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上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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遠(yuǎn)慕教您如何分辨ELISA試劑盒的真假2023/05/10
一、可利用交叉實(shí)驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:1.取出購買的試劑盒A的包被板兩條;2.一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;3.另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線;4.后續(xù)操作按照試劑盒說明書進(jìn)行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物;5.實(shí)驗(yàn)完畢后,檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。6.如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該
簡述elisa試劑盒原理與試劑盒成分2023/05/10
elisa試劑盒試驗(yàn)原理:試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA).已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。elisa試劑盒組成結(jié)構(gòu):1、血清:操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿:EDTA、檸
實(shí)驗(yàn)室常用小型儀器的維護(hù)、保養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)2023/05/10
實(shí)驗(yàn)室常用小型設(shè)備包括:天平、水分測定儀、超純水機(jī)、PH計(jì)、電導(dǎo)率儀等,相比大型分析儀器,小型設(shè)備對環(huán)境條件要求相對少,但對于它們的維護(hù)保養(yǎng)卻同樣值得重視,以電子天平為例,無論是使用、維護(hù)、保養(yǎng)都應(yīng)該謹(jǐn)慎對待,否則,稱量稍有誤差,就會導(dǎo)致后續(xù)的一系列分析數(shù)據(jù)失去參考價值。本文今天主要針對電子天平、PH計(jì)(酸度計(jì))、紫外可見分光光度計(jì)、電導(dǎo)率儀等小型儀器的維護(hù)、使用、及保養(yǎng)原則予以整理。一、電子天平的使用、維護(hù)、保養(yǎng)1.使用條件:稱量臺:穩(wěn)固的實(shí)驗(yàn)臺或石臺,不得用鐵板制品、塑料和玻璃制品的材料。工
優(yōu)級純、分析純、色譜純、色譜試劑有何區(qū)別?2023/05/10
試劑規(guī)格基本上按純度(雜質(zhì)含量的多少)劃分,共有高純試劑、光譜純試劑、基準(zhǔn)試劑、分光純試劑、優(yōu)級純試劑、分析試劑和化學(xué)純試劑等7種。國家和主管部門頒布質(zhì)量指標(biāo)的主要優(yōu)級純、分級純和化學(xué)純3種。選用不同純度試劑的標(biāo)準(zhǔn)主要是不同的反應(yīng)需求,以及該試劑所含雜質(zhì)對分析要求有無影響。按照國家標(biāo)準(zhǔn),根據(jù)試劑中所含雜質(zhì)的多少,劃分為三個等級國對比如下:實(shí)驗(yàn)試劑(LR:Laboratoryreagent),又稱四級試劑。除了上述四個級別外,目前市場上尚有:化學(xué)試劑;基準(zhǔn)試劑:專門作為基準(zhǔn)物用,可直接配制標(biāo)準(zhǔn)溶液
簡述亞甲基藍(lán)的基本信息以及制備方法2023/05/09
亞甲基藍(lán)的基本信息亞甲基藍(lán),化學(xué)式為C16H18N3ClS,是一種吩噻嗪鹽,為深綠色青銅光澤結(jié)晶或粉末,可溶于水和乙醇,不溶于醚類。亞甲基藍(lán)在空氣中較穩(wěn)定,其水溶液呈堿性,有毒。亞甲基藍(lán)廣泛應(yīng)用于化學(xué)指示劑、染料、生物染色劑和藥物等方面?;瘜W(xué)式:C16H18ClN3S分子量:319.852CAS號:61-73-4EINECS號:200-525-2制備方法1、由N,N-二甲ji苯胺進(jìn)行亞硝化,經(jīng)還原生成對氨基二甲ji苯胺,再用重鉻酸na、硫代硫酸鈉進(jìn)行氧化、硫化及縮合,然后用氯化鋅成鹽、鹽析、過濾
