可將營(yíng)養(yǎng)缺陷型菌株作為生產(chǎn)菌株雜交、重組育種的

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基本要求與操作步驟2023/05/30: 細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)已經(jīng)成為當(dāng)今生命科學(xué)各領(lǐng)域的基礎(chǔ)技術(shù)和基本技能，它也是細(xì)胞工程、基因工程和生物醫(yī)學(xué)工程的重要研究手段。那我們?cè)趯?shí)際的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中需要注意哪些基本要求呢？1、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)前必須分門(mén)別類(lèi)地制訂操作卡片，如清洗卡、消毒卡、細(xì)胞常用液（細(xì)胞培養(yǎng)液、BSS液、消化液）配制卡、牛血清檢測(cè)分裝卡、細(xì)胞原代和傳代操作卡等。各卡片上注明實(shí)驗(yàn)所需器材的名稱(chēng)、規(guī)格、數(shù)量、操作要領(lǐng)和實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)等。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)按卡片收集、清點(diǎn)所需用品，一并放入超凈臺(tái)內(nèi)，這樣可避免操作時(shí)因物品不全而往返拿取所浩成的污染。

瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)(單向和雙向)操作步驟2023/05/30: 實(shí)驗(yàn)概要可溶性抗原與相應(yīng)抗體在半固體瓊脂凝膠內(nèi)擴(kuò)散，二者相遇，在比例合適處形成白色沉淀?；绢?lèi)型有單向擴(kuò)散和雙向擴(kuò)散兩種。本文介紹了單向和雙向兩種瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)的操作流程。單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)主要用于檢查血清中各種免疫球蛋白和補(bǔ)體成份的含量；雙向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)可用來(lái)分析和鑒定標(biāo)本中多種抗原或抗體成份，并用以測(cè)定抗原或抗體的效價(jià)。實(shí)驗(yàn)原理1.單向瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)是一種定量試驗(yàn)，將抗體混合于瓊脂內(nèi)，傾注于玻片或平皿上，凝固后在瓊脂上打孔，再將抗原標(biāo)本加入孔內(nèi)，經(jīng)過(guò)一定的時(shí)間，在孔的周?chē)霈F(xiàn)抗原抗體復(fù)合物形成的沉

PCR產(chǎn)物的兩種檢測(cè)方法介紹2023/05/30: PCR產(chǎn)物的檢測(cè)方法：瓊脂糖凝膠電泳這是實(shí)驗(yàn)室最chang用的方法，簡(jiǎn)便易行，只需少量DNA即可進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。其原理是不同大小的DNA分子通過(guò)瓊脂糖凝膠時(shí)，由于泳動(dòng)速度不同而被分離，經(jīng)溴化乙錠（EB）染色，在紫外光照射下DNA分子發(fā)出熒光而判定其分子的大小。用于電泳檢測(cè)PCR產(chǎn)物的瓊脂糖濃度常為1%—2%，應(yīng)該使用純度高的電泳純級(jí)瓊脂糖，這種瓊脂糖已除去了熒光抑制劑及核酸酶等雜質(zhì)。（1）制膠瓊脂糖凝膠厚度約為3~5mm。過(guò)薄則加樣孔樣品會(huì)溢出來(lái)，過(guò)厚觀(guān)察時(shí)熒光穿透不強(qiáng)以至有些小片段DNA帶型不易分辨

捕獲法測(cè)定IgM抗體的基本操作步驟2023/05/30: 血清中針對(duì)某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時(shí)存在，后者會(huì)干擾IgM抗體的測(cè)定。因此測(cè)定IgM抗體多用捕獲法，先將所有血清IgM（包括異性IgM和非特異性IgM）固定在固相上，在去除IgG后再測(cè)定特異性IgM。操作步驟如下：⑴將抗人IgM抗體連接在固相載體上，形成固相抗人IgM。洗滌。⑵加入稀釋的血清標(biāo)本：保溫反應(yīng)后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分。⑶加入特異性抗原試劑：它只與固相上的特異性IgM結(jié)合。洗滌。⑷加入針對(duì)特異性的酶標(biāo)抗體：使之與結(jié)合在

標(biāo)準(zhǔn)品常見(jiàn)的容器及如何取用？2023/05/29: 標(biāo)準(zhǔn)品一詞常作為泛稱(chēng)。在色譜分析工作中，我們進(jìn)行樣品理化分析時(shí)常用的標(biāo)準(zhǔn)品大多屬于“化合物純度/濃度標(biāo)準(zhǔn)品”。此時(shí)，“標(biāo)準(zhǔn)品”這一稱(chēng)呼涵蓋了非醫(yī)藥行業(yè)常說(shuō)的“標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)”、“標(biāo)準(zhǔn)樣品”以及醫(yī)藥行業(yè)常說(shuō)的“中藥對(duì)照品”、“化學(xué)對(duì)照品”等。“標(biāo)準(zhǔn)品”一詞作為特指時(shí)，專(zhuān)指藥典體系標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)中的“標(biāo)準(zhǔn)品”。《中國(guó)藥典》四部0291國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)通則中有明確定義，此部分內(nèi)容目前在2020版藥典中未作修訂。常見(jiàn)容器包括不同規(guī)格的玻璃安瓿瓶與帶蓋玻璃瓶。通常情況下，固體、半固體純品通常使用帶蓋玻璃瓶裝，也有使用

關(guān)于藥品化學(xué)鑒別法的介紹說(shuō)明2023/05/29: 一、專(zhuān)屬鑒別試驗(yàn)藥物的專(zhuān)屬鑒別試驗(yàn)是證實(shí)某一種藥物的依據(jù),它是根據(jù)每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)上的差異所引起的物理化學(xué)特性,選用某些特te有的靈敏度高的反應(yīng)來(lái)鑒別藥物的真?zhèn)?。如巴bi妥類(lèi)藥物含有丙二酰脲的相同母核,可根據(jù)其母核上取代基不同,而具有不同的理化性質(zhì)來(lái)鑒別不同的丙二酰脲類(lèi)藥物:苯巴bi妥其母核上連接的基團(tuán)為苯基,利用其苯基硝化和縮合反應(yīng)進(jìn)行專(zhuān)屬鑒別試驗(yàn)的確證鑒別;司可巴bi妥母核上連有不飽和烴鍵,利用加成特性和還原特性進(jìn)行專(zhuān)屬鑒別的確證鑒別。一般鑒別試驗(yàn)與專(zhuān)屬鑒別試驗(yàn)的不同點(diǎn)在于,一般鑒別試驗(yàn)是

有些不穩(wěn)定的化學(xué)試劑應(yīng)該怎么保存？2023/05/29: 為了減少由于保存不當(dāng)造成的化學(xué)試劑的損失?？蛻?hù)應(yīng)該清楚的了解一些不穩(wěn)定的化學(xué)試劑如何保存?實(shí)驗(yàn)室中不穩(wěn)定的化學(xué)試劑應(yīng)該怎么保存?化學(xué)試劑存放要依據(jù)物質(zhì)自身的物理性質(zhì)和化學(xué)性質(zhì)，降低或杜絕物質(zhì)變性、自然損耗。實(shí)驗(yàn)室中有很多不穩(wěn)定的化學(xué)試劑。有的易揮發(fā)、有的易燃易爆、有的試劑在保存的時(shí)候需要密封保存。常用不穩(wěn)定試劑的分類(lèi)及要求(1)與水蒸氣，水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封，并遠(yuǎn)離水源保存。如電石(CaC2),生石灰(CaO)，濃硫酸，無(wú)水硫酸銅()，各種干燥劑(硅膠，堿石灰，P2O5，CaCl2等)，K,N

試劑的分類(lèi)別再傻傻搞不清楚了！2023/05/29: 無(wú)機(jī)分析試劑無(wú)機(jī)分析試劑（Inorganicanalyticalreagent）是用于化學(xué)分析的常用的無(wú)機(jī)化學(xué)物品。其純度比工業(yè)品高，雜質(zhì)少。有機(jī)分析試劑試劑有機(jī)分析試劑（Organicreagentsforinorganicanalysis）是在無(wú)機(jī)物分析中供元素的測(cè)定、分離、富集用的沉淀劑、萃取劑、螯合劑以及指示劑等專(zhuān)用的有機(jī)化合物，而不是指一般的溶劑、有機(jī)酸和有機(jī)堿等。這些有機(jī)試劑必須要具有較好的靈敏度和選擇性。隨著分析化學(xué)和化學(xué)工業(yè)的發(fā)展，將會(huì)研制出靈敏度和選擇性更好的這類(lèi)試劑，如196