實(shí)驗(yàn)室96孔板接種細(xì)胞詳細(xì)步驟2023/05/09
為了做實(shí)驗(yàn),細(xì)胞鋪勻是常見的一種。然而,有許多人不是很成功,分布也不均勻:要么中間密集,周圍稀疏,要么周圍密集,中間禿頂。以下是利用96孔板把細(xì)胞鋪勻,希望對大家有用!方法/步驟1、通常,在96孔板的每個孔中加入100微升細(xì)胞懸浮液。從底部附近的井的左側(cè)添加細(xì)胞懸浮液。加入一半平板后,混合細(xì)胞懸液,不要再加入,繼續(xù)加入剩余的一半平板。添加完所有板后,蓋上板,用左手輕輕握住板的左側(cè),用右手輕輕輕敲板的右邊緣,注意抓力(我通常輕敲三次)。如果它太強(qiáng)或太多次,細(xì)胞就會被濃縮和堆積。順時針旋轉(zhuǎn)盤子(逆時
肥大細(xì)胞(甲苯胺藍(lán))染色液的操作步驟2023/05/09
肥大細(xì)胞(Mastcell)是疏松結(jié)締組織內(nèi)常見的細(xì)胞,常成群的沿著小血管和淋巴管分布,也常見于支氣管和胰腺的小葉間導(dǎo)管周圍,一般細(xì)胞較大,直徑約為20-30μm,呈圓形或橢圓形,胞核較小、胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大且具有異染性嗜酸性顆粒。甲苯胺藍(lán)(ToluidineBlueO)中的陽離子有染色作用,組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽離子相結(jié)合而被染色。甲苯胺藍(lán)還含有兩個助色團(tuán),能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類,幫助發(fā)色團(tuán)對組織產(chǎn)生染色力,使切片上的組織細(xì)胞著色,可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色。肥大細(xì)胞顆粒呈紫紅色,其他呈藍(lán)色。操
瑞氏染色法:染色方法和注意事項(xiàng)2023/05/09
瑞氏染色法:染色方法和注意事項(xiàng)(1)血涂片干透后固定,否則細(xì)胞在染色過程中容易脫落。(2)沖洗時應(yīng)以流水沖洗,不能先倒掉染液,以防染料沉著在血涂片上。沖洗時間不能過久,以防脫色。如血涂片上有染料顆粒沉積,可滴加甲醇,然后立即用流水沖洗。(3)染色過淡可以復(fù)染,復(fù)染時應(yīng)先加緩沖液,然后加染液。染色過深可用流水沖洗或浸泡,也可用甲醇脫色。(4)瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇(AR級以上)和甘油組成,Ⅱ液為磷酸鹽緩沖液(pH6.4~pH6.8)。瑞氏(Wright)染色液的配制方法瑞氏(Wright)染
實(shí)驗(yàn)室PCR產(chǎn)物的電泳以及純化分析2023/05/08
實(shí)驗(yàn)室PCR產(chǎn)物的電泳及純化一、目的(1)了解PCR產(chǎn)物電泳與純化的原理。(2)熟悉和掌握PCR產(chǎn)物電泳與純化的操作。二、原理在PCR過程中,部分引物和dNTPs在Taq酶等因子的作用下以DNA模板為指導(dǎo)合成新的DNA分子,當(dāng)然還有一部分的引物和dNTPs沒有完成所期望的任務(wù),以小分子的形式存在于PCR產(chǎn)物混合液中,為了后續(xù)分子克隆的工作能夠順利進(jìn)行,PCR產(chǎn)物就需要進(jìn)行純化,以去除PCR產(chǎn)物混合液中殘留的Taq酶、BSA、Mgt+、引物dNTPs.buffer中的小分子以及非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物。通
怎樣提高擴(kuò)增效率和PCR的特異性?2023/05/08
引物引物設(shè)計(jì):引物長度適當(dāng),18-24mers,并保證序列獨(dú)te性,以降低序列在非目的片段中存在的可能性,但長度大于24核苷的引物并不意味著有更高的特異性,較長的序列可能會與錯誤配對序列雜交,反而降低特異性,而且長序列比短序列雜交慢,影響產(chǎn)量;引物濃度:引物的濃度會影響特異性。最佳的引物濃度一般在0.1到0.5μM。較高的引物濃度會導(dǎo)致非特異性產(chǎn)物擴(kuò)增。Mg2+較高的Mg2+濃度可以增加產(chǎn)量,但也會降低特異性。為了確定最佳濃度,從1mM到3mM,以0.5mM遞增,進(jìn)行最適Mg2+濃度測定。退火溫
四種滴定分析的滴定方式說明2023/05/08
(1)直接滴定法:凡能滿足滴定分析要求的反應(yīng)都可用標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液直接滴定被測物質(zhì)。例如用NaOH標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液可直接滴定HCl、等試樣(2)返滴定法:返滴定法(又稱回滴法)是在待測試液中準(zhǔn)確加入適當(dāng)過量的標(biāo)準(zhǔn)溶液,待反應(yīng)wan全后,再用另一種標(biāo)準(zhǔn)溶液返滴剩余的第一種標(biāo)準(zhǔn)溶液,從而測定待測組分的含量。這種滴定方式主要用于滴定反應(yīng)速度較慢或反應(yīng)物是固體,加入符合計(jì)量關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液后,反應(yīng)常常不能立即完成的情況。例如,鋁離子與EDTA(一種配位劑)溶液反應(yīng)速度慢,不能直接滴定,可采用返滴定法(3)置換
有機(jī)化學(xué)中幾種試劑介紹2023/05/08
幾種溶解性能良好的化工溶劑,被稱為萬/能溶劑.二甲基亞砜廣泛用作溶劑和反應(yīng)試劑,特別是丙希腈聚合反應(yīng)中作加工溶劑和抽絲溶劑,作聚氨酯合成及抽絲溶劑,作聚酰胺,聚酰亞胺和聚砜樹脂的合成溶劑,以及芳烴,丁二烯抽提溶劑和合成氯氟/苯胺的溶劑等.四氫/呋喃具有低毒、低沸點(diǎn)、流動性好等特點(diǎn),是一種重要的有機(jī)合成原料和優(yōu)良的溶劑,具有廣泛的用途,四氫/呋喃對許多有機(jī)物有良好的溶解性,它能溶解除聚乙/烯,聚丙烯及氟樹脂以外的所有有機(jī)化合物,特別是對聚氯乙/烯,聚偏氯乙/烯,和叮苯胺有良好的溶解作用,有萬/能溶
薄層層析法的簡介和制備過程2023/05/06
一、簡介薄層層析法以吸附層析使用最為普遍。常用的吸附劑為硅膠、氧化鋁等。薄層層析和其他層析法一樣,除吸附法外,也可進(jìn)行分配、離子交換、分子排阻等機(jī)理的層析,即將鋪制薄層的材料相應(yīng)換為涂以固定相的載體、離子交換劑、凝膠等,其操作與吸附法基本相同。二、過程制板鋪制薄層板時,要求基底板潔凈平整,可用干法或濕法鋪制?,F(xiàn)常用濕法制板,即將吸附劑和粘合劑(如燒石膏)按一定比例混合,加入適量水調(diào)勻,用涂布器將此勻漿緩慢地移過基底板,放置晾干,再經(jīng)適當(dāng)烘烤活化后即可使用。如不加粘合劑和水,直接將吸附劑均勻地鋪成
藥物鑒別的目的與鑒別方法2023/05/06
藥物鑒別的目的和特點(diǎn)1、藥物鑒別的目的鑒別定義:就是依據(jù)藥物的組成、結(jié)構(gòu)與性質(zhì)通過化學(xué)反應(yīng)、儀器分析或測定物理常數(shù),來判斷藥物的真?zhèn)?。鑒別試驗(yàn)僅使用于鑒別藥品的真?zhèn)螌τ谠纤庍€應(yīng)結(jié)合外觀和物理常數(shù)進(jìn)行確認(rèn)2、特點(diǎn)A、為已知物的確證試驗(yàn)——供試品為已知物,鑒別的目的是確證供試品的真?zhèn)蜝、鑒別試驗(yàn)為個別分析,非系統(tǒng)分析——一般只作一、二或三、四項(xiàng)試驗(yàn)C、通常采用不同方法鑒別,綜合分析D、鑒別制劑,要注意輔料干擾,鑒別復(fù)方制劑,注意各成分干擾藥物鑒別的常用方法藥物鑒別采用的方法應(yīng)是專屬性強(qiáng)、重現(xiàn)性好、
藥物中雜質(zhì)的xian量檢查方法介紹2023/05/06
1.對照法系指取一定量待檢雜質(zhì)的對照液與一定量供試液,在相同條件下處理后,比較反應(yīng)結(jié)果,從而判斷供試品中所含雜質(zhì)是否超過xian量。使用本法檢查藥物的雜質(zhì),須遵循平行原則。該法通常不需要準(zhǔn)確測定雜質(zhì)的含量,而是判斷藥物所含雜質(zhì)是否符合xian量規(guī)定,中國藥典主要采用本法檢查藥物的雜質(zhì)。2.靈敏度法系指在供試品溶液中加入試劑,在一定反應(yīng)條件下,觀察有無陽性反應(yīng)出現(xiàn),以不出現(xiàn)陽性反應(yīng)為合格,即以檢測條件下的靈敏度來控制雜質(zhì)xian量。本法的特點(diǎn)是不需要對照物質(zhì)。如純化水中的氯化物檢查,是在50ml純
雜質(zhì)分析的基本思路介紹2023/05/06
雜質(zhì)分析的基本思路和步驟如下:1)產(chǎn)生來源分析起始物料和原料中可能存在的雜質(zhì)分析,包括異構(gòu)體雜質(zhì)。因?yàn)槠鹗嘉锪虾驮现械碾s質(zhì)與原料結(jié)構(gòu)類似,來源一致、可能共同參與反應(yīng),最后殘留在目標(biāo)產(chǎn)物中。這部分的分析,可以從起始物料和原料的生產(chǎn)過程(來源于供應(yīng)商的信息)、起始物料的原料的理化性質(zhì)、文獻(xiàn)報道方面進(jìn)行了解與分析。反應(yīng)副產(chǎn)物分析。包括主原料潛在的副反應(yīng)、原料中的雜質(zhì)參與反應(yīng)的副產(chǎn)物等。這部分的分析,可以從化學(xué)反應(yīng)原理和相關(guān)文獻(xiàn)報道進(jìn)行了解與分析。降解產(chǎn)物分析。包括原料、中間體和產(chǎn)物、溶劑(回收溶劑)