酵母菌的培養(yǎng)和觀(guān)察實(shí)驗(yàn)方法與步驟2023/05/26: 目的認(rèn)識(shí)酵母菌的形態(tài)特征，了解培養(yǎng)酵母菌的方法。實(shí)驗(yàn)前的思考人類(lèi)認(rèn)識(shí)和利用酵母菌的歷史悠久，早在shi前時(shí)期，先人們就學(xué)會(huì)釀酒。約在6000年前，就發(fā)明發(fā)面的方法。直到十九世紀(jì)有了顯微鏡，人們才窺探到醉母菌的真面目。對(duì)酵母菌做純系培養(yǎng)分類(lèi)研究的是與巴斯德同時(shí)代的丹麥人漢斯，他是為尋求釀造高品質(zhì)啤酒的途徑才去深入研究酵母菌的。材料器具甜酒釀汁液，新鮮酵母，豆芽;顯微鏡，載玻片，蓋玻皮，玻璃棒，鑷子，滴管，吸水紙，酒精燈，石棉網(wǎng)，火柴，漏斗架，玻璃斗，量杯，三角燒瓶，燒杯，天平，量筒，棉絮;蔗糖，乳

怎樣才能做好血涂片的制作及染色?2023/05/26: 要做好一張血涂片，我們應(yīng)該把它的原理，各種要求和影響因素熟記于心，還要加上適當(dāng)?shù)木毩?xí)。血涂片的制作一、原理：將一小滴血液均勻涂在玻片上，呈單層分布，制成薄血片。用瑞氏染液進(jìn)行染色。二、載波片的要求：制備血涂片使用的載玻片要有很好的清潔度。新的載玻片常有游離堿質(zhì)，應(yīng)用清洗液或10%鹽酸浸泡24小時(shí)，然后再?gòu)豥i清洗。用過(guò)的載玻片可放入適量肥皂水或洗滌劑的水中煮沸20分鐘，再用熱水將肥皂和血膜洗去，用自來(lái)水反復(fù)沖洗，然后擦干備用。三、操作：1、用毛細(xì)吸管吸取EDTA抗凝的外周血5-7UL，或者直接采

HE染色的方法步驟及注意事項(xiàng)2023/05/26: 一、實(shí)驗(yàn)步驟：（1）樣品制備：對(duì)于貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞，胰酶消化，調(diào)整細(xì)胞濃度約1×105/ml，滴加于蓋玻片上(置于6孔板中)，培養(yǎng)相應(yīng)時(shí)間后，取出細(xì)胞爬片，用PBS洗滌3次。（2）樣品固定：95%乙醇固定20min，PBS洗滌2次，每次1min。（3）染核：蘇木素染液染色2-3min，自來(lái)水洗滌。（4）分色：鏡下觀(guān)察，若細(xì)胞核染色過(guò)深，用1%鹽酸酒精溶液分色數(shù)秒，自來(lái)水洗滌。（5）染胞質(zhì)：浸入伊紅染液染色1min，自來(lái)水洗滌。（6）吹干或自然晾干細(xì)胞爬片后，中性樹(shù)膠封片。若細(xì)胞用4%多聚甲醛固定，則

常見(jiàn)分光光度計(jì)種類(lèi)及區(qū)別分析2023/05/26: 分光光度計(jì)是一種分析測(cè)量光譜的儀器，因?yàn)閼?yīng)用需求的不同，分光光度計(jì)有著不同的種類(lèi)。分光光度計(jì)按照波長(zhǎng)及應(yīng)用領(lǐng)域的不同可以分為：(1)可見(jiàn)光分光光度計(jì)(2)紫外分光光度計(jì)(3)紅外分光光度計(jì)(4)熒光分光光度計(jì)(5)原子吸收分光光度計(jì)現(xiàn)今生命科學(xué)領(lǐng)域比較流行的超微量分光光度計(jì)是屬于紫外分光光度計(jì)的一種。(1)可見(jiàn)分光光度計(jì)用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光(400～760nm)的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器，稱(chēng)為可見(jiàn)分光光度計(jì)?？稍?00nm測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。(2)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)用來(lái)測(cè)量

過(guò)氧化物酶和堿性磷酸酶相關(guān)介紹2023/05/25: 用于標(biāo)記抗體或抗抗體的酶須具有下列特性：有高度的活性和敏感性；在室溫下穩(wěn)定；反應(yīng)產(chǎn)物易于顯現(xiàn)；能商品化生產(chǎn)。當(dāng)前應(yīng)用較多的有辣根過(guò)氧化物酶（HRP）、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以HRP應(yīng)用最guang。過(guò)氧化物酶過(guò)氧化物酶廣泛分布于植物中，辣根中含量最高，從辣根中提取的稱(chēng)辣根過(guò)氧化物酶（HRP），是由無(wú)色酶蛋白和深棕色的鐵卟啉構(gòu)成的一種糖蛋白（含糖量18%），分子量約40000，約由300個(gè)氨基酸組成，等電點(diǎn)為pH3-9，催化反應(yīng)的最適pH值因供氫體不同而稍有差異，一般多在pH5左右。此酶

菌種保藏及活化使用說(shuō)明2023/05/25: 菌種保藏的方法很多，但原理大同小異。首先要挑選優(yōu)良純種。利用微生物的孢子、芽孢及營(yíng)養(yǎng)體；其次，根據(jù)其生理、生化性，人為創(chuàng)造低溫、干燥或缺氧等條件，抑制微生物的代謝作用，使其生命活動(dòng)降低到極低的程度或處于休眠狀態(tài)，從而延長(zhǎng)菌種生命以及使菌種保持原有的形狀，防止變異。不管采用哪種保藏方法，在菌種保存過(guò)程中要求不死亡、不污染雜菌和不退化。短期：斜面保藏斜面保藏是目前最pu遍的短期保藏法，操作簡(jiǎn)單，使用方便，但需定期接種。因此工作量較大，而且傳代次數(shù)多易發(fā)生變異，因此，僅適用于短期經(jīng)常使用的菌種。1.配

微生物實(shí)驗(yàn)室常見(jiàn)錯(cuò)誤操作，科研人避雷！2023/05/25: 微生物實(shí)驗(yàn)步驟繁多，在樣品多的情況下很容易出錯(cuò)。跟著遠(yuǎn)慕生物一起來(lái)看看，如何避免犯同款錯(cuò)誤！使用過(guò)期或吸潮試劑試劑過(guò)期和吸潮會(huì)影響微生物的生長(zhǎng)繁殖，吸潮的試劑稱(chēng)重不準(zhǔn)確。要根據(jù)試劑的特性放置于相應(yīng)的環(huán)境進(jìn)行保存；做實(shí)驗(yàn)前要注意試劑是否在保質(zhì)期內(nèi)，查看開(kāi)瓶日期及瓶口密封性，確認(rèn)試劑是否變質(zhì)和吸潮。器皿清洗不徹di實(shí)驗(yàn)器皿的清洗是實(shí)驗(yàn)前的一項(xiàng)重要準(zhǔn)備工作，是實(shí)驗(yàn)的基本條件。玻璃器皿可采用干熱或濕熱滅菌的方式滅菌，剪刀、勺子等物品要做到做樣專(zhuān)用。培養(yǎng)基制備未記錄每次配制要做好標(biāo)記，如名稱(chēng)、容量、滅菌溫

培養(yǎng)基ph調(diào)整的注意事項(xiàng)2023/05/25: 測(cè)定培養(yǎng)基pH的最準(zhǔn)確的方法是使用pH計(jì)，使用前必須用已知pH的（通常pH為4-7）標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液進(jìn)行校準(zhǔn)。將pH計(jì)的電極用蒸餾水沖洗后浸入到燒杯的培養(yǎng)基中，就可以從pH計(jì)的刻度讀出培養(yǎng)基的pH。每個(gè)生產(chǎn)廠(chǎng)商對(duì)每種不同pH計(jì)都提供有詳細(xì)的操作說(shuō)明。接下來(lái)遠(yuǎn)慕為大家詳細(xì)解答。配制培養(yǎng)基時(shí)，使用帶機(jī)械攪拌的pH計(jì)可以很容易地調(diào)整pH。培養(yǎng)基位在能夠不停攪拌的容器（如大燒杯）中配制，使用磁力攪拌器，磁力攪拌器帶有聚乙烯或聚四氟乙烯包裝的磁棒。含瓊脂的培養(yǎng)基需在融化后調(diào)整其pH，用可加熱的磁力攪拌器很容易

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