細(xì)胞鋪板不均勻?遠(yuǎn)慕教你解決方法!2023/05/05
做細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn),細(xì)胞鋪板大概是我們最常見的一個實(shí)驗(yàn)。但有時候鋪得不是很均勻:下面為大家分享幾點(diǎn)經(jīng)驗(yàn)。1、盡量消化細(xì)胞分散成單細(xì)胞懸液。對于易于消化的細(xì)胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶潤洗一遍(25cm2培養(yǎng)瓶或6孔板),棄掉胰酶,37度消化2-3分鐘或室溫消化5min左右,鏡下觀察是否細(xì)胞消化較為分散。2、96孔板一般以100微升每孔接種,直接用100微升移液器吸取細(xì)胞懸液,沿孔壁(稍離開一點(diǎn)孔底即可,不要離底太高)直接接入,移液器不需wan全打到最大,輕輕按下即可,每鋪完一行換一
血清的具體實(shí)驗(yàn)作用你了解多少?2023/05/05
血清,在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常用到,而且在實(shí)驗(yàn)中用到的還是比較廣的,而且血清的實(shí)驗(yàn)作用還是可圈可點(diǎn)的,血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的,那么除此之外血清還有其它作用嗎?今天就跟遠(yuǎn)慕生物一起來看看血清的具體實(shí)驗(yàn)作用:①有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。②是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。③提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。④起酸
遠(yuǎn)慕教你鑒別和處理細(xì)胞污染的方法2023/05/05
一、細(xì)菌污染狀態(tài):細(xì)菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,根據(jù)感染細(xì)菌的不同,可有不同的外形,培養(yǎng)液一般會渾濁變黃,對細(xì)胞生長影響明顯。預(yù)防和補(bǔ)救:1.仔細(xì)檢查一下器皿的滅菌情況,是否在高壓滅菌時放氣時間和壓力足夠!尤其是和儲存培養(yǎng)液接觸的移液管等物品,連續(xù)兩次污染的話有可能造成儲存液污染,一定要檢查培養(yǎng)液是否存在渾濁現(xiàn)象!2.可在培養(yǎng)液或血清中加支原體預(yù)防劑。3.若細(xì)胞一旦污染,建議加支原體清除劑,能清楚常見的革蘭氏陰性和陽性菌。二、霉菌及真菌污染狀態(tài):肉眼觀察培養(yǎng)基發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基顏色基本無變化,不渾
細(xì)胞培養(yǎng)三大步驟,科研人必看!2023/05/05
01、復(fù)蘇細(xì)胞復(fù)蘇的原則:快速融化必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對細(xì)胞造成損害。實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備將水浴鍋提前預(yù)熱至37℃。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行常規(guī)消毒,用75%酒精擦拭紫外線照射40min的超凈工作臺臺面,保證無菌。在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等即將使用的耗材及試劑。取出凍存管根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的對應(yīng)編號。從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時核對管外的編號。迅速解凍迅速將
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